本文關(guān)鍵詞：二價鎳對小鼠成纖維細(xì)胞生長的影響，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：研究背景及目的： 鎳在地殼元素含量中排第24位,人體不可避免地接觸這一元素。環(huán)境中主要的鎳污染主要來自煤炭和重油的燃燒以及煉油產(chǎn)生的三廢,瀝青等副產(chǎn)品。采礦、電鍍工業(yè)、垃圾焚燒和沙塵等也會造成鎳污染,通過水源、土壤、空氣等途徑進入人體,給人們身體健康帶來嚴(yán)重危害,影響人體正常生理過程。研究表明：小劑量鎳離子長時間作用于肺BEAS-2B細(xì)胞、正常皮膚上皮細(xì)胞后會導(dǎo)致細(xì)胞發(fā)生異常凋亡、甚至惡性轉(zhuǎn)化。二價鎳是鎳在生物體內(nèi)的主要形態(tài)。長期接觸二價鎳可能引起炎癥反應(yīng)和致畸作用,并使約5%-15%的女性和0.5%-1%的男性致敏。世界衛(wèi)生組織已把鎳作為致癌因素之一,研究顯示：鎳與鼻及肺部癌癥的發(fā)生有關(guān)。 含鎳合金廣泛應(yīng)用于烤瓷冠、局部可摘義齒等牙科治療領(lǐng)域。研究發(fā)現(xiàn)：通過唾液的電化學(xué)腐蝕,口腔含鎳合金可緩慢析出鎳離子。鎳離子污染對口腔健康的影響,特別是鎳合金在口腔內(nèi)廣泛運用后的生物安全性問題越來越引起人們的關(guān)注,但迄今為止,結(jié)論不一。臨床經(jīng)常發(fā)現(xiàn)：鎳合金周圍可見冠牙齦充血、變色。研究也發(fā)現(xiàn)：含鎳合金冠析出鎳離子主要沉積在冠周圍的牙齦組織中。因此,了解鎳離子對牙齦或正常口腔上皮的影響非常必要。 研究方法： 本研究以小鼠成纖維細(xì)胞系PA317(由浙江大學(xué)附屬第一醫(yī)院王心華博士饋贈)為實驗對象,以不同濃度(0-800μM)的氯化鎳(NiCl2)作用。通過倒置顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)觀察,Cell Counting Kit-8法檢測細(xì)胞增殖活力,流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡及細(xì)胞周期,Western Blot法檢測二價鎳對PA317細(xì)胞凋亡標(biāo)志性蛋白p21蛋白,核轉(zhuǎn)錄因子κB(nuclear transcription factor-κB, NF-κB)和環(huán)氧合成酶Ⅱ(cyclooxygenase2,COX-2)信號通路的表達(dá)情況,探討二價鎳對小鼠成纖維細(xì)胞的周期、凋亡的影響,并對二價鎳影響細(xì)胞生長影響的機制進行初步探討。 研究結(jié)果： 倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞學(xué)形態(tài)發(fā)現(xiàn),當(dāng)二價鎳對小鼠成纖維細(xì)胞作用24h時,小鼠成纖維細(xì)胞隨二價鎳濃度升高而逐步出現(xiàn)細(xì)胞凋亡現(xiàn)象。細(xì)胞體積縮小,連接消失,與周圍的細(xì)胞脫離,懸浮細(xì)胞增多,細(xì)胞質(zhì)呈明顯的空泡化。而當(dāng)200μM二價鎳作用小鼠成纖維細(xì)胞時,隨二價鎳作用時間增長而凋亡率逐漸增高。二價鎳作用小鼠成纖維細(xì)胞24h后,細(xì)胞G2/M期比例增加,細(xì)胞在二價鎳作用下,細(xì)胞周期阻滯在G2/M期。經(jīng)流式細(xì)胞儀分析,經(jīng)200μM.400μM、600μM,800μM濃度組二價鎳作用24h后PA317細(xì)胞的凋亡率分別為5.9%、17.0%、20.7%、63.4%呈一定的數(shù)量關(guān)系,Cell Counting Kit-8實驗證實了二價鎳濃度抑制細(xì)胞正常增殖之間的正相關(guān)性。同時,NF-κB, COX-2信號通路及p21蛋白的表達(dá)水平隨著二價鎳作用濃度和作用時間的增加而表現(xiàn)出逐漸上升的趨勢。 結(jié)論： 本研究表明,二價鎳對小鼠成纖維細(xì)胞的增殖起抑制作用,誘導(dǎo)其凋亡,NF-κB, COX-2信號通路及p21凋亡相關(guān)蛋白參與二價鎳促細(xì)胞凋亡過程,且與作用濃度及作用時間正相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】：二價鎳 成纖維細(xì)胞 細(xì)胞周期 細(xì)胞凋亡 細(xì)胞增殖 生物安全性
【學(xué)位授予單位】：浙江大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R783.1
【目錄】：

• 致謝4-5
• 中文摘要5-7
• Abstract7-10
• 前言10-11
• 材料與方法11-21
• 結(jié)果21-28
• 討論28-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-38
• 綜述38-53
• 參考文獻(xiàn)46-53
• 病例53-59
• 作者簡歷59

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1 畢聰明;王s

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