極性是一個極其重要的微環(huán)境參數(shù),極性變化可以影響生物微環(huán)境中的各項(xiàng)生命活動,如細(xì)胞膜的通透性,生物信號的傳導(dǎo)等。線粒體作為一種非常重要的細(xì)胞器,不僅具有為細(xì)胞提供能量、參與代謝等重要功能,而且在細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)等重要的生物過程中扮演重要角色。線粒體結(jié)構(gòu)與功能的異常變化作為一個重要的誘因促使神經(jīng)退行性病變、心血管疾病及癌癥等病癥的發(fā)生。線粒體極性的變化會影響細(xì)胞生命活動中的諸多過程,例如細(xì)胞膜的通透性,酶的活性和穩(wěn)定性,細(xì)胞增殖、代謝的調(diào)控和細(xì)胞的穩(wěn)態(tài)等。因此,針對由于線粒體極性異常變化導(dǎo)致的多種疾病,可以通過對極性的實(shí)時并準(zhǔn)確的監(jiān)測,做到早期預(yù)防與診斷并對臨床治療起到積極作用。本文結(jié)合靶向線粒體熒光探針的研究現(xiàn)狀,成功構(gòu)建了以尼羅紅和黃酮為熒光母核的線粒體極性熒光探針,并研究了它們的光譜性質(zhì)和生物成像應(yīng)用。(一)選取尼羅紅為熒光母核,構(gòu)建了以三苯基膦陽離子為線粒體特異性靶向基團(tuán)的極性熒光探針NRTP。探針NRTP隨著溶劑的極性增強(qiáng),熒光光譜隨之紅移,這是明顯的溶劑化效應(yīng)的特征。該探針還具有較高的熒光量子產(chǎn)率與較長的發(fā)光波長的優(yōu)異性。與商品化線粒體染料MTDR的共定位系數(shù)達(dá)到了0.89,該化...

【文章頁數(shù)】：72 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
第一章 緒論
    1.1 引言
    1.2 熒光的產(chǎn)生過程
    1.3 熒光探針的識別機(jī)理
        1.3.1 分子內(nèi)電荷轉(zhuǎn)移(ICT)
        1.3.2 光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移(PET)
        1.3.3 熒光共振能量轉(zhuǎn)移(FRET)
        1.3.4 其他信號傳遞機(jī)制
    1.4 線粒體靶向極性熒光探針的研究進(jìn)展
        1.4.1 基于萘酰亞胺基團(tuán)的極性熒光探針
        1.4.2 基于香豆素基團(tuán)的極性熒光探針
        1.4.3 其他類型的極性熒光探針
第二章 基于尼羅紅線粒體靶向極性熒光探針的設(shè)計、合成及成像應(yīng)用
    2.1 前言
    2.2 結(jié)構(gòu)設(shè)計
    2.3 試劑與儀器
        2.3.1 測試溶液的配制
        2.3.2 溶劑極性的測定
        2.3.3 相對熒光量子產(chǎn)率的測定
        2.3.4 生物測試
        2.3.5 單層囊泡的制備
        2.3.6 細(xì)胞共定位成像實(shí)驗(yàn)
    2.4 結(jié)果與討論
        2.4.1 探針NRTP的制備
        2.4.2 熒光探針NRTP的紫外吸收光譜
        2.4.3 熒光探針NRTP的熒光發(fā)射光譜
        2.4.4 探針NRTP在水-1,4-二氧六環(huán)體系中的光學(xué)性能研究
        2.4.5 熒光探針NRTP的細(xì)胞毒性測試
        2.4.6 熒光探針NRTP的光穩(wěn)定性測試
        2.4.7 探針NRTP的共定位實(shí)驗(yàn)
        2.4.8 囊泡中線粒體極性的變化
        2.4.9 探針NRTP的細(xì)胞成像
        2.4.10 光誘導(dǎo)活細(xì)胞凋亡試驗(yàn)
        2.4.11 光誘導(dǎo)細(xì)胞死亡過程中探針NRTP的細(xì)胞成像
    2.5 結(jié)論
第三章 基于黃酮類線粒體靶向極性熒光探針的設(shè)計、合成及成像應(yīng)用
    3.1 前言
    3.2 探針的MT-PL的設(shè)計
    3.3 試劑與儀器
        3.3.1 測試溶液的配制
        3.3.2 溶劑極性的測定
        3.3.3 熒光量子產(chǎn)率的測定
        3.3.4 生物測試
        3.3.5 細(xì)胞共定位成像實(shí)驗(yàn)
        3.3.6 斑馬魚成像
    3.4 結(jié)果及討論
        3.4.1 熒光探針MT-PL的熒光光譜圖
        3.4.2 探針MT-PL的活細(xì)胞成像實(shí)驗(yàn)
        3.4.3 線粒體共定位實(shí)驗(yàn)
        3.4.4 經(jīng)制霉菌素誘導(dǎo)線粒體極性改變的熒光成像實(shí)驗(yàn)
        3.4.5 斑馬魚成像
    3.5 結(jié)論
第四章 結(jié)論與展望
參考文獻(xiàn)
致謝
附圖
附錄



本文編號：3814029