細(xì)胞電融合是指在離體環(huán)境下,通過(guò)電刺激作用促使兩個(gè)或多個(gè)細(xì)胞或原生質(zhì)體相互接觸進(jìn)而發(fā)生融合,形成單核或多核的雜核細(xì)胞的過(guò)程。融合后細(xì)胞同時(shí)具有兩個(gè)或多個(gè)親本細(xì)胞的遺傳特性,可以培養(yǎng)出新的細(xì)胞工程產(chǎn)品,特別是在單克隆抗體和抗腫瘤疫苗制備,動(dòng)植物遠(yuǎn)緣雜交育種等方面具有十分重要的意義。細(xì)胞電融合技術(shù)具有操作精確可控、融合效率高、細(xì)胞需求量低等優(yōu)勢(shì)。但是傳統(tǒng)的電融合方法采用平板電極,電極間距寬,融合信號(hào)電壓高,信號(hào)發(fā)生裝置要求能產(chǎn)生高壓電信號(hào),制作困難、成本高。基于微電極陣列的微流控細(xì)胞電融合芯片可大大降低驅(qū)動(dòng)電壓和電信號(hào)發(fā)生器的制作難度,同時(shí)能實(shí)現(xiàn)高通量的細(xì)胞電融合,提高融合效率。課題組前期主要針對(duì)芯片的設(shè)計(jì)、制作和同源細(xì)胞的融合開(kāi)展了大量研究。為了擴(kuò)大實(shí)用性,我們?cè)诋愒醇?xì)胞的電融合實(shí)驗(yàn)方面開(kāi)展了探索性研究,摸索合適的融合參數(shù)。實(shí)驗(yàn)中,研究分析異源動(dòng)物細(xì)胞的排隊(duì)和融合,并通過(guò)熒光標(biāo)記的方法使融合效果的觀察更加清晰可靠。在此基礎(chǔ)上,計(jì)算出異源細(xì)胞的排隊(duì)率和融合率,同時(shí),對(duì)融合后細(xì)胞進(jìn)行染色體組型鑒定和篩選。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,低電壓驅(qū)動(dòng)下異源細(xì)胞的電融合是可實(shí)現(xiàn)的,融合后的細(xì)胞可以繼續(xù)培養(yǎng)和生長(zhǎng),融... 

【文章頁(yè)數(shù)】：61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
1 緒論
    1.1 研究背景和意義
        1.1.1 研究背景
        1.1.2 研究意義
    1.2 國(guó)內(nèi)外研究現(xiàn)狀
        1.2.1 異源細(xì)胞融合實(shí)驗(yàn)的研究
        1.2.2 細(xì)胞電融合信號(hào)發(fā)生裝置的研究
    1.3 研究目標(biāo)和內(nèi)容
2 微陣列電極細(xì)胞電融合的理論基礎(chǔ)
    2.1 介電電泳力對(duì)細(xì)胞的作用
    2.2 細(xì)胞電融合原理
        2.2.1 細(xì)胞在電場(chǎng)作用下的排隊(duì)
        2.2.2 細(xì)胞電穿孔
        2.2.3 細(xì)胞電融合
3 針對(duì)微芯片的細(xì)胞電融合信號(hào)的選擇
    3.1 控制信號(hào)的類(lèi)型
    3.2 控制信號(hào)的參數(shù)
    3.3 細(xì)胞電融合過(guò)程
4 異源細(xì)胞電融合實(shí)驗(yàn)研究
    4.1 實(shí)驗(yàn)材料和方法
        4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料和試劑
        4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和設(shè)備
        4.1.3 實(shí)驗(yàn)方法
    4.2 電融合實(shí)驗(yàn)相關(guān)參數(shù)的優(yōu)化和確定
        4.2.1 NIH-3T3 細(xì)胞和HEK-293 細(xì)胞的電融合實(shí)驗(yàn)
        4.2.2 NIH-3T3 細(xì)胞和HEK-293 細(xì)胞的無(wú)菌細(xì)胞電融合實(shí)驗(yàn)
        4.2.3 Human MSCs 和K562 細(xì)胞電融合實(shí)驗(yàn)
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 異源細(xì)胞電融合的實(shí)驗(yàn)分析
        4.3.2 融合細(xì)胞培養(yǎng)和鑒定
        4.3.3 流式細(xì)胞分析儀對(duì)融合細(xì)胞篩選
    4.4 本章小結(jié)
5 細(xì)胞電融合的信號(hào)發(fā)生器的初步研究
    5.1 正弦信號(hào)輸出電路
        5.1.1 DDS 技術(shù)的介紹
        5.1.2 基于AD9850 輸出的正弦信號(hào)
    5.2 脈沖信號(hào)輸出電路
    5.3 系統(tǒng)控制等電路
    5.4 輸出信號(hào)的測(cè)試
    5.5 本章小結(jié)
6 總結(jié)及展望
    6.1 課題取得的進(jìn)展
    6.2 不足及展望
致謝
參考文獻(xiàn)
附錄



本文編號(hào)：3677034