豬脂肪源基質(zhì)水凝膠促進(jìn)游離移植脂肪存活的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2022-08-23 18:33
研究背景:外傷、手術(shù)、先天發(fā)育異常等均可導(dǎo)致軟組織缺損或缺失。游離脂肪移植因填充物(脂肪)來源廣泛,兼具填充與形態(tài)塑造的效果,是軟組織缺損填充修復(fù)最常用的技術(shù)之一[1-3]。然而,游離脂肪移植過程中成熟脂肪細(xì)胞的物理損傷或組織/血管再生不足可導(dǎo)致部分脂肪細(xì)胞無法存活[4,5],相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道游離脂肪移植體積保留率在10%-85%之間[6-9]。移植物體積保留率是決定游離脂肪填充術(shù)手術(shù)效果最重要的因素之一,促進(jìn)游離移植脂肪存活進(jìn)而提高體積保留率是目前游離脂肪移植亟需解決的問題[10]。近年來,已有研究嘗試使用生物材料提供和改善細(xì)胞存活和誘導(dǎo)原位脂肪再生的局部微環(huán)境[11-14]。水凝膠類生物材料富含水,可促進(jìn)更好的氧氣和營養(yǎng)物質(zhì)交換[15]。以水凝膠作為細(xì)胞/組織載體,可通過減少組織損傷提高移植組織存活率。部分研究證實(shí),與常規(guī)的組織/細(xì)胞移植相比,基于水凝膠生物材料(例如膠原蛋白和透明質(zhì)酸)的組織/細(xì)胞移植具有更好的組織存活率[15-18]
【文章頁數(shù)】:109 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略表
摘要
ABSTRACT
第一部分:HAPA促進(jìn)游離移植脂肪存活的體外實(shí)驗(yàn)研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源
2.主要試劑和儀器
實(shí)驗(yàn)方法
1.ADSCs原代培養(yǎng)
2.豬脂肪組織無細(xì)胞基質(zhì)水凝膠的制備
3.人源性脂肪顆粒的制備
4.常氧及低氧條件下,HAPA對(duì) ADSCs增殖的影響
5.常氧及低氧條件下,HAPA對(duì) ADSCs成脂分化的影響
6.常氧及低氧條件下,HAPA對(duì) ADSCs的 VEGF分泌的影響
7.體外常氧及低氧條件下,HAPA對(duì)游離脂肪存活及凋亡的影響
結(jié)果
1.HAPA促進(jìn)低氧條件下ADSCs增殖
2.低氧條件下HAPA仍具有對(duì)ADSCs成脂誘導(dǎo)特性
3.HAPA促進(jìn)低氧條件下VEGF的分泌
4.低氧條件下游離脂肪組織及HAPA/脂肪復(fù)合物中細(xì)胞的存活及凋亡情況
5.體外常氧、低氧條件下HAPA對(duì)游離脂肪中細(xì)胞的HIF-1α基因表達(dá)水平的調(diào)控
6.體外常氧、低氧條件下HAPA對(duì)游離脂肪中細(xì)胞的HIF-1α蛋白表達(dá)影響。
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
第二部分:HAPA及 ADSCS促進(jìn)游離移植脂肪存活的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.主要材料和儀器
實(shí)驗(yàn)方法
1.動(dòng)物模型制作
2.實(shí)驗(yàn)分組及實(shí)驗(yàn)流程圖示意圖
3.實(shí)驗(yàn)步驟
4.動(dòng)物處死及取材
5.術(shù)后超聲、大體觀測(cè)及移植物體積保留率比較
6.移植脂肪組織組織學(xué)評(píng)價(jià)
7.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果
1.大體觀察及體積測(cè)量結(jié)果
2.超聲及大體觀察結(jié)果
3.HE染色結(jié)果分析
4.圍脂肪蛋白(Perilipin A)染色結(jié)果
5.CD31免疫組化染色結(jié)果
6.Ki67及TUNEL染色結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
第三部分:HAPA輔助脂肪移植的HAPA/脂肪體積比優(yōu)化的體內(nèi)研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.主要材料和儀器
實(shí)驗(yàn)方法
1.移植材料準(zhǔn)備與動(dòng)物模型制作
2.實(shí)驗(yàn)步驟及方法
3.術(shù)后超聲、大體觀測(cè)及移植物體積保留率比較
4.移植物組織學(xué)染色及分析結(jié)果
5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果
1.大體觀察及體積測(cè)量結(jié)果
2.超聲觀察結(jié)果
3.HE染色結(jié)果分析
4.CD31免疫組化染色結(jié)果
5.圍脂肪蛋白染色(Perilipin A)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
課題綜述水凝膠材料在脂肪組織工程的應(yīng)用
參考文獻(xiàn)
在讀間科研成果簡(jiǎn)介
致謝
本文編號(hào):3678271
【文章頁數(shù)】:109 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
英文縮略表
摘要
ABSTRACT
第一部分:HAPA促進(jìn)游離移植脂肪存活的體外實(shí)驗(yàn)研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源
2.主要試劑和儀器
實(shí)驗(yàn)方法
1.ADSCs原代培養(yǎng)
2.豬脂肪組織無細(xì)胞基質(zhì)水凝膠的制備
3.人源性脂肪顆粒的制備
4.常氧及低氧條件下,HAPA對(duì) ADSCs增殖的影響
5.常氧及低氧條件下,HAPA對(duì) ADSCs成脂分化的影響
6.常氧及低氧條件下,HAPA對(duì) ADSCs的 VEGF分泌的影響
7.體外常氧及低氧條件下,HAPA對(duì)游離脂肪存活及凋亡的影響
結(jié)果
1.HAPA促進(jìn)低氧條件下ADSCs增殖
2.低氧條件下HAPA仍具有對(duì)ADSCs成脂誘導(dǎo)特性
3.HAPA促進(jìn)低氧條件下VEGF的分泌
4.低氧條件下游離脂肪組織及HAPA/脂肪復(fù)合物中細(xì)胞的存活及凋亡情況
5.體外常氧、低氧條件下HAPA對(duì)游離脂肪中細(xì)胞的HIF-1α基因表達(dá)水平的調(diào)控
6.體外常氧、低氧條件下HAPA對(duì)游離脂肪中細(xì)胞的HIF-1α蛋白表達(dá)影響。
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
第二部分:HAPA及 ADSCS促進(jìn)游離移植脂肪存活的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.主要材料和儀器
實(shí)驗(yàn)方法
1.動(dòng)物模型制作
2.實(shí)驗(yàn)分組及實(shí)驗(yàn)流程圖示意圖
3.實(shí)驗(yàn)步驟
4.動(dòng)物處死及取材
5.術(shù)后超聲、大體觀測(cè)及移植物體積保留率比較
6.移植脂肪組織組織學(xué)評(píng)價(jià)
7.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果
1.大體觀察及體積測(cè)量結(jié)果
2.超聲及大體觀察結(jié)果
3.HE染色結(jié)果分析
4.圍脂肪蛋白(Perilipin A)染色結(jié)果
5.CD31免疫組化染色結(jié)果
6.Ki67及TUNEL染色結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
第三部分:HAPA輔助脂肪移植的HAPA/脂肪體積比優(yōu)化的體內(nèi)研究
前言
主要材料和儀器
1.組織來源與實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
2.主要材料和儀器
實(shí)驗(yàn)方法
1.移植材料準(zhǔn)備與動(dòng)物模型制作
2.實(shí)驗(yàn)步驟及方法
3.術(shù)后超聲、大體觀測(cè)及移植物體積保留率比較
4.移植物組織學(xué)染色及分析結(jié)果
5.統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
結(jié)果
1.大體觀察及體積測(cè)量結(jié)果
2.超聲觀察結(jié)果
3.HE染色結(jié)果分析
4.CD31免疫組化染色結(jié)果
5.圍脂肪蛋白染色(Perilipin A)結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
課題綜述水凝膠材料在脂肪組織工程的應(yīng)用
參考文獻(xiàn)
在讀間科研成果簡(jiǎn)介
致謝
本文編號(hào):3678271
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