多壁碳納米管由于其獨特的物理化學(xué)性質(zhì),被廣泛應(yīng)用生物醫(yī)藥領(lǐng)域。隨著碳納米管的廣泛應(yīng)用,其生物安全性也引起了廣大學(xué)者的關(guān)注最近已有許多研究表明MWCNTs可以誘發(fā),大鼠(小鼠)肺部肉芽腫形成和肺部纖維化發(fā)生,然而其細胞分子機制并術(shù)闡明。因此近年來為了避免碳納米管對人類健康的潛在危害,對碳納米竹誘發(fā)毒性機制的研究也漸受重視。本論文選擇Short MWCNTs、 Long MWCNTs兩種多壁碳納米管作為研究對象,通過模擬體外促纖維化過程,全面、系統(tǒng)、深入的對多壁碳納米管促纖維化機理進行了研究,同時對MWCNTs誘導(dǎo)纖維化發(fā)生的分子機制做了進一步闡述。 首先我們對兩種多壁碳納米管材料進行了表征,觀察到它們在緩沖液中分散性較好,并對它們的粒徑大小,長度等進行了鑒定。接下來,我們采用CCK-8的方法對多壁碳納米管對Raw264.7、NIH3T3細胞活力影響進行了檢測,確定了合適的材料濃度。 隨后,我們先用多壁碳納米管孵育Raw264.7細胞,發(fā)現(xiàn)多壁碳納米管可以刺激Raw264.7細胞活化,刺激Raw264.7細胞分泌相關(guān)細胞因子。并且發(fā)現(xiàn)兩種多壁碳納米管對Raw264.7細胞作用的強弱有明顯差...

【文章頁數(shù)】：66 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 碳納米管概述
    1.2 由呼吸道進入的碳納米管在機體內(nèi)的分布
    1.3 碳納米管的促纖維化作用及相關(guān)機理研究
        1.3.1 單壁碳納米管促纖維化作用
        1.3.2 多壁碳納米管促纖維化作用
    1.4 碳納米管促纖維化機理的研究
        1.4.1 對巨噬細胞的作用
        1.4.2 對上皮細胞的作用
        1.4.3 對成纖維細胞的作用
    1.5 TGF-β信號通路
        1.5.1 TGF-β信號通路的生物效應(yīng)
        1.5.2 TGF-β與纖維化及炎癥反應(yīng)疾病的關(guān)系
第二章 多壁碳納米管的化學(xué)表征
    2.1 引言
    2.2 實驗材料和方法
        2.2.1 實驗材料
        2.2.2 主要儀器
        2.2.3 實驗方法
            2.2.3.1 TEM表征兩種多壁碳納米管的形貌
    2.3 實驗結(jié)果及討論
第三章 MWCNTs對巨噬細胞作用的研究
    3.1 引言
    3.2 實驗材料和方法
        3.2.1 實驗材料
            3.2.1.1 主要試劑的配制
        3.2.2 實驗方法與步驟
            3.2.2.1 RAW264.7細胞培養(yǎng)
            3.2.2.2 RAW264.7細胞活性測定
            3.2.2.3 PCR法測定RAW264.7細胞功因子mRNA
            3.2.2.4 用Elisa法測定RAW264.7細胞功能因子表達
    3.3 實驗結(jié)果及討論
        3.3.1 Short MWCNTs、Long MWCNTs對RAW264.7細胞活性影響
        3.3.2 MWCNTs對RAW264.7細胞TGF-β表達的影響
            3.3.2.1 MWCNTs上調(diào)RAW264.7細胞中TGF-βmRNA水平表達
            3.3.2.2 MWCNTs上調(diào)RAW264.7細胞TGF-β蛋白水平表達
        3.3.3 MWCNTs對RAW264.7細胞TNF-α表達的影響
            3.3.3.1 MWCNTs上調(diào)RAW264.7細胞TNF-αmRNA水平表達
            3.3.3.2 MWCNTs上調(diào)RAW264.7細胞TNF-α蛋白水平表達
    3.4 本章小結(jié)
第四章 MWCNTs對成纖維細胞的研究
    4.1 引言
    4.2 實驗材料和方法
        4.2.1 實驗材料
            4.2.1.1 主要試劑的配制
        4.2.2 實驗方法與步驟
            4.2.2.1 NIH 3T3細胞的培養(yǎng)
            4.2.2.2 NIH 3T3細胞活性的測定
            4.2.2.3 免疫印跡(Western-blotting)法
    4.3 實驗結(jié)果及討論
        4.3.1 Short MWCNTs、Long MWCNTs對NIH3T3細胞活性影響
        4.3.2 Short MWCNTs、Long MWCNTs上調(diào)NIH3T3 cell中a-SMA蛋白的表達
        4.3.3 Long M WCNTs促進NIH3T3細胞中TGF-β/Smad信號通道的激活
    4.4 本章小結(jié)
第五章 MWCNTs促纖維化機理的研究
    5.1 引言
    5.2 實驗材料和方法
        5.2.1 實驗材料
        5.2.2 實驗方法與步驟
            5.2.2.1 RAW264.7細胞與NIH 3T3細胞共培養(yǎng)
            5.2.2.2 PCR法檢測NIH 3T3細胞纖維化相關(guān)基因mRNA水平表達
    5.3 實驗結(jié)果及討論
        5.3.1 Long MWCNTs促進膠原產(chǎn)生具有TGF-β/Smad信號通路依賴性
        5.3.2 TGF-β是Long MWCNTs促進膠原產(chǎn)生的關(guān)鍵因素
    5.4 本章小結(jié)
第六章 全文總結(jié)
參考文獻
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
個人簡歷



本文編號：3807615