發(fā)布時間：2022-12-10 22:58

　　目的對臍帶脫細(xì)胞支架（Human Decellularized Umbilical Cord Scaffolds,dHUCs）進(jìn)行制備和表征,評價三維支架上培養(yǎng)小鼠肝前體樣細(xì)胞（Rodent hepatocyte-derived liver progenitor-like cells,rHepLPCs）功能,提供一種新型組織工程化肝臟構(gòu)建的新方案。方法兩步灌肝法分離小鼠原代肝細(xì)胞,體外擴(kuò)增并用Dil標(biāo)記�；谀殠摷�(xì)胞支架材料的三維培養(yǎng)下rHepLPCs,通過測定成分檢測、化學(xué)染色等方法表征材料,通過定量PCR、氨清除和尿素合成等方法進(jìn)行rHepLPCs-3D的功能評價。結(jié)果經(jīng)過脫細(xì)胞工藝處理后,臍帶生物支架材料核酸殘留量為（60.20±1.42）ng/mg（干重）,核酸去除率達(dá)到90.5%,基質(zhì)成分含量豐富。小鼠肝前體樣細(xì)胞體外擴(kuò)增效果好,部分肝臟功能基因表達(dá)下降。支架培養(yǎng)2周后,ALB、G6PC和CPS1肝細(xì)胞功能基因的表達(dá)水平分別上調(diào)10.1±2.3、34.4±1.3、42.0±22.0倍。在氨代謝方面,2D培養(yǎng)的rHepLPCs氨清除量為（5.7±0.9）mg/（dL·106細(xì)... 

【文章頁數(shù)】：5 頁

【文章目錄】：
材料與方法
    一、材料與試劑
    二、實驗方法
        （一）臍帶脫細(xì)胞工藝處理
        （二）小鼠原代肝細(xì)胞分離
        （三）肝前體樣細(xì)胞2D培養(yǎng)和標(biāo)記
        （四）核酸、羥脯氨酸和糖胺聚糖定量分析
        （五）石蠟包埋切片和化學(xué)染色
        （六）肝前體樣細(xì)胞3D培養(yǎng)和細(xì)胞增殖情況
        （七）熒光定量PCR
        （八）氨清除和尿素合成
        （九）統(tǒng)計學(xué)處理
結(jié)果
    一、臍帶脫細(xì)胞材料的外觀和內(nèi)部結(jié)構(gòu)
    二、材料的核酸殘留量和細(xì)胞外基質(zhì)含量情況
    三、rHepLPCs在臍帶脫細(xì)胞支架上的分布和增殖情況
    四、rHepLPCs在臍帶脫細(xì)胞支架上的功能基因表達(dá)和氨代謝情況
討論



本文編號：3717673