目的研究不同濃度的葡聚糖/明膠復(fù)合水凝膠支架材料對體外構(gòu)建組織工程髓核的影響,對其性能進(jìn)行表征,探索適用于組織工程髓核的水凝膠濃度。方法通過Schiff交聯(lián)反應(yīng)制備葡聚糖/明膠復(fù)合水凝膠支架材料,對不同濃度(6%、8%、10%、12%、14%)水凝膠的內(nèi)部形態(tài)結(jié)構(gòu)、孔徑、孔隙率、楊氏模量和細(xì)胞相容性進(jìn)行評估,分離培養(yǎng)豬原代髓核細(xì)胞,以P1代細(xì)胞在不同濃度的水凝膠內(nèi)部進(jìn)行三維培養(yǎng),MTT染色觀察細(xì)胞活性,Real-time PCR法檢測髓核細(xì)胞特異性基因aggrecan和typeⅡcollagen表達(dá)。結(jié)果葡聚糖/明膠復(fù)合水凝膠在電鏡掃描下呈現(xiàn)多孔網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),隨著濃度的升高,水凝膠的孔徑(38.182⁸2.675μm)和孔隙率(95.5%⁹8.3%)持續(xù)下降,楊氏模量不斷升高(0.135¹1.366 k Pa);該水凝膠具有較好的細(xì)胞相容性,但是6%、8%的水凝膠分別在接種細(xì)胞后第4、7天后細(xì)胞的黏附和增殖顯著下降(P<0.05)。接種1周后,濃度為10%的水凝膠內(nèi)部三維培養(yǎng)的髓核細(xì)胞活性顯著高于其他濃度水凝膠(P&l...

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圖1掃描電鏡下觀察不同濃度葡聚糖/明膠復(fù)合水凝膠支架材料的結(jié)構(gòu)和孔徑分析

圖2液體浸泡法檢測不同濃度葡聚糖/明膠復(fù)合水凝膠的孔隙率

999897969594孔隙率（%）6%8%10%12%14%水凝膠濃度圖2液體浸泡法檢測不同濃度葡聚糖/明膠復(fù)合水凝膠的孔隙率2．3水凝膠的力學(xué)性能4組水凝膠的應(yīng)力-應(yīng)變曲線見圖3。水凝膠的楊氏模量隨著濃度的升高而升高(0．135～11．366kPa)，除了6%組與8%組之間的....

圖4CCK-8法檢測豬髓核細(xì)胞在水凝膠表面的增殖活性

圖5MTT染色法檢測不同濃度葡聚糖/明膠復(fù)合水凝膠內(nèi)三維培養(yǎng)髓核細(xì)胞的活性

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