雙緩釋PDGF-bb、BMP-6的nHA/Gel-GMS支架復(fù)合BMMSCs修復(fù)大鼠顱骨臨界骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究
發(fā)布時(shí)間:2022-02-25 05:55
目的:頜面部的骨組織損傷和缺損不僅會(huì)直接造成顏面部畸形而影響美觀,還會(huì)導(dǎo)致病患在發(fā)音、語(yǔ)言、咀嚼以及呼吸等方面出現(xiàn)一定程度的功能障礙。目前,臨床治療當(dāng)中所采用的自體或異體組織移植雖有較好療效,但卻仍舊存在不可忽視的弊端。因此,骨組織工程的提出為解決這一臨床問(wèn)題提供了新的思路。骨組織工程學(xué)是將組織修復(fù)材料和具有生物活性的物質(zhì)進(jìn)行結(jié)合,借由生物因子等發(fā)揮作用來(lái)促使骨組織修復(fù)。目前,骨組織工程己逐漸發(fā)展成為通過(guò)對(duì)細(xì)胞支架材料與生物活性因子聯(lián)合使用,促進(jìn)骨組織的修復(fù)、再生,最終使缺損的骨組織得以修復(fù)或重建。此種方法的優(yōu)點(diǎn)在于不受限于供體的來(lái)源,不具有免疫排斥問(wèn)題,修復(fù)重建后的組織可以替代原有組織,并具有較為理想的功能。納米羥基磷灰石(nHA)晶體的粒徑處于1-100nm范圍內(nèi),具有良好的表面能與量子效應(yīng),且在降解性和生物活性方面亦性能優(yōu)良,更加易于和骨組織發(fā)生整合,加強(qiáng)骨的機(jī)械性能與骨傳導(dǎo)特性。以nHA晶粒植入機(jī)體內(nèi)部不會(huì)對(duì)機(jī)體造成病理性損害,并且能夠通過(guò)相互連通的孔隙來(lái)促進(jìn)組織液微循環(huán),從而促使新生骨質(zhì)與周圍組織發(fā)生結(jié)合。明膠(Gel)來(lái)自于生物體的本身,是膠原在發(fā)生了部分水解后所產(chǎn)生的變性...
【文章來(lái)源】:中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:112 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
第一部分 納米羥基磷灰石/明膠-明膠微球支架的構(gòu)建及其理化性質(zhì)
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要試劑和儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 GMS與 nHA/Gel-GMS支架的形態(tài)、結(jié)構(gòu)觀察
3.2 支架的孔隙率與孔徑測(cè)定
3.3 支架的吸水率測(cè)定
3.4 支架的壓縮強(qiáng)度測(cè)定
3.5 支架的降解率分析
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 nHA/Gel-GMS支架的體外細(xì)胞相容性及體內(nèi)生物安全性檢測(cè)
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要試劑和儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 大鼠BMMSCs的體外分離培養(yǎng)
3.2 大鼠BMMSCs的表面標(biāo)志物鑒定
3.3 大鼠BMMSCs的成骨誘導(dǎo)分化鑒定
3.4 大鼠BMMSCs的成脂誘導(dǎo)分化鑒定
3.5 nHA/Gel-GMS支架的體外細(xì)胞相容性檢測(cè)
3.5.1 體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)
3.5.2 接種于支架的BMMSCs黏附率測(cè)定
3.5.3 接種于支架的BMMSCs增殖情況
3.5.4 細(xì)胞-支架復(fù)合體的掃描電鏡觀察
3.5.5 LSCM觀察支架內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)情況
3.6 nHA/Gel-GMS支架的體內(nèi)生物安全性檢測(cè)
3.6.1 溶血試驗(yàn)
3.6.2 皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)
3.6.3 熱原試驗(yàn)
3.6.4 急性全身毒性試驗(yàn)
3.6.5 植入局部反應(yīng)試驗(yàn)
3.6.6 亞慢性全身毒性試驗(yàn)
4 討論
5 結(jié)論
第三部分 PDGF、BMP-6/nHA/Gel-GMS支架體外促成骨及修復(fù)顱骨臨界性骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要試劑和儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 載因子支架中PDGF、BMP-6 的體外釋放情況
3.2 細(xì)胞接種支架后體外成骨效果及相關(guān)蛋白表達(dá)
3.3 大鼠臨界骨缺損模型的建立
3.4 術(shù)后影像學(xué)檢測(cè)分析
3.5 術(shù)后組織學(xué)檢測(cè)
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述 骨組織工程研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片復(fù)合自體髂骨移植修復(fù)牙槽嵴裂[J]. 沈悅,馬海英,張彥升,王娟,時(shí)炳正. 中國(guó)組織工程研究. 2014(50)
[2]骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法及生物學(xué)特性鑒定[J]. 吳玉瓊,江凌勇,張鵬,代慶剛,房兵. 中國(guó)口腔頜面外科雜志. 2013(01)
[3]納米羥基磷灰石及其復(fù)合材料技術(shù)進(jìn)展[J]. 殷憲國(guó). 硫磷設(shè)計(jì)與粉體工程. 2012(02)
[4]可注射性殼聚糖基溫敏性凝膠的制備及其生物相容性[J]. 閆繼紅,孫海梅,尚宏偉,張立新,路欣. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(05)
[5]膠原及明膠基天然高分子復(fù)合材料研究進(jìn)展[J]. 裴瑩,鄭學(xué)晶,湯克勇. 高分子通報(bào). 2010(02)
[6]乳酸-羥基乙酸共聚物納米粒的研究進(jìn)展[J]. 凌友,黃岳山,梁常艷. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(10)
[7]羥基磷灰石/殼聚糖生物復(fù)合材料的制備研究進(jìn)展[J]. 徐挺,何狄,周銀銀,汪濤. 生物骨科材料與臨床研究. 2008(01)
[8]作為細(xì)胞微載體的明膠基緩釋微球的制備[J]. 王憶娟,劉守信,房喻,黃沙,金巖,姜宇. 高等學(xué);瘜W(xué)學(xué)報(bào). 2007(09)
[9]膠原-殼聚糖復(fù)合材料的制備及生物安全性檢測(cè)[J]. 邱長(zhǎng)虹,翟弘峰,姜華,史弘道. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2007(18)
[10]纖維蛋白粘合劑與羥基磷灰石復(fù)合人工骨的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 田衛(wèi)東,李聲偉,鄧楠,鄭曉輝,陳偉輝. 中國(guó)口腔種植學(xué)雜志. 1998(04)
本文編號(hào):3643823
【文章來(lái)源】:中國(guó)醫(yī)科大學(xué)遼寧省
【文章頁(yè)數(shù)】:112 頁(yè)
【學(xué)位級(jí)別】:博士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
第一部分 納米羥基磷灰石/明膠-明膠微球支架的構(gòu)建及其理化性質(zhì)
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要試劑和儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 GMS與 nHA/Gel-GMS支架的形態(tài)、結(jié)構(gòu)觀察
3.2 支架的孔隙率與孔徑測(cè)定
3.3 支架的吸水率測(cè)定
3.4 支架的壓縮強(qiáng)度測(cè)定
3.5 支架的降解率分析
4 討論
5 結(jié)論
第二部分 nHA/Gel-GMS支架的體外細(xì)胞相容性及體內(nèi)生物安全性檢測(cè)
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要試劑和儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 大鼠BMMSCs的體外分離培養(yǎng)
3.2 大鼠BMMSCs的表面標(biāo)志物鑒定
3.3 大鼠BMMSCs的成骨誘導(dǎo)分化鑒定
3.4 大鼠BMMSCs的成脂誘導(dǎo)分化鑒定
3.5 nHA/Gel-GMS支架的體外細(xì)胞相容性檢測(cè)
3.5.1 體外細(xì)胞毒性試驗(yàn)
3.5.2 接種于支架的BMMSCs黏附率測(cè)定
3.5.3 接種于支架的BMMSCs增殖情況
3.5.4 細(xì)胞-支架復(fù)合體的掃描電鏡觀察
3.5.5 LSCM觀察支架內(nèi)細(xì)胞生長(zhǎng)情況
3.6 nHA/Gel-GMS支架的體內(nèi)生物安全性檢測(cè)
3.6.1 溶血試驗(yàn)
3.6.2 皮內(nèi)反應(yīng)試驗(yàn)
3.6.3 熱原試驗(yàn)
3.6.4 急性全身毒性試驗(yàn)
3.6.5 植入局部反應(yīng)試驗(yàn)
3.6.6 亞慢性全身毒性試驗(yàn)
4 討論
5 結(jié)論
第三部分 PDGF、BMP-6/nHA/Gel-GMS支架體外促成骨及修復(fù)顱骨臨界性骨缺損的實(shí)驗(yàn)研究
1 前言
2 材料和方法
2.1 主要試劑和儀器
2.2 實(shí)驗(yàn)方法
3 結(jié)果
3.1 載因子支架中PDGF、BMP-6 的體外釋放情況
3.2 細(xì)胞接種支架后體外成骨效果及相關(guān)蛋白表達(dá)
3.3 大鼠臨界骨缺損模型的建立
3.4 術(shù)后影像學(xué)檢測(cè)分析
3.5 術(shù)后組織學(xué)檢測(cè)
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述 骨組織工程研究進(jìn)展
參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)歷
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞膜片復(fù)合自體髂骨移植修復(fù)牙槽嵴裂[J]. 沈悅,馬海英,張彥升,王娟,時(shí)炳正. 中國(guó)組織工程研究. 2014(50)
[2]骨質(zhì)疏松大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞的培養(yǎng)方法及生物學(xué)特性鑒定[J]. 吳玉瓊,江凌勇,張鵬,代慶剛,房兵. 中國(guó)口腔頜面外科雜志. 2013(01)
[3]納米羥基磷灰石及其復(fù)合材料技術(shù)進(jìn)展[J]. 殷憲國(guó). 硫磷設(shè)計(jì)與粉體工程. 2012(02)
[4]可注射性殼聚糖基溫敏性凝膠的制備及其生物相容性[J]. 閆繼紅,孫海梅,尚宏偉,張立新,路欣. 吉林農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(05)
[5]膠原及明膠基天然高分子復(fù)合材料研究進(jìn)展[J]. 裴瑩,鄭學(xué)晶,湯克勇. 高分子通報(bào). 2010(02)
[6]乳酸-羥基乙酸共聚物納米粒的研究進(jìn)展[J]. 凌友,黃岳山,梁常艷. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(10)
[7]羥基磷灰石/殼聚糖生物復(fù)合材料的制備研究進(jìn)展[J]. 徐挺,何狄,周銀銀,汪濤. 生物骨科材料與臨床研究. 2008(01)
[8]作為細(xì)胞微載體的明膠基緩釋微球的制備[J]. 王憶娟,劉守信,房喻,黃沙,金巖,姜宇. 高等學(xué);瘜W(xué)學(xué)報(bào). 2007(09)
[9]膠原-殼聚糖復(fù)合材料的制備及生物安全性檢測(cè)[J]. 邱長(zhǎng)虹,翟弘峰,姜華,史弘道. 中國(guó)組織工程研究與臨床康復(fù). 2007(18)
[10]纖維蛋白粘合劑與羥基磷灰石復(fù)合人工骨的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 田衛(wèi)東,李聲偉,鄧楠,鄭曉輝,陳偉輝. 中國(guó)口腔種植學(xué)雜志. 1998(04)
本文編號(hào):3643823
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