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LIPUS作用下多孔鈦合金支架材料內(nèi)成骨誘導(dǎo)后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞和MC3T3-E1細(xì)胞生物學(xué)行為的比較研究

發(fā)布時(shí)間:2024-03-16 10:17
  目的:低強(qiáng)度脈沖超聲波(low-intensity pulsed ultrasound,LIPUS)因?yàn)槠錈o創(chuàng)性,較安全,效果佳,操作簡單以及較短的治療周期,是研究領(lǐng)域公認(rèn)的可促進(jìn)骨愈合的物理治療措施。LIPUS是一種強(qiáng)度介于30-100mW/cm2的脈沖式超聲波,它能將聲波轉(zhuǎn)化為力學(xué)信號,并以低強(qiáng)度壓力波的形式傳遞到組織中,上調(diào)細(xì)胞功能和增強(qiáng)組織再生。LIPUS還可以促進(jìn)局部缺損部位的血液循環(huán)和血管的形成及缺損部位鈣鹽沉積和骨組織的改建。LIPUS已經(jīng)在國內(nèi)外臨床上用于骨折、骨愈合不良和骨不連的治療。近年來,國內(nèi)外學(xué)者以及本課題組研究的主要目的是將LIPUS與骨支架材料結(jié)合應(yīng)用于大面積骨缺損修復(fù),為超臨界骨缺損的修復(fù)治療提供一種新的手段,而關(guān)于在“三維鈦合金支架材料+LIPUS”修復(fù)骨缺損機(jī)制的研究中,首選的細(xì)胞模型尚未明確。因此在本研究中,比較LIPUS對多孔Ti6A14V材料(titanium-6aluminum-4vanadi um,Ti6A14V)內(nèi)成骨誘導(dǎo)后骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(osteogenic medium cultured bone marrow mesenchymal...

【文章頁數(shù)】:51 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

圖1體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)多孔Ti6Al4V材料,500μm:×35用丙酮,75%的酒精和雙蒸水清洗樣品材料3次,超聲震蕩處理15min,然后

圖1體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)多孔Ti6Al4V材料,500μm:×35用丙酮,75%的酒精和雙蒸水清洗樣品材料3次,超聲震蕩處理15min,然后

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文32材料與方法2.1材料與試劑2.1.1實(shí)驗(yàn)材料的制備及規(guī)格Ti6Al4V支架材料:該材料是直徑15mm,高度2mm的圓柱體,孔徑為400-500μm,孔隙率為65%70%。它由中國科學(xué)院金屬研究所提供,見圖1,制備過程概述如下:使用均一粒徑約50μm的醫(yī)....


圖2體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)超聲加載裝置圖[19]

圖2體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)超聲加載裝置圖[19]

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文7圖2體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)超聲加載裝置圖[19]2.2.8MTT法檢測細(xì)胞增殖活性將4組共培養(yǎng)模型(同1.2.6)于1d,3d,5d,7d,棄去培養(yǎng)基,PBS漂洗,每孔加入5mg/mlMTT200μl和新鮮培養(yǎng)基800μl,在培養(yǎng)箱中孵育4h,吸出孔內(nèi)孵育液,每孔....


圖3不同時(shí)間點(diǎn)原代BMSCs形態(tài)觀察(×100)

圖3不同時(shí)間點(diǎn)原代BMSCs形態(tài)觀察(×100)

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3結(jié)果3.1小鼠BMSCs培養(yǎng)小鼠BMSCs接種3d后,鏡下可見細(xì)胞貼壁良好、集落式生長,呈長梭形或多角形,見圖2A。6d后,大部分細(xì)胞貼壁延伸,形狀逐漸變?yōu)殚L梭形,見圖2B。8d后細(xì)胞間廣泛接觸,見圖2C。10d后細(xì)胞密度可達(dá)80%左右,細(xì)胞結(jié)構(gòu)清晰,放....


圖4BMSCs成骨誘導(dǎo)不同時(shí)間染色結(jié)果

圖4BMSCs成骨誘導(dǎo)不同時(shí)間染色結(jié)果

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文伸出偽足與細(xì)胞相連。當(dāng)細(xì)胞密度逐漸增大,細(xì)胞開始重疊生長,細(xì)胞結(jié)構(gòu)不再明顯,鈣離子在細(xì)胞表面以鈣鹽方式沉淀下來,即“鈣結(jié)節(jié)”。成骨誘導(dǎo)7d,14d時(shí)采用氮藍(lán)四唑/四唑硝基藍(lán)(NBT/BCIP)染色法進(jìn)行ALP染色,細(xì)胞內(nèi)分泌的ALP顆粒被染成藍(lán)色,見圖4A....



本文編號:3929510

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