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高性能脫細胞真皮基質(zhì)抗菌敷料的制備與性能研究

發(fā)布時間:2017-05-19 15:27

  本文關(guān)鍵詞:高性能脫細胞真皮基質(zhì)抗菌敷料的制備與性能研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目前,以豬皮為原料制備膠原基質(zhì)敷料用于皮膚損傷修復(fù)已成為研究熱點。但傳統(tǒng)方法制得的脫細胞真皮基質(zhì)(ADM)存在滲透性差、抗菌性能低、生物相容性差等缺點,這嚴(yán)重限制了脫細胞真皮基質(zhì)敷料在臨床的廣泛應(yīng)用。 針對上述不足,本論文結(jié)合臨床對創(chuàng)面敷料的要求以及豬皮的結(jié)構(gòu)特點,以組織工程原理為指導(dǎo),在前期實驗室研究和目前最新研究成果基礎(chǔ)上,采用新的工藝處理鹽腌豬皮,徹底去除毛根鞘等纖維間質(zhì),提高膠原基質(zhì)滲透性,復(fù)合羧甲基殼聚糖和硫酸軟骨素等天然多糖,并用戊二醛交聯(lián),改善敷料的抗菌性能和生物活性,得到高性能脫細胞真皮基質(zhì)抗菌敷料。本文的重點研究內(nèi)容和結(jié)果如下: (1)首先對脫細胞真皮基質(zhì)制備工藝進行研究,研究表明:經(jīng)角蛋白酶處理得到的脫細胞真皮基質(zhì)的透水汽性能和孔隙率要優(yōu)于傳統(tǒng)方法制得的基質(zhì)的性能,因此,在脫細胞真皮基質(zhì)的制備過程中,要增加角蛋白酶處理,具體工藝路線為: 鹽腌豬皮→浸水→脫脂→堿膨脹→消除堿膨脹→角蛋白酶處理→二次酶處理→PBS液清洗→封裝 (2)角蛋白酶用量對脫細胞真皮基質(zhì)的透水汽性能、孔隙率和拉伸強度有一定影響:隨著角蛋白酶用量的增加,基質(zhì)的透水汽性能、孔隙率不斷提高,拉伸強度有所降低,但降低幅度不大,能夠在一定程度上維持膠原纖維結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定,這表明角蛋白酶處理技術(shù)基本實現(xiàn)了改善脫細胞真皮基質(zhì)透水氣性能和滲透性的預(yù)期目的。從保證基質(zhì)的機械性能和成本考慮,將角蛋白酶的用量定為0.3%。 (3)在脫細胞真皮基質(zhì)上復(fù)合羧甲基殼聚糖,研究羧甲基殼聚糖對基質(zhì)抗菌性能的影響,為制備抗菌敷料提供可靠依據(jù)。抑菌實驗結(jié)果表明:與常規(guī)基質(zhì)相比,復(fù)合羧甲基殼聚糖后基質(zhì)的抑菌率增加,這說明基質(zhì)的抗菌性能得到一定程度改善,羧甲基殼聚糖對基質(zhì)的抗菌性能有重要影響。 (4)在脫細胞真皮基質(zhì)上交聯(lián)復(fù)合天然多糖,研究交聯(lián)復(fù)合對基質(zhì)拉伸強度、體外降解時間等理化性能的影響。實驗結(jié)果表明:交聯(lián)復(fù)合羧甲基殼聚糖、透明質(zhì)酸、硫酸軟骨素后,基質(zhì)的拉伸強度、透水汽速率、體外降解時間和孔隙率增加。 (5)根據(jù)以上(1)、(2)、(3)、(4)的研究結(jié)果和組織工程學(xué)原理,結(jié)合敷料的性能要求,制備了高性能脫細胞真皮基質(zhì)抗菌敷料,并對敷料的主要性能做相關(guān)檢測。結(jié)果表明:經(jīng)戊二醛交聯(lián)后的敷料顏色微黃,毛孔可見,表面平細光滑,柔軟有彈性,無肉眼可見雜物;掃描電鏡觀察顯示:膠原纖維的網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)疏松,多孔結(jié)構(gòu)豐富,適合細胞增殖和血管化;拉伸強度為10.66MPa,約是純膠原膜的5倍,拉伸強度較好,能夠滿足臨床對敷料的要求。透水汽速率為3640g·m-2·24h-1左右,說明具有較好的透水汽性能;孔隙率為81.00%左右,適合創(chuàng)面恢復(fù);體外降解時間為24.33h左右;pH值6.5-7.5,符合相關(guān)敷料標(biāo)準(zhǔn);抑菌實驗表明,敷料具有一定的抗菌性能,能有效減少創(chuàng)面感染。 本研究制備的高性能脫細胞真皮基質(zhì)抗菌敷料滲透性好、具有一定的抗菌性能和生物活性,基本滿足臨床對敷料的要求,有望用于臨床,促進創(chuàng)面愈合,為之后的應(yīng)用研究奠定基礎(chǔ)。
【關(guān)鍵詞】:脫細胞真皮基質(zhì) 敷料 制備 抗菌
【學(xué)位授予單位】:山東大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2014
【分類號】:R318.08
【目錄】:
  • 摘要7-9
  • ABSTRACT9-12
  • 符號說明12-13
  • 第一章 緒論13-29
  • 1.1 概述13-17
  • 1.2 皮膚損傷與創(chuàng)面修復(fù)17-19
  • 1.2.1 皮膚損傷17-18
  • 1.2.2 創(chuàng)面修復(fù)的過程和特點18-19
  • 1.3 醫(yī)用創(chuàng)面敷料的研究進展19-26
  • 1.3.1 醫(yī)用敷料的產(chǎn)生發(fā)展19
  • 1.3.2 理想醫(yī)用創(chuàng)面敷料的性能標(biāo)準(zhǔn)19-20
  • 1.3.3 合成高分子材料敷料20-21
  • 1.3.4 無機材料敷料21
  • 1.3.5 復(fù)合材料敷料21-23
  • 1.3.6 天然材料敷料23-26
  • 1.4 本論文的研究內(nèi)容26-27
  • 1.4.1 角蛋白酶處理對敷料主要性能的影響26-27
  • 1.4.2 復(fù)合羧甲基殼聚糖對敷料抗菌性能的影響27
  • 1.4.3 復(fù)合透明質(zhì)酸和硫酸軟骨素對敷料性能的影響27
  • 1.5 本論文的研究目的和意義27-29
  • 第二章 異種豬脫細胞真皮基質(zhì)的制備工藝研究29-45
  • 2.1 概述29-30
  • 2.2 脫細胞真皮基質(zhì)的制備方法選擇與論證30-33
  • 2.2.1 浸水30
  • 2.2.2 脫脂30-31
  • 2.2.3 堿膨脹31
  • 2.2.4 消除堿膨脹31
  • 2.2.5 角蛋白酶處理31-32
  • 2.2.6 二次酶處理32
  • 2.2.7 PBS緩沖液洗32-33
  • 2.2.8 滅菌33
  • 2.3 實驗部分33-37
  • 2.3.1 實驗藥品33-34
  • 2.3.2 實驗儀器34-35
  • 2.3.3 取樣標(biāo)記35
  • 2.3.4 制備方法35-36
  • 2.3.5 檢測方法36-37
  • 2.4 結(jié)果與討論37-44
  • 2.4.1 工藝探索和性能比較37-41
  • 2.4.2 角蛋白酶用量對材料性能的影響41-44
  • 2.5 本章小結(jié)44-45
  • 第三章 在脫細胞真皮基質(zhì)上復(fù)合生物多糖對其性能的影響45-57
  • 3.1 概述45
  • 3.2 方法選擇與論證45-49
  • 3.2.1 羧甲基殼聚糖復(fù)合45-46
  • 3.2.2 戊二醛交聯(lián)46-47
  • 3.2.3 硫酸軟骨素47-48
  • 3.2.4 透明質(zhì)酸48-49
  • 3.3 實驗部分49-51
  • 3.3.1 實驗藥品49
  • 3.3.2 實驗儀器49-50
  • 3.3.3 實驗方法50
  • 3.3.4 檢測方法50-51
  • 3.4 實驗內(nèi)容、結(jié)果與討論51-55
  • 3.4.1 工藝探索和性能比較51-53
  • 3.4.2 多糖復(fù)合對材料性能的影響53-55
  • 3.5 本章小結(jié)55-57
  • 第四章 高性能脫細胞真皮基質(zhì)抗菌敷料性能表征57-65
  • 4.1 概述57
  • 4.2 實驗部分57-59
  • 4.2.1 實驗儀器、藥品和材料57
  • 4.2.2 實驗方法57-58
  • 4.2.3 檢測方法58-59
  • 4.3 結(jié)果和討論59-62
  • 4.3.1 性狀觀察59-60
  • 4.3.2 掃描電鏡觀察60-61
  • 4.3.3 厚度檢測61
  • 4.3.4 拉伸強度61
  • 4.3.5 透水汽性能61
  • 4.3.6 孔隙率61-62
  • 4.3.7 體外降解時間62
  • 4.3.8 抑菌率62
  • 4.3.9 pH值62
  • 4.4 小結(jié)62-65
  • 第五章 總結(jié)65-67
  • 第六章 本課題后續(xù)工作建議67-69
  • 參考文獻69-79
  • 致謝79-80
  • 學(xué)位論文評閱及答辯情況表80

【參考文獻】

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本文編號:379085

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