研究目的通過(guò)BMP2和BMP7共轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞（BMSCs）,以富血小板血漿凝膠（PRP）為支架,建立一種可注射型的組織工程骨。 研究方法以全骨髓貼壁法分離、得到兔BMSCs,并通過(guò)定向分化,細(xì)胞表面標(biāo)志物檢測(cè)等方法確定為BMSCs。 以pAd/CMV/V5-Dest為載體,構(gòu)建BMP2腺病毒和BMP7腺病毒,并測(cè)定病毒的滴度和對(duì)兔BMSCs的合適的轉(zhuǎn)染復(fù)數(shù)值（MOI）。并以Realtime PCR檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞BMP2和BMP7基因mRNA表達(dá)情況;以免疫熒光檢測(cè)轉(zhuǎn)染后BMP2和BMP7基因的蛋白表達(dá)情況。 將分離得到的兔BMSCs傳代至第三代,分成五組,分別作以下處理:a、空白對(duì)照:繼續(xù)以常規(guī)培養(yǎng)基培養(yǎng);b、成骨誘導(dǎo)液誘導(dǎo)組:繼續(xù)以成骨誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基培養(yǎng);c、BMP2基因轉(zhuǎn)染組:單獨(dú)以BMP2腺病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)染;d、BMP7基因轉(zhuǎn)染組:單獨(dú)以BMP7腺病毒進(jìn)行轉(zhuǎn)染;e、BMP2和BMP7基因共轉(zhuǎn)染組:以BMP2腺病毒和BMP7腺病毒進(jìn)行聯(lián)合轉(zhuǎn)染。培養(yǎng)第7天、14天以Realtime PCR測(cè)定各組細(xì)胞Runx-2、Osx、AKP和Collagen I基因... 

【文章頁(yè)數(shù)】：112 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
縮略語(yǔ)表
前言
    參考文獻(xiàn)
第一部分 兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的分離以及其基本生物學(xué)特性的研究
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 BMP-2 腺病毒載體的構(gòu)建及BMP2、BMP7 共轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后BMP2 和BMP7 蛋白的表達(dá)
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第三部分 BMP2和BMP7腺病毒聯(lián)合轉(zhuǎn)染兔骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞后向成骨細(xì)胞方向的分化
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
第四部分 富血小板血漿凝膠支架的制備以及轉(zhuǎn)基因骨 髓間充質(zhì)干細(xì)胞與自體血小板凝膠生物支架 組織工程骨的構(gòu)建
    實(shí)驗(yàn)材料
    實(shí)驗(yàn)方法
    實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    討論
    參考文獻(xiàn)
全文結(jié)論
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄1 插圖
附錄2 完成論文
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號(hào)：3698533