生物組織的三維結(jié)構(gòu)為神經(jīng)科學(xué)、系統(tǒng)生物學(xué)的研究提供了重要的信息。光學(xué)顯微成像與組織熒光標(biāo)記技術(shù)結(jié)合,可以獲取亞細(xì)胞分辨率的三維組織結(jié)構(gòu),但生物組織的混濁特性限制了光在組織中的穿透深度,阻礙了大體積組織或整體器官的三維成像。近年發(fā)展起來的組織光透明技術(shù)可以降低組織對光的散射,使組織“透明”化,從而實現(xiàn)生物組織的三維光學(xué)顯微成像。目前,研究者們已經(jīng)發(fā)展了多種離體組織光透明方法,廣泛用于鼠腦等生物組織的三維熒光成像。然而,現(xiàn)有的光透明方法針對完整組織器官的透明及成像效果仍有不足,尚缺乏同時具備高效組織透明能力和高熒光保持能力的離體組織光透明方法。本文的研究工作是圍繞適用于整體器官成像的組織光透明方法展開,旨在發(fā)展一種兼顧組織透明能力和熒光保持能力的高效組織光透明方法,實現(xiàn)整體器官的三維成像。主要內(nèi)容如下:(1)新型組織光透明方法的建立:在3DISCO方法的基礎(chǔ)上,探究透明試劑的不同溫度和p H條件對增強(qiáng)型綠色熒光蛋白穩(wěn)定性的影響,篩選利于熒光保持的條件,進(jìn)而建立具備高熒光保持能力的組織光透明方法FDISCO;進(jìn)一步驗證了該方法對多種熒光蛋白和化學(xué)熒光染料都具有高水平的信號保持能力。(2)FD...

【文章頁數(shù)】：124 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 生物組織三維整體成像概述
    1.2 實現(xiàn)整體器官三維成像的組織光透明方法
    1.3 存在的問題
    1.4 本文的主要內(nèi)容
2 FDISCO：新型組織光透明方法的建立
    2.1 材料與方法
    2.2 基于溫度與酸堿度調(diào)節(jié)的FDISCO方法的建立
    2.3 FDISCO對熒光蛋白信號保持能力的影響
    2.4 FDISCO對化學(xué)熒光染料信號保持能力的影響
    2.5 低溫對其它光透明方法熒光保持能力的影響
    2.6 分析和討論
    2.7 本章小結(jié)
3 FDISCO與其它整體器官透明方法的比較研究
    3.1 材料與方法
    3.2 FDISCO與其它整體器官透明方法透明效果的比較
    3.3 FDISCO與其它整體器官透明方法成像質(zhì)量的比較
    3.4 分析與討論
    3.5 本章小結(jié)
4 基于FDISCO的整體器官神經(jīng)與血管成像
    4.1 材料與方法
    4.2 轉(zhuǎn)基因小鼠的鼠腦神經(jīng)結(jié)構(gòu)成像
    4.3 病毒標(biāo)記的鼠腦神經(jīng)投射成像
    4.4 骨骼肌神經(jīng)結(jié)構(gòu)的三維成像
    4.5 血管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)的三維成像
    4.6 分析與討論
    4.7 本章小結(jié)
5 總結(jié)與展望
    5.1 本文的主要內(nèi)容與結(jié)論
    5.2 本文的主要創(chuàng)新點
    5.3 展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄1 攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文
附錄2 本文使用的英文縮寫



本文編號：3776767