目的:研究微流控技術(shù)制備載骨髓間充質(zhì)干細(xì)(bone mesenchymal stem cell,BMSC)海藻酸微球的技術(shù)方法;探索載BMSC海藻酸微球與磷酸鈣骨水泥(calcium phosphate cement,CPC)復(fù)合的可行性,為此類骨修復(fù)材料發(fā)展策略提供新的依據(jù)。方法:1.利用微流控技術(shù)制備熒光海藻酸微球及載BMSC海藻酸微球,觀察其形態(tài)并探索其包裹的BMSC的存活、增殖情況和成骨分化潛能全骨髓差速貼壁法分離培養(yǎng)、純化SD大鼠BMSC;制作微流芯片,通過微流控技術(shù)制備熒光海藻酸微球及載BMSC海藻酸微球。顯微鏡下觀察熒光海藻酸微球的形態(tài)、分布情況;設(shè)對照組(BMSC組)、多細(xì)胞微球組(M-BMSC-Gel組)、單細(xì)胞微球組(S-BMSC-Gel組),利用光學(xué)顯微鏡觀察微球的形態(tài),測量微球的最大直徑和面積;利用激光共聚焦與倒置熒光顯微鏡觀察微球中BMSC生長狀況,通過Live/Dead染色觀察BMSC的存活情況;利用CCK-8檢測BMSC的代謝活性,及通過DAPI細(xì)胞核染色觀察微球中BMSC的增殖情況;通過ALP活性檢測、茜素紅染色、SEM觀察及能譜分析、RT-PCR檢測海...

【文章頁數(shù)】：89 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖1-1海藻酸微球在水介質(zhì)中熒光圖像（100×）

△△Ct=[實驗組(Ct目的-Ct內(nèi)參)],2-△△Ct表示實驗組相對于對照組目的基因表達(dá)SS16.0統(tǒng)計軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，計量資料用以采用t檢驗，三組或三組以上采用方差分析，者Tamhane法，檢驗水準(zhǔn)α=0.05。三、實驗結(jié)果制備熒光海藻酸微球的形貌觀察控....

圖1-2載BMSC海藻酸微球光鏡圖

技術(shù)制備的載BMSC的海藻酸微球的形態(tài)、大小微流控技術(shù)制備的BMSC多細(xì)胞海藻酸微球（M-BMSC-Gel組單細(xì)胞海藻酸微球（S-BMSC-Gel組），在光學(xué)顯微鏡下觀察其微球最大直徑和微球面積，結(jié)果顯示：微流控技術(shù)制備的載BM微球，大小均勻，尺寸可控。BMSC....

圖1-3載BMSC的海藻酸微球面積和最大直徑分布圖

.微球包裹的BMSC的Live/Dead染色對BMSC組、BMSC多細(xì)胞微球組（M-BMSC-Gel組）和BMS微球組（S-BMSC-Gel組）三組進(jìn)行了Live/Dead染色，結(jié)果顯示，在1dBMSC貼壁呈鋪展?fàn)顟B(tài)，被染成綠色熒光，4dBMSC....

圖1-4三組BMSC的Live/Dead染色圖（100×）

控技術(shù)制備的骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞海藻酸微球/磷酸鈣骨水泥復(fù)合物的初步探索2019屆碩士學(xué)位論文BMSC組M-BMSC-Gel組S-BMSC-Gel組

本文編號：3968428