目的:本研究采用細(xì)胞膜片技術(shù)(CST)培養(yǎng)血管化干細(xì)胞膜片,將其包裹到聚四氟乙烯管的外面,構(gòu)建血管化組織工程(TE)移植物,并將該移植物埋植到SD大鼠背部皮下,觀察此移植物與宿主血管吻合情況并評估體內(nèi)血管形成能力,為器官移植出現(xiàn)血液供應(yīng)不足時提供一種新的血管化策略。材料和方法:(1)成人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)的培養(yǎng)及傳代:復(fù)蘇hMSCs并培養(yǎng),觀察hMSCs的形態(tài),采用MTT實驗探究hMSCs的生長趨勢;(2)hMSCs膜片的制備及表征:將hMSCs種植于培養(yǎng)皿中,連續(xù)培養(yǎng)14天形成hMSCs膜片,通過H&E染色和SEM等方法對其表征;(3)血管化干細(xì)胞膜片和血管化組織工程移植物的構(gòu)建及其表征:通過連續(xù)培養(yǎng)hMSCs 14天構(gòu)建細(xì)胞膜片,于膜片上種植人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞(HUVECs),形成血管化干細(xì)胞膜片,將其包裹到聚四氟乙烯管的外面,構(gòu)建血管化TE移植物。利用SEM、CD31免疫熒光染色、拉伸實驗等方法對其表征;(4)血管化組織工程移植物的體內(nèi)實驗:將血管化TE移植物hMSC/HUVEC植入到SD大鼠背部皮下,以管狀hMSCs膜片作為對照,2周、4周后分別進行H&...

【文章頁數(shù)】：58 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
中英文縮略詞
第一章 緒論
    1.1 CST在組織工程血管化中的研究進展
    1.2 MSC和EC在組織工程血管化中的應(yīng)用
    1.3 利用CST構(gòu)建血管化組織工程移植物的研究進展
    1.4 研究目的、意義和內(nèi)容
第二章 hMSCs的培養(yǎng)和hMSCs膜片的構(gòu)建及表征
    2.1 材料和方法
        2.1.1 實驗試劑
        2.1.2 實驗設(shè)備
        2.1.3 成人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞(hMSCs)的復(fù)蘇
        2.1.4 hMSCs的傳代培養(yǎng)及生長情況分析
        2.1.5 hMSCs膜片的構(gòu)建及表征
    2.2 結(jié)果與討論
        2.2.1 hMSCs形態(tài)和生長分析
        2.2.2 hMSCs膜片的大體觀
        2.2.3 hMSCs膜片的表征
    2.3 小結(jié)
第三章 血管化干細(xì)胞膜片和移植物的構(gòu)建及表征
    3.1 材料和方法
        3.1.1 實驗試劑
        3.1.2 實驗設(shè)備
        3.1.3 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的復(fù)蘇
        3.1.4 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的傳代和培養(yǎng)
        3.1.5 hMSCs膜片的培養(yǎng)
        3.1.6 血管化干細(xì)胞膜片的培養(yǎng)
        3.1.7 血管化干細(xì)胞膜片的免疫熒光染色
        3.1.8 血管化干細(xì)胞膜片SEM檢測
        3.1.9 血管化組織工程移植物的構(gòu)建和拉伸試驗
        3.1.10 血管化組織工程移植物細(xì)胞外基質(zhì)的評估
    3.2 結(jié)果與討論
        3.2.1 人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞形態(tài)觀察
        3.2.2 血管化干細(xì)胞膜片的培養(yǎng)
        3.2.3 血管化干細(xì)胞膜片免疫熒光染色
        3.2.4 血管化干細(xì)胞膜片SEM檢測
        3.2.5 血管化組織工程移植物的的構(gòu)建和力學(xué)性能測試
        3.2.6 血管化組織工程移植物細(xì)胞外基質(zhì)的評估
    3.3 小結(jié)
第四章 血管化組織工程移植物的體內(nèi)研究
    4.1 材料和方法
        4.1.1 實驗試劑
        4.1.2 實驗設(shè)備
        4.1.3 體外構(gòu)建血管化組織工程移植物
        4.1.4 血管化組織工程移植物的體內(nèi)移植
        4.1.5 H&E染色和CD31免疫熒光染色
        4.1.6 統(tǒng)計分析
    4.2 結(jié)果與討論
        4.2.1 大體觀
        4.2.2 H&E染色
        4.2.3 免疫熒光
    4.3 小結(jié)
第五章 全文總結(jié)
參考文獻(xiàn)
致謝
在學(xué)期間的研究成果
病例報告



本文編號：3794021