發(fā)布時(shí)間：2023-03-12 01:02

　　研究背景:膝關(guān)節(jié)軟骨病變是影響幾乎所有年齡段的人的疾病,嚴(yán)重影響著全人類(lèi)生活質(zhì)量。導(dǎo)致骨軟骨損傷的病因很多,例如創(chuàng)傷、疾病或老化等。在解剖結(jié)構(gòu)上,關(guān)節(jié)軟骨和硬骨兩者緊密相連,生物學(xué)功能上也相互影響。骨軟骨界面是介于透明軟骨與軟骨下骨之間的連接面。天然的連接面是由軟骨鈣化區(qū)構(gòu)成,其結(jié)構(gòu)薄而致密,起著隔離軟骨層和軟骨下骨層的作用,同時(shí)又將二者有機(jī)地整合在一起。骨軟骨缺損同時(shí)累及軟骨層和軟骨下骨層時(shí),兩者不同的力學(xué)性能和組織結(jié)構(gòu)凸顯了鈣化界面的重要性,在維護(hù)軟骨和軟骨下骨的正常功能上,骨軟骨界面的存在是必需的。因此,理想的復(fù)合骨軟骨支架應(yīng)模擬正常骨軟骨組織結(jié)構(gòu),所以在制備復(fù)合支架時(shí)應(yīng)當(dāng)構(gòu)建出鈣化層的結(jié)構(gòu),進(jìn)而更好地促進(jìn)骨軟骨組織缺損的修復(fù)。骨軟骨一體化支架再生將成為科研和臨床的熱點(diǎn)議題。因此,本研究主要包括以下內(nèi)容:1軟骨層支架工藝構(gòu)建,篩選出適合軟骨細(xì)胞表型與功能的水凝膠支架;2開(kāi)發(fā)具有鈣化層的一體化支架;3體外評(píng)估一體化支架的特征及鈣化界面層的屏蔽作用。方法:在本研究中,我們選取具有良好的生物相容性的海藻酸鈉和殼聚糖水凝膠用于構(gòu)建具有鈣化層的一體化復(fù)合支架。首先進(jìn)行軟骨支架工藝的優(yōu)化,篩...

【文章頁(yè)數(shù)】：46 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
引言
1 儀器與試劑
    1.1 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    1.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 軟骨細(xì)胞提取與培養(yǎng)
    2.2 細(xì)胞活性檢測(cè)
    2.3 細(xì)胞形態(tài)學(xué)表征
    2.4 細(xì)胞死活染色
    2.5 細(xì)胞骨架染色
    2.6 逆轉(zhuǎn)錄酶聚合酶鏈反應(yīng)
    2.7 糖胺聚糖含量測(cè)定
    2.8 膠原蛋白II含量測(cè)定
    2.9 細(xì)胞共培養(yǎng)的染色方法
    2.10 Transwell進(jìn)行細(xì)胞共培養(yǎng)
    2.11 水凝膠支架制備方法
    2.12 水凝膠支架力學(xué)檢測(cè)
    2.13 SEM表征水凝膠支架
    2.14 microCT表征水凝膠支架
    2.15 CLSM表征水凝膠支架
    2.16 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 軟骨細(xì)胞的提取與表征
    3.2 G含量對(duì)水凝膠支架力學(xué)性能的影響
    3.3 水凝膠支架G含量對(duì)軟骨細(xì)胞形態(tài)和功能的影響
        3.3.1 軟骨細(xì)胞在水凝膠支架上的粘附行為
        3.3.2 軟骨細(xì)胞在水凝膠支架上的骨架形態(tài)
        3.3.3 軟骨細(xì)胞在水凝膠支架上的增殖能力
        3.3.4 軟骨細(xì)胞在水凝膠支架上的功能表達(dá)
    3.4 成骨細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞對(duì)軟骨細(xì)胞功能的影響
    3.5 軟骨下骨-軟骨一體化水凝膠支架的制備與表征
        3.5.1 一體化水凝膠支架的制備和形態(tài)學(xué)表征
        3.5.2 一體化水凝膠支架中鈣化界面層的表征
        3.5.3 鈣化界面層的隔離效應(yīng)
4 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表學(xué)術(shù)論文情況
致謝



本文編號(hào)：3760616