直接金屬激光燒結(jié)鈦表面形貌促進(jìn)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞成骨分化的表觀遺傳機(jī)制研究
發(fā)布時(shí)間:2022-10-05 18:48
目的:具有分級(jí)微/納米復(fù)合形貌的骨內(nèi)種植體更類(lèi)似于天然骨組織和細(xì)胞外微環(huán)境,因此在調(diào)節(jié)細(xì)胞-材料表面相互作用方面具有潛在優(yōu)勢(shì)。然而,細(xì)胞對(duì)該表面形貌的應(yīng)答和潛在的應(yīng)答機(jī)制并不完全清楚。為了探討細(xì)胞響應(yīng)分級(jí)微/納米復(fù)合形貌的生物學(xué)行為及潛在機(jī)制,本研究采用直接金屬激光燒結(jié)(direct metal laser sintering,DMLS)技術(shù)制備了具有分級(jí)微/納米復(fù)合形貌的鈦表面。探究DMLS鈦表面分級(jí)微/納米復(fù)合形貌在骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)成骨分化過(guò)程中的作用及潛在的表觀遺傳機(jī)制。方法:1.通過(guò)機(jī)械拋光、噴砂酸蝕、直接金屬激光燒結(jié)技術(shù)分別加工制作三組不同表面形貌的鈦表面,包括光滑鈦組(Ti)、噴砂酸蝕鈦組(SLA)和直接金屬激光燒結(jié)鈦組(DMLS)。然后對(duì)三組鈦表面進(jìn)行表面形貌、表面親水性及表面蛋白吸附能力的表征分析。場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡(FE-SEM)觀察各組鈦表面不同放大倍數(shù)下的表面形貌特征;接觸角測(cè)量?jī)x檢測(cè)各組鈦表面接觸角的大小差異;蛋白吸附實(shí)驗(yàn)分析各組鈦表面的蛋白吸附能力。2.對(duì)各組鈦表面進(jìn)行表征后,在各...
【文章頁(yè)數(shù)】:89 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、直接金屬激光燒結(jié)鈦分級(jí)微/納米復(fù)合表面形貌的制備及表征分析
1.1 對(duì)象和方法
1.1.1 主要試劑耗材
1.1.2 主要設(shè)備
1.1.3 各組鈦片的制備
1.1.4 各組鈦片的表面表征
1.2 結(jié)果
1.2.1 成功制備DMLS分級(jí)微/納米復(fù)合形貌鈦表面
1.2.2 各組鈦表面場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡觀察
1.2.3 接觸角大小的測(cè)量
1.2.4 蛋白吸附能力
1.3 討論
1.4 小結(jié)
二、直接金屬激光燒結(jié)鈦分級(jí)微/納米復(fù)合形貌表面生物相容性評(píng)價(jià)
2.1 對(duì)象和方法
2.1.1 主要試劑耗材
2.1.2 主要設(shè)備
2.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)所需溶液配置
2.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)方法
2.1.5 細(xì)胞早期黏附和形態(tài)學(xué)觀察
2.1.6 細(xì)胞存活檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
2.1.7 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
2.1.8 統(tǒng)計(jì)分析
2.2 結(jié)果
2.2.1 早期細(xì)胞黏附與形態(tài)學(xué)觀察
2.2.2 細(xì)胞存活檢測(cè)結(jié)果
2.2.3 細(xì)胞增殖結(jié)果分析
2.3 討論
2.4 小結(jié)
三、直接金屬激光燒結(jié)鈦分級(jí)微/納米復(fù)合形貌的體內(nèi)、體外成骨性能檢測(cè)
3.1 對(duì)象和方法
3.1.1 主要試劑耗材
3.1.2 主要設(shè)備
3.1.3 主要試劑配制
3.1.4 堿性磷酸酶活性檢測(cè)
3.1.5 實(shí)時(shí)定量熒光PCR實(shí)驗(yàn)
3.1.6 免疫熒光和蛋白印跡實(shí)驗(yàn)
3.1.7 體內(nèi)成骨實(shí)驗(yàn)
3.1.8 統(tǒng)計(jì)分析
3.2 結(jié)果
3.2.1 堿性磷酸酶活性
3.2.2 實(shí)時(shí)定量熒光PCR結(jié)果分析
3.2.3 免疫熒光和蛋白印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
3.2.4 體內(nèi)成骨結(jié)果分析
3.3 討論
3.4 小結(jié)
四、分級(jí)微/納米復(fù)合形貌促進(jìn)BMSCs成骨分化的表觀遺傳機(jī)制研究
4.1 對(duì)象和方法
4.1.1 主要試劑耗材
4.1.2 主要設(shè)備
4.1.3 主要試劑配制
4.1.4 免疫熒光和蛋白印跡實(shí)驗(yàn)
4.1.5 染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)實(shí)驗(yàn)
4.1.6 統(tǒng)計(jì)分析
4.2 結(jié)果
4.2.1 H3K4me3的免疫熒光和蛋白印跡結(jié)果分析
4.2.2 CHIP結(jié)果分析
4.3 討論
4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 LINC復(fù)合體與細(xì)胞內(nèi)力傳導(dǎo)
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Control of stem cell fate by engineering their micro and nanoenvironment[J]. Michelle F Griffin,Peter E Butler,Alexander M Seifalian,Deepak M Kalaskar. World Journal of Stem Cells. 2015(01)
本文編號(hào):3686309
【文章頁(yè)數(shù)】:89 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)
前言
研究現(xiàn)狀、成果
研究目的、方法
一、直接金屬激光燒結(jié)鈦分級(jí)微/納米復(fù)合表面形貌的制備及表征分析
1.1 對(duì)象和方法
1.1.1 主要試劑耗材
1.1.2 主要設(shè)備
1.1.3 各組鈦片的制備
1.1.4 各組鈦片的表面表征
1.2 結(jié)果
1.2.1 成功制備DMLS分級(jí)微/納米復(fù)合形貌鈦表面
1.2.2 各組鈦表面場(chǎng)發(fā)射掃描電鏡觀察
1.2.3 接觸角大小的測(cè)量
1.2.4 蛋白吸附能力
1.3 討論
1.4 小結(jié)
二、直接金屬激光燒結(jié)鈦分級(jí)微/納米復(fù)合形貌表面生物相容性評(píng)價(jià)
2.1 對(duì)象和方法
2.1.1 主要試劑耗材
2.1.2 主要設(shè)備
2.1.3 細(xì)胞培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)所需溶液配置
2.1.4 細(xì)胞培養(yǎng)相關(guān)實(shí)驗(yàn)方法
2.1.5 細(xì)胞早期黏附和形態(tài)學(xué)觀察
2.1.6 細(xì)胞存活檢測(cè)實(shí)驗(yàn)
2.1.7 細(xì)胞增殖實(shí)驗(yàn)
2.1.8 統(tǒng)計(jì)分析
2.2 結(jié)果
2.2.1 早期細(xì)胞黏附與形態(tài)學(xué)觀察
2.2.2 細(xì)胞存活檢測(cè)結(jié)果
2.2.3 細(xì)胞增殖結(jié)果分析
2.3 討論
2.4 小結(jié)
三、直接金屬激光燒結(jié)鈦分級(jí)微/納米復(fù)合形貌的體內(nèi)、體外成骨性能檢測(cè)
3.1 對(duì)象和方法
3.1.1 主要試劑耗材
3.1.2 主要設(shè)備
3.1.3 主要試劑配制
3.1.4 堿性磷酸酶活性檢測(cè)
3.1.5 實(shí)時(shí)定量熒光PCR實(shí)驗(yàn)
3.1.6 免疫熒光和蛋白印跡實(shí)驗(yàn)
3.1.7 體內(nèi)成骨實(shí)驗(yàn)
3.1.8 統(tǒng)計(jì)分析
3.2 結(jié)果
3.2.1 堿性磷酸酶活性
3.2.2 實(shí)時(shí)定量熒光PCR結(jié)果分析
3.2.3 免疫熒光和蛋白印跡實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
3.2.4 體內(nèi)成骨結(jié)果分析
3.3 討論
3.4 小結(jié)
四、分級(jí)微/納米復(fù)合形貌促進(jìn)BMSCs成骨分化的表觀遺傳機(jī)制研究
4.1 對(duì)象和方法
4.1.1 主要試劑耗材
4.1.2 主要設(shè)備
4.1.3 主要試劑配制
4.1.4 免疫熒光和蛋白印跡實(shí)驗(yàn)
4.1.5 染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)實(shí)驗(yàn)
4.1.6 統(tǒng)計(jì)分析
4.2 結(jié)果
4.2.1 H3K4me3的免疫熒光和蛋白印跡結(jié)果分析
4.2.2 CHIP結(jié)果分析
4.3 討論
4.4 小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述 LINC復(fù)合體與細(xì)胞內(nèi)力傳導(dǎo)
綜述參考文獻(xiàn)
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]Control of stem cell fate by engineering their micro and nanoenvironment[J]. Michelle F Griffin,Peter E Butler,Alexander M Seifalian,Deepak M Kalaskar. World Journal of Stem Cells. 2015(01)
本文編號(hào):3686309
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