目的探究凹凸界面對體外培養(yǎng)的小鼠胚胎干細(xì)胞多能性維持的影響。方法制作凹凸不同的細(xì)胞外基質(zhì)培養(yǎng)小鼠胚胎干細(xì)胞,觀察細(xì)胞的克隆形態(tài),并通過免疫熒光和堿性磷酸酶(alkaline phosphatase,ALP)染色,檢測胚胎干細(xì)胞的多能性。結(jié)果在凹面和凸面基底上,胚胎干細(xì)胞的立體度和圓度均比平面基底高,但凹面基底更明顯。凹面和凸面基底上干細(xì)胞的Oct4-GFP表達(dá)含量和ALP染色強(qiáng)度均明顯高于平面基底,其中凹面基底更為顯著。結(jié)論與平面基底相比,凹面基底和凸面基底均對胚胎干細(xì)胞的多能性維持有積極影響,能夠有助于維持全能性,但凹面基底效果更好。通過改變細(xì)胞外基質(zhì)曲率,可以幫助胚胎干細(xì)胞體外培養(yǎng)維持多能性。研究結(jié)果對胚胎干細(xì)胞的研究和臨床應(yīng)用有重要意義。

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 主要試劑和設(shè)備
    1.2 曲率基底制作
    1.3 細(xì)胞培養(yǎng)
    1.4 免疫熒光染色
    1.5 ALP染色
    1.6 測量立體度和圓度
2 結(jié)果
    2.1 形態(tài)學(xué)觀察
    2.2 免疫熒光結(jié)果
    2.3 ALP結(jié)果
3 討論與結(jié)論



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