本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用聚乙二醇—聚己內(nèi)酯制備去細(xì)胞組織工程心臟瓣膜支架的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:應(yīng)用甲氧基聚乙二醇-聚己內(nèi)酯(methoxy poly(ethylene glycol)-poly(ε-caprolactone),MPEG-PCL)作為去細(xì)胞試劑,探索其對豬主動脈瓣的去細(xì)胞效果,并與目前常用的兩種去細(xì)胞試劑(曲拉通(Triton X-100)和脫氧膽酸鈉(sodium deoxycholate,SD))在組織形態(tài)、瓣膜相關(guān)成分、生物相容性及力學(xué)性能等方面作比較,旨在為組織工程心臟瓣膜的構(gòu)建研究提供一種新穎的去細(xì)胞方法。方法:采用開環(huán)聚合法合成MPEG-PCL,并對其進行傅里葉紅外光譜和核磁共振氫譜表征。新鮮豬主動脈瓣分別用不同濃度的MPEG-PCL進行去細(xì)胞處理,依據(jù)組織形態(tài)學(xué)觀察確定最佳去細(xì)胞濃度,并以此濃度MPEG-PCL與同濃度曲拉通和脫氧膽酸鈉分別對主動脈瓣進行處理(A組:MPEG-PCL,B組:Triton X-100,C組:SD,D組:正常瓣膜)。采用HE、MASSON染色和掃描電鏡從組織形態(tài)學(xué)評價3種試劑的去細(xì)胞效果,再測定瓣膜相關(guān)成分,測定生物相容性和力學(xué)性能并通過細(xì)胞毒性實驗測定各組去細(xì)胞瓣的毒性,從多方面評價各組瓣膜去細(xì)胞效果。結(jié)果:傅里葉紅外光譜顯示合成的共聚物具有MPEG鏈段和PCL鏈段的伸縮振動峰(3443.05cm-1、1728.66cm-1、1109.81cm-1),核磁共振氫譜顯示合成的共聚物具有MPEG鏈段和PCL鏈段的質(zhì)子峰(d1.38、1.65、2.31、4.06、3.64 ppm),通過紅外光譜和核磁共振氫譜表征顯示,成功合成MPEG-PCL,且共聚物的分子量約為4000 D。對于經(jīng)不同濃度MPEG-PCL處理的豬主動脈瓣,從光學(xué)顯微鏡下觀察,濃度為1%MPEG-PCL去細(xì)胞效果良好,細(xì)胞去除完全且瓣膜纖維結(jié)構(gòu)保持完整。1%MPEG-PCL與同濃度的曲拉通和脫氧膽酸鈉對瓣膜進行去細(xì)胞處理,并與正常瓣膜組比,各去細(xì)胞組瓣膜殘留DNA量明顯減少(A:5.00±0.11 ng/mg VS.B:21.26±0.84 ng/mg VS.C:16.31±0.83 ng/mg VS.D:336.94±9.33 ng/mg)(P0.05),其中以MPEG-PCL組殘存最少。各去細(xì)胞組瓣膜彈性蛋白含量減少(A:202.43±22.70 ng/mg VS.B:226.82±25.21 ng/mg VS.C:209.43±17.54 ng/mg VS.D:326.39±43.74 ng/mg)。而各去細(xì)胞組瓣膜含水量和膠原蛋白含量與正常瓣膜組比,未見明顯變化。各去細(xì)胞組瓣膜均見一定程度的血小板黏附,但各去細(xì)胞組的溶血率較正常組小。細(xì)胞毒性實驗表明,MPEG-PCL無細(xì)胞毒性,細(xì)胞增殖率在24小時和48小時均高于Triton X-100和SD(24h/48h:A:97.16±1.66%/98.30±1.28%VS.B:87.17±0.41%/86.79±3.10%VS.C:77.22±1.96%/72.90±2.75%VS.D:97.70±1.41%/97.72±0.72%)。從力學(xué)性能上,各去細(xì)胞瓣膜組在圓周和徑向方向的相關(guān)力學(xué)性能與正常瓣膜相比未見明顯變化。結(jié)論:濃度為1%的MPEG-PCL可用于去細(xì)胞豬主動脈瓣的制備,其去細(xì)胞效果優(yōu)于同濃度的曲拉通和脫氧膽酸鈉。MPEG-PCL無細(xì)胞毒性,能將瓣膜上的細(xì)胞去除完全,保留細(xì)胞外基質(zhì)的超微結(jié)構(gòu)完整,可作為制備組織工程心臟瓣膜去細(xì)胞生物支架的一種新試劑。
【關(guān)鍵詞】：聚乙二醇-聚己內(nèi)酯 表面活性劑 組織工程心臟瓣膜 去細(xì)胞豬主動脈瓣膜支架 細(xì)胞毒性
【學(xué)位授予單位】：南昌大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2016
【分類號】：R318.11
【目錄】：

• 摘要3-5
• ABSTRACT5-9
• 中英文縮略詞表9-10
• 第1章 前言10-12
• 第2章 實驗材料和實驗方法12-19
• 2.1 實驗材料12-13
• 2.2 MPEG-PCL的合成及結(jié)構(gòu)的確證13-14
• 2.3 新鮮豬主動脈瓣（Porcine aortic valve，PAV）獲取14
• 2.4 MPEG-PCL最佳濃度確定14-15
• 2.5 各實驗組去細(xì)胞處理過程15
• 2.6 HE和MASSON染色15
• 2.7 掃描電子顯微鏡（Scanning electron microscope，，SEM）觀察15-16
• 2.8 瓣膜相關(guān)成分的測定16
• 2.8.1 DNA含量16
• 2.8.2 含水量16
• 2.8.3 膠原蛋白和彈性蛋白含量16
• 2.9 血小板黏附實驗16-17
• 2.10 溶血實驗17
• 2.11 生物力學(xué)性能表征17-18
• 2.12 細(xì)胞毒性實驗18
• 2.13 統(tǒng)計學(xué)分析18-19
• 第3章 實驗結(jié)果與討論19-31
• 3.1 MPEG-PCL結(jié)構(gòu)的確證19-20
• 3.2 MPEG-PCL最佳濃度確定20-21
• 3.3 各實驗組組織學(xué)評價21-22
• 3.4 掃描電子顯微鏡觀察22-23
• 3.5 瓣膜相關(guān)成分的測定23-25
• 3.5.1 DNA含量23-24
• 3.5.2 含水量24
• 3.5.3 膠原蛋白和彈性蛋白含量24-25
• 3.6 血小板黏附實驗25-26
• 3.7 溶血實驗26-27
• 3.8 生物力學(xué)性能表征27-28
• 3.9 細(xì)胞毒性實驗28-31
• 第4章 結(jié)論與創(chuàng)新點31-32
• 致謝32-33
• 參考文獻33-37
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果37-38
• 綜述38-46
• 參考文獻44-46

【相似文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 陳耀忠;劉根娣;宋萍;高峰;;三種比色法評價4種牙科金屬材料對L-929細(xì)胞的毒性[J];中國組織工程研究;2013年08期

2 徐小川;陳大福;石銳;張立群;田偉;袁潤英;馮海蘭;;增塑淀粉的細(xì)胞毒性實驗[J];口腔頜面修復(fù)學(xué)雜志;2007年01期

3 黃雪蓮;范國書;李繼遙;;常用細(xì)胞毒性實驗在口腔局部用藥安全性評價中的應(yīng)用[J];國際口腔醫(yī)學(xué)雜志;2009年04期

4 呂曉迎;瞿穎華;楊雅敏;黃炎;;納米金與細(xì)胞相互作用機理的蛋白質(zhì)組學(xué)研究[J];功能材料;2011年06期

5 范雪梅;王穎楠;陳衛(wèi)軍;徐惠成;;京尼平交聯(lián)脫細(xì)胞豬膀胱的體外生物學(xué)性能研究[J];第三軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報;2012年19期

6 羅靜聰,李秀群,楊志明,鄧力;脫細(xì)胞羊膜的制備及其生物相容性研究[J];中國修復(fù)重建外科雜志;2004年02期

7 王皓宇;吳小濤;張紹東;沈素祥;李延報;楊惠林;唐天駟;;無定形磷酸鈣負(fù)載rhBMP-2納米緩釋體的制備及細(xì)胞毒性實驗[J];中國矯形外科雜志;2008年07期

8 張麗;成煒;劉曉華;;純鈦種植體表面不同化學(xué)組成的TiO_2涂層細(xì)胞毒性實驗研究[J];中國美容醫(yī)學(xué);2011年09期

9 吳剛;賀曉麗;張海玲;李韶菁;劉蘭霞;杜冠華;冷希崗;;殼聚糖基因納米粒子對L02細(xì)胞的作用[J];中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院學(xué)報;2008年05期

10 張文云,賈安琦,李 南,施長溪,陳吉華;齒科樁釘用纖維/樹脂復(fù)合材料細(xì)胞毒性實驗研究[J];中國美容醫(yī)學(xué);2002年04期

中國重要會議論文全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 呂曉迎;包翔;陸慧琴;閔文韻;;基于基因表達芯片技術(shù)和生物信息學(xué)方法的金屬離子細(xì)胞毒性機理初步研究[A];2004年中國材料研討會論文摘要集[C];2004年

中國博士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前8條

1 張衛(wèi)奇;納米材料作為siRNA載體及其與細(xì)胞的相互作用研究[D];北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院;2013年

2 臧夢青;應(yīng)用脫細(xì)胞氣管材料建構(gòu)組織工程氣管的實驗研究[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2010年

3 唐鍵;微圖案化表面的制備以及細(xì)胞間接觸影響干細(xì)胞分化的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2010年

4 馬意龍;基于α-氨氧基酸的新型細(xì)胞穿膜肽研究[D];華中科技大學(xué);2012年

5 王本;細(xì)胞殼化：基于表面工程的細(xì)胞功能化[D];浙江大學(xué);2011年

6 胡海梅;半乳糖—聚乙二醇—聚-L-賴氨酸/質(zhì)粒pEGFP-C1復(fù)合物納米膠束的制備和性能研究[D];中山大學(xué);2006年

7 孟維艷;純鈦表面微米—納米微結(jié)構(gòu)的構(gòu)建及生物學(xué)研究[D];吉林大學(xué);2010年

8 朱杰;新型納米材料作為抗癌藥物載體的性能和機理研究[D];復(fù)旦大學(xué);2013年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 宋彥峰;腫瘤細(xì)胞線粒體靶向遞藥系統(tǒng)的構(gòu)建及其抗腫瘤活性研究[D];第四軍醫(yī)大學(xué);2015年

2 王康華;選擇適宜的灌注去細(xì)胞方法應(yīng)用于全肝臟去細(xì)胞支架的制備[D];南方醫(yī)科大學(xué);2015年

3 賈寧;萘基水溶性聚氨酯的合成及其對細(xì)胞的熒光標(biāo)記的研究[D];天津理工大學(xué);2016年

4 孫臣;基于傒的水溶性聚氨脂化合物的合成、生物相溶性及其對細(xì)胞的熒光標(biāo)記[D];天津理工大學(xué);2016年

5 朱志剛;應(yīng)用聚乙二醇—聚己內(nèi)酯制備去細(xì)胞組織工程心臟瓣膜支架的研究[D];南昌大學(xué);2016年

6 鄭書全;豬與人無細(xì)胞真皮生物學(xué)特性的比較研究[D];西南大學(xué);2007年

7 劉芳;硅殼納米顆粒與細(xì)胞的生物效應(yīng)研究[D];湖南大學(xué);2006年

8 王雪琴;用于抗腫瘤藥物評價的三維腫瘤細(xì)胞體系的構(gòu)建及性能研究[D];浙江大學(xué);2014年

9 王曄;殼聚糖水溶性衍生物及其溫敏水凝膠細(xì)胞活性、相容性評價[D];中國海洋大學(xué);2007年

10 謝慶條;hBMP-2基因修飾BMSCs細(xì)胞膜片的異體凍干骨輸送盤構(gòu)建及其成骨機制的研究[D];廣西醫(yī)科大學(xué);2013年

  本文關(guān)鍵詞：應(yīng)用聚乙二醇—聚己內(nèi)酯制備去細(xì)胞組織工程心臟瓣膜支架的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：404136