維持基因組的穩(wěn)定性和完整性對(duì)于所有生物至關(guān)重要。DNA損傷能導(dǎo)致基因組不穩(wěn)定、機(jī)體早衰、發(fā)育障礙、甚至癌癥。DNA修復(fù)酶是一類參與DNA損傷修復(fù)的酶,其主要功能是特異性識(shí)別由各種內(nèi)在或外在因素導(dǎo)致的DNA損傷,并利用各種修復(fù)途徑修復(fù)這些損傷。DNA修復(fù)酶的異常表達(dá)與衰老、心血管疾病、人體免疫缺陷、神經(jīng)退行性疾病和癌癥密切相關(guān),可作為疾病和癌癥診斷的重要生物標(biāo)志物。檢測(cè)DNA修復(fù)酶的傳統(tǒng)方法包括酶聯(lián)免疫吸附法、基于放射性標(biāo)記的凝膠電泳法、質(zhì)譜法、高效液相色譜法和基于PCR的擴(kuò)增法等。這些方法存在靈敏度差、放射性污染、儀器復(fù)雜昂貴、分析時(shí)間長(zhǎng)、操作步驟繁瑣等局限性,限制了這些方法的臨床應(yīng)用。因此,迫切需要發(fā)展簡(jiǎn)單、快捷、超靈敏檢測(cè)DNA修復(fù)酶的新方法。本論文以端粒酶、尿嘧啶DNA糖基化酶(uracil DNA glycosylase,UDG)、人烷基腺嘌呤DNA糖基化酶(human alkyladenine DNA glycosylase,hAAG)和人8-氧代鳥嘌呤DNA糖基化酶(human 8-oxoG DNA glycosylase 1,hOGG1)為研究模型,結(jié)合等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)、熒光...

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圖1-1堿基切除修復(fù)途徑示意圖[31]

山東師范大學(xué)博士學(xué)位論文5圖1-1堿基切除修復(fù)途徑示意圖[31]DNA糖基化酶分為兩類：（1）單功能DNA糖基化酶和（2）雙功能DNA糖基化酶[43]。單功能DNA糖基化酶能夠切除損傷堿基，生成脫嘌呤/脫嘧啶（apurinic/apyrimidinic,AP）位點(diǎn)。雙功能DNA糖....

圖1-2端粒酶作用機(jī)制示意圖[89]

山東師范大學(xué)博士學(xué)位論文8圖1-2端粒酶作用機(jī)制示意圖[89]。1.3酶的檢測(cè)方法由于DNA修復(fù)酶在癌癥診斷和治療方面具有潛在應(yīng)用價(jià)值，一系列檢測(cè)DNA修復(fù)酶的方法相繼開發(fā)出來[52,107-116]。端粒酶的檢測(cè)方法包括端粒重復(fù)擴(kuò)增法（telomericrepeatamplif....

圖1-3基于血紅素-石墨烯納米材料的比色法檢測(cè)端粒酶活性的示意圖[124]

山東師范大學(xué)博士學(xué)位論文9劉松琴課題組發(fā)展了一種基于血紅素-石墨烯納米材料(H-GNs)對(duì)端粒酶活性進(jìn)行無標(biāo)簽定量的比色分析法[124]。如圖1-3所示，制備的H-GNs在高鹽濃度溶液中分散性可調(diào)，其分散性隨NaCl濃度的增加而降低。另外，它的分散性受溶液中所含的單鏈或者雙鏈DN....

圖1-4引物修飾的AuNPs比色法檢測(cè)端粒酶活性的示意圖[127]

山東師范大學(xué)博士學(xué)位論文10曲曉剛課題組發(fā)展了基于引物修飾的金納米顆粒（AuNPs）可視化檢測(cè)端粒酶活性的方法（圖1-4）[127]。當(dāng)無端粒酶存在時(shí)，端粒酶引物修飾的AuNPs在鹽溶液中聚集，溶液顏色發(fā)生變化。當(dāng)端粒酶存在時(shí)，端粒酶使引物延伸，阻止了AuNPs的聚集，溶液顏色不....

本文編號(hào)：3927608