背景:多孔羥基磷灰石支架具有良好的體內(nèi)外成骨效能,但其所涉及的mi RNAs復(fù)雜調(diào)控機制相關(guān)研究較少。目的:探討多孔羥基磷灰石支架材料介導(dǎo)大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨礦化過程中相關(guān)miRNA表達譜的變化。方法:體外分離、培養(yǎng)和鑒定大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞,將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與多孔羥基磷灰石支架共培養(yǎng)為實驗組,骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞單獨培養(yǎng)為空白對照組,分別進行成骨誘導(dǎo)7 d,運用miRNA高通量測序技術(shù)分析兩組骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨礦化過程中相關(guān)miRNA表達譜的變化并進行GO分析,篩選出兩組中表達差異明顯的mi RNA分子并進行q RT-PCR驗證。結(jié)果與結(jié)論:①與空白對照組比較,成骨誘導(dǎo)7 d時實驗組BMP2、ALP、Runx2 mRNA表達上調(diào),其中BMP2上調(diào)明顯(P <0.05);②micro RNA高通量測序結(jié)果顯示mi R-210-3p、mi R-146a-5p等13個mi RNAs明顯上調(diào);let-7c-3p、let-3615等17個mi RNAs明顯下調(diào);③GO分析上調(diào)的mi RNA靶基因主要參與生物學(xué)調(diào)節(jié)、細(xì)胞基因表達、基因表達調(diào)節(jié)等,包括NF-κB、Toll樣受體9、細(xì)胞間...

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圖1光鏡下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)(×40)

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圖2流式細(xì)胞儀檢測骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物

圖1光鏡下骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的形態(tài)(×40)圖4RNA凝膠電泳圖像

圖4RNA凝膠電泳圖像

圖2流式細(xì)胞儀檢測骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞表面標(biāo)志物圖6miRNA表達譜的聚類分析及熱圖繪制

圖6miRNA表達譜的聚類分析及熱圖繪制

圖4RNA凝膠電泳圖像圖7差異miRNA靶基因參與的生物學(xué)過程

本文編號：3948834