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基于長(zhǎng)余輝納米探針的細(xì)胞表面聚糖分析方法的構(gòu)建及應(yīng)用

發(fā)布時(shí)間:2022-07-08 14:25
  細(xì)胞表面聚糖作為細(xì)胞的重要結(jié)構(gòu)和功能分子之一,參與細(xì)胞粘附、細(xì)胞識(shí)別、信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)等一系列重要的生命活動(dòng)。細(xì)胞表面糖鏈的表達(dá)以及特定糖鏈的改變與細(xì)胞的生理狀態(tài)和功能有著極其密切的聯(lián)系,糖鏈的結(jié)構(gòu)異常與許多重大疾病(如癌癥)的發(fā)生和發(fā)展息息相關(guān)。因此發(fā)展高靈敏和高特異性的細(xì)胞表面聚糖檢測(cè)方法,對(duì)于了解細(xì)胞表面糖基化異常與腫瘤的關(guān)系,進(jìn)一步理解糖基化在惡性腫瘤發(fā)生發(fā)展過(guò)程中的作用以及開(kāi)發(fā)新的治療方法和藥物篩選等方面有著極其重要的意義。本工作中我們構(gòu)建了一種基于長(zhǎng)余輝納米探針的新型分析平臺(tái),并將此平臺(tái)進(jìn)一步應(yīng)用于探究細(xì)胞表面糖鏈的種類和表達(dá)水平與腫瘤及類神經(jīng)細(xì)胞分化之間的關(guān)系,為進(jìn)一步理解糖基化與腫瘤的發(fā)生以及與細(xì)胞分化之間的聯(lián)系提供一定的現(xiàn)實(shí)和理論依據(jù)。本論文主要分為以下兩個(gè)研究?jī)?nèi)容:(1)長(zhǎng)余輝納米探針的構(gòu)建及其在前列腺腫瘤細(xì)胞表面糖鏈分析中的應(yīng)用本工作我們采用水熱法合成了具有近紅外長(zhǎng)余輝性質(zhì)的Cr3+摻雜的鎵酸鋅納米粒子(ZnGa2O4:Cr3+,ZGC)。首先,通過(guò)3-氨基丙基-三乙氧基硅烷(APTES)硅烷化和NHS-P... 

【文章頁(yè)數(shù)】:61 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
摘要
Abstract
縮寫(xiě)符號(hào)對(duì)照表
第1章 緒論
    1.1 細(xì)胞表面聚糖
        1.1.1 細(xì)胞表面聚糖的定義和特點(diǎn)
        1.1.2 細(xì)胞表面聚糖的功能
    1.2 細(xì)胞表面聚糖的識(shí)別方法
        1.2.1 凝集素識(shí)別法
        1.2.2 硼酸識(shí)別法
        1.2.3 生物正交技術(shù)
    1.3 細(xì)胞表面聚糖的檢測(cè)方法
        1.3.1 質(zhì)譜法
        1.3.2 電化學(xué)法
        1.3.3 熒光法
    1.4 長(zhǎng)余輝發(fā)光材料的簡(jiǎn)介
    1.5 長(zhǎng)余輝發(fā)光材料的合成方法
        1.5.1 高溫固相法
        1.5.2 溶膠-凝膠法
        1.5.3 燃燒法
        1.5.4 共沉淀法
        1.5.5 水熱法
    1.6 長(zhǎng)余輝納米材料的應(yīng)用
        1.6.1 生物檢測(cè)分析
        1.6.2 生物醫(yī)學(xué)成像
    1.7 本文選題意義及主要研究?jī)?nèi)容
        1.7.1 選題意義
        1.7.2 主要研究?jī)?nèi)容
第2章 實(shí)驗(yàn)所需試劑與儀器
    2.1 實(shí)驗(yàn)所需的主要試劑
    2.2 實(shí)驗(yàn)所需的主要儀器
        2.2.1 透射電子顯微鏡
        2.2.2 X射線衍射儀
        2.2.3 酶聯(lián)免疫檢測(cè)儀
        2.2.4 熒光光譜儀
        2.2.5 激光共聚焦掃描顯微鏡
第3章 長(zhǎng)余輝納米探針的構(gòu)建及其在前列腺腫瘤細(xì)胞表面糖鏈分析中的應(yīng)用
    3.1 引言
    3.2 實(shí)驗(yàn)部分
        3.2.1 長(zhǎng)余輝納米粒子ZGC的合成
        3.2.2 ZGC的修飾
        3.2.3 DU145和RWPE-1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.4 細(xì)胞的固定和預(yù)處理
        3.2.5 基于ZGC長(zhǎng)余輝探針的DU145表面糖鏈檢測(cè)
        3.2.6 基于TMB-HRP顯色法和共聚焦顯微熒光成像法的表面糖鏈分析
        3.2.7 DU145和RWPE-1 細(xì)胞表面糖鏈比較
        3.2.8 衣霉素對(duì)DU145細(xì)胞表面糖鏈的影響
    3.3 結(jié)果與討論
        3.3.1 實(shí)驗(yàn)原理
        3.3.2 ZGC的表征
        3.3.3 ZGC修飾的表征
        3.3.4 ZGC-PEG-avidin檢測(cè)DU145 細(xì)胞表面糖鏈和HRP-TMB顯色法驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)
        3.3.5 共聚焦顯微熒光成像法驗(yàn)證長(zhǎng)余輝納米探針的實(shí)驗(yàn)結(jié)果
        3.3.6 衣霉素對(duì)DU145細(xì)胞表面糖鏈的影響
        3.3.7 DU145和RWPE-1 細(xì)胞表面糖鏈的檢測(cè)
    3.4 本章小結(jié)
第4章 基于長(zhǎng)余輝納米探針的類神經(jīng)細(xì)胞分化過(guò)程中細(xì)胞表面糖鏈表達(dá)譜的研究
    4.1 引言
    4.2 實(shí)驗(yàn)部分
        4.2.1 ZGC-PEG-Biotin的修飾驗(yàn)證
        4.2.2 ZGC-PEG-Biotin的穩(wěn)定性評(píng)價(jià)
        4.2.3 低分化pc-12細(xì)胞的培養(yǎng)
        4.2.4 低分化pc-12細(xì)胞的固定及預(yù)處理
        4.2.5 低分化pc-12細(xì)胞細(xì)胞表面糖鏈的檢測(cè)以及驗(yàn)證性實(shí)驗(yàn)
        4.2.6 不同分化階段pc-12細(xì)胞表面糖鏈的檢測(cè)
    4.3 結(jié)果與討論
        4.3.1 ZGC的功能化修飾與表征
        4.3.2 NGF處理不同時(shí)間后pc-12細(xì)胞的形態(tài)
        4.3.3 未經(jīng)NGF處理的pc-12 細(xì)胞表面糖鏈檢測(cè)和HRP-TMB顯色驗(yàn)證法
        4.3.4 NGF處理不同時(shí)間pc-12細(xì)胞表面糖鏈檢測(cè)
        4.3.5 NGF處理前后的pc-12細(xì)胞糖鏈的共聚焦顯微熒光成像
    4.4 本章小結(jié)
第5章 總結(jié)與展望
    5.1 總結(jié)
    5.2 展望
參考文獻(xiàn)
碩士期間科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
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[3]長(zhǎng)余輝發(fā)光材料研究進(jìn)展[J]. 孫繼兵,王海容,安雅琴,崔春翔,韓丹.  稀有金屬材料與工程. 2008(02)
[4]高溫固相法制備硅酸鹽長(zhǎng)余輝發(fā)光材料[J]. 姜洪義,徐博.  硅酸鹽學(xué)報(bào). 2006(09)
[5]水熱法合成SrAl2O4:Eu2+,Dy3+長(zhǎng)余輝材料[J]. 李東平,繆春燕.  江西化工. 2005(01)
[6]長(zhǎng)余輝發(fā)光材料研究進(jìn)展[J]. 羅昔賢,于晶杰,林廣旭,肖志強(qiáng),段錦霞,肖志國(guó).  發(fā)光學(xué)報(bào). 2002(05)
[7]溶膠─凝膠法及其在稀土發(fā)光材料合成中的應(yīng)用[J]. 林君,蘇鏘.  稀土. 1994(01)

碩士論文
[1]近紅外長(zhǎng)余輝納米探針在體外檢測(cè)腫瘤細(xì)胞中的應(yīng)用[D]. 李金磊.華僑大學(xué) 2015
[2]長(zhǎng)余輝發(fā)光材料的燃燒法制備及其發(fā)光性質(zhì)研究[D]. 常素玲.廣西大學(xué) 2006



本文編號(hào):3657193

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