目的:采用陰離子聚合法制備出陽(yáng)離子型聚氨基酸材料,并研究其對(duì)口腔主要致病菌抑菌作用和生物安全性能。方法:采用固體培養(yǎng)基稀釋及菌落計(jì)數(shù)法體外評(píng)價(jià)陽(yáng)離子型聚氨基酸對(duì)主要口腔致病菌的抑菌性能,通過(guò)細(xì)胞毒性試驗(yàn)、急性經(jīng)口毒性試驗(yàn)、最大劑量致敏試驗(yàn)和口腔黏膜刺激試驗(yàn)全面評(píng)價(jià)生物安全性。結(jié)果:成功研制出陽(yáng)離子型聚氨基酸材料,將其與大腸桿菌、金黃色葡萄球菌、變形鏈球菌、牙齦卟啉單胞菌及伴放線放線桿菌等口腔致病菌作用5 min表現(xiàn)出較強(qiáng)的抑菌活性,作用20 min可殺死98%以上的致病細(xì)菌;在生物安全上,無(wú)細(xì)胞毒性;急性經(jīng)口毒性劑量LD50≥5000 mg/kg;在最大劑量致敏試驗(yàn)中豚鼠無(wú)紅斑、水腫,致敏率為0;對(duì)地鼠正�？谇火つo(wú)刺激性。結(jié)論:本研究獲得的陽(yáng)離子型聚氨基酸對(duì)主要口腔致病菌有著較強(qiáng)的抑制作用,同時(shí)有著優(yōu)異的生物安全性,可用于口腔致病菌感染的預(yù)防和治療。

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圖1陽(yáng)離子型聚氨基酸CPPA合成路線圖

(1)N(ε)-芐氧羧基-L-賴氨酸環(huán)內(nèi)酸酐(N(ε)-Carbobenzoxy-L-lysineN-Carboxyanhydride,NCA)合成：N(ε)-芐氧羰基-L-賴氨酸(Lys(Z))懸浮于四氫呋喃(Tetrahydrofuran,THF),50℃密閉條件下....

圖2最大劑量致敏試驗(yàn)注射位點(diǎn)示意圖

豚鼠，每組動(dòng)物數(shù)10只，雌雄各半。參照GB7919-1987化妝品安全性評(píng)價(jià)程序和方法3.1.2.3皮膚變態(tài)反應(yīng)試驗(yàn)中豚鼠最大劑量試驗(yàn)進(jìn)行。實(shí)驗(yàn)組受試物為0.1%w/wCPPA凝膠。第一次致敏：陰性、陽(yáng)性對(duì)照組和實(shí)驗(yàn)組分別注射0.1mL對(duì)應(yīng)的樣品，如圖2所示；二次誘導(dǎo)：注射后....

圖3陽(yáng)離子型聚氨基酸CPPA及其核磁氫譜

通過(guò)陰離子聚合方法成功制得陽(yáng)離子型聚氨基酸CPPA，并對(duì)其進(jìn)行1H-NMR測(cè)試。結(jié)果如圖3所示：以D2O為溶劑，δ0.80-0.86(-CH3)，δ1.38-1.62(-CH2-)，δ2.93-2.94(-CH2-)，δ4.24(-CH-)。圖3中1-3位置有6個(gè)H(賴氨酸支鏈)....

圖4含不同濃度CPPA瓊脂對(duì)細(xì)菌生長(zhǎng)的影響

采用瓊脂稀釋法[17]，對(duì)1000、500、250、125、62.5μg/mL5個(gè)濃度梯度的CPPA的抑菌性能進(jìn)行試驗(yàn)。從圖4看出CPPA對(duì)條件性致病菌大腸桿菌和金黃色葡萄球菌最小抑菌濃度(MIC)值的范圍為500～1000μg/mL。2.2.2CPPA凝膠的抑菌性能

本文編號(hào)：3917118