氣管外傷、氣管狹窄、氣管腫瘤嚴重損傷正常通氣功能,引起組織缺氧,危及生命。氣管病變切除重建是治療這些疾病的最為有效的方法。但是,長段氣管切除重建,目前臨床仍無安全可靠的方法。組織工程氣管是有可能成為解決長段氣管缺損的可能方案。因此,氣管替代材料的研究,尋找合適的氣管替代材料,成為本領(lǐng)域研究的熱點問題�？梢哉f,組織工程氣管可以在結(jié)構(gòu)和功能上完整重建氣管,是最理想,也是最有應(yīng)用前景的氣管替代材料。同軸紡絲是以經(jīng)典紡絲為基礎(chǔ),通過雙層同軸電紡針頭,改進同軸電紡工藝后發(fā)展而來的新的電紡技術(shù)。同軸電紡的獨特結(jié)構(gòu),使能夠?qū)⒉灰穗娂彽乃幬锏葢?yīng)用于電紡,在生物、醫(yī)學、藥學等方面具前景巨大。同軸電紡組織工程材料的高微觀表面積促進種子細胞粘附,高孔隙率給種子細胞粘附提供足夠空間。聚己內(nèi)酯（Polycaprolactone,PCL）和膠原（collagen,Col）是兩種常用生物降解材料,在體內(nèi)有一定的降解率,隨著組織工程氣管細胞化進程,聚己內(nèi)酯和膠原逐漸降解。EGF能夠促進間質(zhì)和上皮粘附、增殖和分化等。EGF能夠促進肺泡I型上皮分化,增加肺泡表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A。移植物上皮轉(zhuǎn)化移植是制約移植成功的關(guān)鍵因... 

【文章頁數(shù)】：101 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
縮略語表
中文摘要
英文摘要
前言
文獻回顧
    1 氣管移植手術(shù)研究進展
        1.1 同種異體氣管移植
        1.2 自體組織替代氣管移植
        1.3 自體主動脈瓣氣管替代物移植
        1.4 人工氣管移植
    2 常見組織工程氣管支架
        2.1 同種脫細胞氣管支架
        2.2 小兒脫細胞同種異體氣管支架
        2.3 尸體來源的脫細胞氣管支架移植
        2.4 異種脫細胞氣管支架
        2.5 預(yù)血管化氣管支架
        2.6 POSS-PCU組織工程氣管支架
        2.7 3D打印氣管支架
    3 組織工程氣管種子細胞
        3.1 干細胞
        3.2 軟骨細胞
        3.3 氣管上皮細胞
        3.4 間充質(zhì)細胞
    4 組織工程氣管需解決的關(guān)鍵問題
        4.1 氣道上皮形成
        4.2 支架組織再血管化
        4.3 生物反應(yīng)器
        4.4 支架材料
            4.4.1 可降解材料
            4.4.2 膠原
            4.4.3 聚己內(nèi)酯
    5 靜電紡絲在組織工程氣管中的應(yīng)用
        5.1 靜電紡絲的發(fā)現(xiàn)
        5.2 靜電紡絲的現(xiàn)狀
        5.3 靜電紡絲的影響因素
        5.4 同軸電紡技術(shù)
    6 前期研究成果和展望
        6.1 前期成果
        6.2 研究基礎(chǔ)
        6.3 展望
第一部分 同軸電紡聚己內(nèi)酯/膠原納米纖維制備
    1 材料
        1.1 實驗試劑和耗材
        1.2 實驗設(shè)備
        1.3 種子細胞培養(yǎng)
    2 方法
        2.1 納米纖維制備
        2.2 表征觀察
        2.3 孔隙率測試檢測
        2.4 組織兼容性檢測
        2.5 細胞毒性檢測
    3 結(jié)果
        3.1 掃描電鏡觀察(SEM)
        3.2 孔隙率測試檢測
        3.3 同軸電紡不同膠原比例的納米纖維支架組織兼容性檢測
        3.4 同軸電紡不同膠原比例的納米纖維支架的hMSCs細胞毒性試驗
    4 討論
第二部分 EGF修飾同軸電紡聚己內(nèi)酯/膠原納米纖維氣管支架建立
    1 材料
        1.1 實驗試劑和耗材
        1.2 實驗設(shè)備
        1.3 種子細胞培養(yǎng)
    2 方法
        2.1 EGF修飾同軸電紡聚己內(nèi)酯/膠原納米纖維膜制備
        2.2 掃描電鏡觀察(SEM)
        2.3 孔隙率測試檢測
        2.4 EGF釋放實驗
        2.5 酶聯(lián)免疫吸附法檢測EGF濃度
    3 結(jié)果
        3.1 SEM觀察EGF修飾支架
        3.2 兩種支架的直徑比較
        3.3 孔隙率測試檢測
        3.4 EGF釋放實驗
    4 討論
第三部分 同軸電紡聚己內(nèi)酯/膠原納米纖維氣管支架機械性能
    1 材料
        1.1 實驗對象
        1.2 實驗試劑和耗材
        1.3 實驗設(shè)備
    2 方法
        2.1 水成角檢測
        2.2 力學檢測
        2.3 支架降解實驗
        2.4 SEM觀察同軸電紡PC納米纖維支架的降解實驗
    3 結(jié)果
        3.1 水成角檢測
        3.2 拉伸實驗
        3.3 支架降解實驗
        3.4 SEM觀察同軸電紡PC納米纖維支架的降解實驗
    4 討論
第四部分 EGF修飾同軸電紡聚己內(nèi)酯/膠原納米纖維氣管支架生物學性能
    1 材料
        1.1 實驗材料和耗材
        1.2 實驗對象
        1.3 種子細胞培養(yǎng)
        1.4 實驗設(shè)備
    2 方法
        2.1 骨髓間充質(zhì)干細胞種植
        2.2 EGF修飾同軸電紡納米纖維支架的hMSCs細胞粘附實驗
        2.3 SEM觀察EGF修飾同軸電紡納米纖維支架hMSCs細胞增殖
        2.4 EGF修飾同軸電紡納米纖維支架hMSCs細胞增殖實驗
        2.5 EGF修飾同軸電紡納米纖維支架的hMSCs細胞遷移檢測
    3 結(jié)果
        3.1 EGF修飾同軸電紡納米纖維支架的hMSCs細胞粘附實驗
        3.2 EGF修飾同軸電紡納米纖維支架的hMSCs細胞增殖實驗
        3.3 EGF修飾同軸電紡納米纖維支架的hMSCs細胞增殖實驗
        3.4 EGF修飾同軸電紡納米纖維支架材料中hMSCs細胞Transwell遷移情況
    4 討論
第五部分 EGF修飾同軸電紡聚己內(nèi)酯/膠原納米纖維氣管支架誘導上皮分化及機制
    1 材料
        1.1 實驗試劑和耗材
        1.2 實驗設(shè)備
        1.3 種子細胞培養(yǎng)
    2 方法
        2.1 免疫熒光檢測EGF修飾同軸電紡納米纖維支架促進hMSCs上皮樣分子表達
        2.2 同軸電紡支架材料上總蛋白的提取
        2.3 免疫印跡檢測EGF信號通路的激活與表達情況
        2.4 免疫印跡檢測EGF修飾同軸電紡納米纖維支架促進hMSCs上皮轉(zhuǎn)化
    3 結(jié)果
        3.1 激光共聚焦顯微鏡觀察hMSCs在EGF修飾支架上皮樣分子表達
        3.2 免疫印跡檢測EGF信號通路的激活與表達情況
        3.3 免疫印跡檢測EGF修飾同軸電紡納米纖維支架促進hMSCs上皮轉(zhuǎn)化
    4 討論
小結(jié)
參考文獻
個人簡歷和研究成果
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]新型復(fù)合型人工氣管移植實驗研究[J]. 劉文亮,肖鵬,梁恒星,安然,成剛,喻風雷.  中國修復(fù)重建外科雜志. 2013(03)



本文編號：3648257