多壁碳納米管由于其獨(dú)特的物理化學(xué)性質(zhì),被廣泛應(yīng)用生物醫(yī)藥領(lǐng)域。隨著碳納米管的廣泛應(yīng)用,其生物安全性也引起了廣大學(xué)者的關(guān)注最近已有許多研究表明MWCNTs可以誘發(fā),大鼠(小鼠)肺部肉芽腫形成和肺部纖維化發(fā)生,然而其細(xì)胞分子機(jī)制并術(shù)闡明。因此近年來(lái)為了避免碳納米管對(duì)人類健康的潛在危害,對(duì)碳納米竹誘發(fā)毒性機(jī)制的研究也漸受重視。本論文選擇Short MWCNTs、 Long MWCNTs兩種多壁碳納米管作為研究對(duì)象,通過(guò)模擬體外促纖維化過(guò)程,全面、系統(tǒng)、深入的對(duì)多壁碳納米管促纖維化機(jī)理進(jìn)行了研究,同時(shí)對(duì)MWCNTs誘導(dǎo)纖維化發(fā)生的分子機(jī)制做了進(jìn)一步闡述。 首先我們對(duì)兩種多壁碳納米管材料進(jìn)行了表征,觀察到它們?cè)诰彌_液中分散性較好,并對(duì)它們的粒徑大小,長(zhǎng)度等進(jìn)行了鑒定。接下來(lái),我們采用CCK-8的方法對(duì)多壁碳納米管對(duì)Raw264.7、NIH3T3細(xì)胞活力影響進(jìn)行了檢測(cè),確定了合適的材料濃度。 隨后,我們先用多壁碳納米管孵育Raw264.7細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)多壁碳納米管可以刺激Raw264.7細(xì)胞活化,刺激Raw264.7細(xì)胞分泌相關(guān)細(xì)胞因子。并且發(fā)現(xiàn)兩種多壁碳納米管對(duì)Raw264.7細(xì)胞作用的強(qiáng)弱有明顯差...

【文章頁(yè)數(shù)】：66 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
ABSTRACT
第一章 文獻(xiàn)綜述
    1.1 碳納米管概述
    1.2 由呼吸道進(jìn)入的碳納米管在機(jī)體內(nèi)的分布
    1.3 碳納米管的促纖維化作用及相關(guān)機(jī)理研究
        1.3.1 單壁碳納米管促纖維化作用
        1.3.2 多壁碳納米管促纖維化作用
    1.4 碳納米管促纖維化機(jī)理的研究
        1.4.1 對(duì)巨噬細(xì)胞的作用
        1.4.2 對(duì)上皮細(xì)胞的作用
        1.4.3 對(duì)成纖維細(xì)胞的作用
    1.5 TGF-β信號(hào)通路
        1.5.1 TGF-β信號(hào)通路的生物效應(yīng)
        1.5.2 TGF-β與纖維化及炎癥反應(yīng)疾病的關(guān)系
第二章 多壁碳納米管的化學(xué)表征
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.2.2 主要儀器
        2.2.3 實(shí)驗(yàn)方法
            2.2.3.1 TEM表征兩種多壁碳納米管的形貌
    2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
第三章 MWCNTs對(duì)巨噬細(xì)胞作用的研究
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            3.2.1.1 主要試劑的配制
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
            3.2.2.1 RAW264.7細(xì)胞培養(yǎng)
            3.2.2.2 RAW264.7細(xì)胞活性測(cè)定
            3.2.2.3 PCR法測(cè)定RAW264.7細(xì)胞功因子mRNA
            3.2.2.4 用Elisa法測(cè)定RAW264.7細(xì)胞功能因子表達(dá)
    3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
        3.3.1 Short MWCNTs、Long MWCNTs對(duì)RAW264.7細(xì)胞活性影響
        3.3.2 MWCNTs對(duì)RAW264.7細(xì)胞TGF-β表達(dá)的影響
            3.3.2.1 MWCNTs上調(diào)RAW264.7細(xì)胞中TGF-βmRNA水平表達(dá)
            3.3.2.2 MWCNTs上調(diào)RAW264.7細(xì)胞TGF-β蛋白水平表達(dá)
        3.3.3 MWCNTs對(duì)RAW264.7細(xì)胞TNF-α表達(dá)的影響
            3.3.3.1 MWCNTs上調(diào)RAW264.7細(xì)胞TNF-αmRNA水平表達(dá)
            3.3.3.2 MWCNTs上調(diào)RAW264.7細(xì)胞TNF-α蛋白水平表達(dá)
    3.4 本章小結(jié)
第四章 MWCNTs對(duì)成纖維細(xì)胞的研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
            4.2.1.1 主要試劑的配制
        4.2.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
            4.2.2.1 NIH 3T3細(xì)胞的培養(yǎng)
            4.2.2.2 NIH 3T3細(xì)胞活性的測(cè)定
            4.2.2.3 免疫印跡(Western-blotting)法
    4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
        4.3.1 Short MWCNTs、Long MWCNTs對(duì)NIH3T3細(xì)胞活性影響
        4.3.2 Short MWCNTs、Long MWCNTs上調(diào)NIH3T3 cell中a-SMA蛋白的表達(dá)
        4.3.3 Long M WCNTs促進(jìn)NIH3T3細(xì)胞中TGF-β/Smad信號(hào)通道的激活
    4.4 本章小結(jié)
第五章 MWCNTs促纖維化機(jī)理的研究
    5.1 引言
    5.2 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        5.2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        5.2.2 實(shí)驗(yàn)方法與步驟
            5.2.2.1 RAW264.7細(xì)胞與NIH 3T3細(xì)胞共培養(yǎng)
            5.2.2.2 PCR法檢測(cè)NIH 3T3細(xì)胞纖維化相關(guān)基因mRNA水平表達(dá)
    5.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果及討論
        5.3.1 Long MWCNTs促進(jìn)膠原產(chǎn)生具有TGF-β/Smad信號(hào)通路依賴性
        5.3.2 TGF-β是Long MWCNTs促進(jìn)膠原產(chǎn)生的關(guān)鍵因素
    5.4 本章小結(jié)
第六章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文
個(gè)人簡(jiǎn)歷



本文編號(hào)：3807615