目的： 探討羧乙基殼聚糖/納米羥基磷灰石三維支架構(gòu)建組織工程氣管的可行性 一、通過原代軟骨細胞的體外培養(yǎng)和鑒定,探討其成為組織工程氣管種子細胞的可行性。 二、制備羧乙基殼聚糖/納米羥基磷灰石(NCECS/n-HA)三維支架構(gòu),通過體外種植軟骨細胞,觀察軟骨細胞在支架表面的生長情況,探討NCECS/n-HA三維泡沫型支架構(gòu)建組織工程氣管的可行性。 方法： (1)通過兩步酶消化法獲得兔耳廓原代軟骨細胞并進行傳代培養(yǎng)。(2)通過免疫組織化學(xué)、免疫熒光以及甲苯胺藍染色對獲得的軟骨細胞實施Ⅱ型膠原、糖胺聚糖檢測,進行鑒定。(3)通過真空冷凍干燥法制得NCECS/n-HA三維泡沫型支架,并用掃描電鏡(SEM)檢測支架表面的成孔率和孔徑大小。(4)體外將第2代軟骨細胞種植到NCECS/n-HA支架表面共同培養(yǎng)一周,SEM檢測軟骨細胞在支架表面的生長情況。 結(jié)果： (1)通過胰酶和Ⅱ型膠原酶聯(lián)合消化法可以獲得相對較純凈的軟骨細胞,差速貼壁法和機械刮除法有助于原代軟骨細胞的進一步純化。(2)Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)、Ⅱ型膠原免疫熒光以及甲苯胺藍染色顯示獲得的細胞可以特異性地分Ⅱ型膠原和糖胺聚糖,證實獲得的細...

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【學(xué)位級別】：碩士

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中文摘要
ABSTRACT
引言
第一部分 軟骨細胞的體外原代培養(yǎng)及鑒定
    一 材料與方法
    二 結(jié)果
    三 討論
第二部分 NCECS/n-HA三維支架構(gòu)建組織工程氣管
    一 材料與方法
    二 結(jié)果
    三 討論
參考文獻
結(jié)論
附圖
文獻綜述
    參考文獻
致謝
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