相比于傳統(tǒng)細(xì)胞二維平面培養(yǎng),三維培養(yǎng)技術(shù)作為一種隨組織工程興起而發(fā)展的新型體外培養(yǎng)方式,能夠?yàn)榧?xì)胞提供類(lèi)似于天然細(xì)胞外基質(zhì)的環(huán)境,維持細(xì)胞在生物體內(nèi)的存在狀態(tài)與特異性生物學(xué)行為,在藥物篩選、組織的工程支架、細(xì)胞生物學(xué)等領(lǐng)域有廣泛的應(yīng)用前景�；陟o電紡絲技術(shù)的培養(yǎng)支架,因具有與天然細(xì)胞外基質(zhì)極為相似的纖維結(jié)構(gòu)而被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞三維培養(yǎng)支架研究中。但目前的基于納米纖維的培養(yǎng)支架大多只能在宏觀上為細(xì)胞提供三維生長(zhǎng)環(huán)境,微觀狀態(tài)下,細(xì)胞仍以近二維生長(zhǎng)的方式與支架結(jié)合,而達(dá)不到真正意義上的三維細(xì)胞培養(yǎng)狀態(tài)。為了構(gòu)建真正適宜細(xì)胞三維生長(zhǎng)的培養(yǎng)支架,本文制備了一種具有高孔徑的三維納米纖維支架并進(jìn)行功能化修飾。同時(shí),以肝癌系細(xì)胞Hep G2與視神經(jīng)節(jié)細(xì)胞RGC5為細(xì)胞模型構(gòu)建細(xì)胞-支架三維培養(yǎng)體系,探究細(xì)胞在支架中的生長(zhǎng)形態(tài)以及增殖情況。研究過(guò)程如下:(1)在聚丙烯腈電紡原液中摻入磁性納米顆粒Fe304,靜電紡絲過(guò)程中以水相為輔助接收,利用釹鐵硼磁鐵對(duì)纖維中磁性納米顆粒的引力,使纖維快速突破水的表面張力,在水中堆積形成高度離散的三維納米纖維支架;(2)利用原位聚合法在纖維表面負(fù)載一層導(dǎo)電高分子聚合物聚...

【文章頁(yè)數(shù)】：74 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
1 緒論
    1.1 細(xì)胞體外培養(yǎng)
        1.1.1 細(xì)胞外基質(zhì)
        1.1.2 細(xì)胞三維培養(yǎng)
    1.2 靜電紡絲技術(shù)
        1.2.1 靜電紡絲技術(shù)簡(jiǎn)介
        1.2.2 靜電紡絲技術(shù)在構(gòu)建細(xì)胞三維培養(yǎng)支架研究進(jìn)展
    1.3 氧化石墨烯
        1.3.1 氧化石墨烯介紹
        1.3.2 氧化石墨烯在生物研究方面的應(yīng)用
        1.3.3 氧化石墨烯的生物毒性
    1.4 聚(3,4-乙撐二氧噻吩)
        1.4.1 聚(3,4-乙撐二氧噻吩)簡(jiǎn)介
        1.4.2 聚(3,4-乙撐二氧噻吩)的生物相容性
        1.4.3 聚(3,4-乙撐二氧噻吩)在細(xì)胞培養(yǎng)中的研究
    1.5 磁性材料在細(xì)胞三維培養(yǎng)中的發(fā)展
        1.5.1 磁性納米顆粒應(yīng)用于細(xì)胞三維培養(yǎng)
        1.5.2 磁性納米顆粒的生物相容性研究
    1.6 課題的提出與研究?jī)?nèi)容
2 四氧化三鐵/聚丙烯腈三維納米纖維的制備與表征分析
    2.1 引言
    2.2 實(shí)驗(yàn)部分
        2.2.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        2.2.2 紡絲原液液的制備
        2.2.3 Fe₃O₄/PAN三維納米纖維支架的制備
        2.2.4 Fe₃O₄/PAN三維納米纖維支架測(cè)試與表征
    2.3 結(jié)果討論與分析
        2.3.1 纖維形貌表征
        2.3.2 纖維支架傅里葉紅外光譜測(cè)定分析
        2.3.3 纖維支架X-射線(xiàn)衍射分析
        2.3.4 納米纖維支架機(jī)械性能測(cè)試
    2.4 理論計(jì)算
    2.5 本章小結(jié)
3 三維納米纖維支架的功能化修飾與性能分析
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        3.2.2 原位聚合法負(fù)載聚(3,4-乙撐二氧噻吩)
        3.2.3 靜電吸附法修飾氧化石墨烯
        3.2.4 GO/PEDOT/Fe₃O_/PAN三維納米纖維支架結(jié)構(gòu)性能測(cè)試
    3.3 結(jié)果分析與討論
        3.3.1 三維納米纖維支架形貌分析
        3.3.2 三維納米纖維成分組成分析
        3.3.3 三維納米纖維支架機(jī)械性能分析
        3.3.4 三維納米纖維支架電學(xué)性能分析
        3.3.5 三維納米纖維支架熱力學(xué)性能分析
    3.4 本章小結(jié)
4 三維納米纖維支架應(yīng)用于細(xì)胞三維培養(yǎng)的研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 實(shí)驗(yàn)材料及儀器
        4.2.2 細(xì)胞的三維培養(yǎng)
        4.2.3 細(xì)胞三維共聚焦掃描觀察
        4.2.4 細(xì)胞在納米纖維支架中的固定
        4.2.5 細(xì)胞DNA測(cè)定
        4.2.6 細(xì)胞凋亡測(cè)定
    4.3 結(jié)果分析與討論
        4.3.1 Hep G2細(xì)胞與Fe₃O₄/PAN納米纖維支架三維培養(yǎng)體系構(gòu)建細(xì)胞形態(tài)分析
        4.3.2 RGC5細(xì)胞與三位納米纖維支架培養(yǎng)體系構(gòu)建分析
    4.4 本章小結(jié)
5 結(jié)論與展望
    5.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)論
    5.2 實(shí)驗(yàn)存在問(wèn)題及展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄



本文編號(hào)：3770349