本文關(guān)鍵詞：兩種殼聚糖衍生物在轉(zhuǎn)基因領(lǐng)域的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：殼聚糖（chitosan）是一種有著良好生物相容性、生物可降解性的天然多糖，由于其分子帶有正電性，殼聚糖作為轉(zhuǎn)基因載體的潛力令人矚目。本課題根據(jù)殼聚糖的優(yōu)良性質(zhì)合成了兩種殼聚糖衍生物，并對其進(jìn)行了理化性質(zhì)表征與轉(zhuǎn)基因效率的研究。 使用縮水甘油基三甲基氯化銨（Glycidyl TrimethylAmmonium Chloride, GTMAC）與殼聚糖反應(yīng)，合成了三種不同季銨根取代度（12.4%,28.1%,43.7%）的N-（2-羥丙基三甲基）殼聚糖（N-(2-hydroxy)propyl-3-trimethyl ammonium chitosan chloride,HTCC），，并對HTCC進(jìn)行了1H NMR、FT-IR、X射線衍射以及熱重分析測試。HTCC比殼聚糖的結(jié)晶性能和熱穩(wěn)定性均有降低。HTCC樣品在溶液中能自發(fā)地包覆熒光素酶質(zhì)粒（pGL3）形成微球。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)的結(jié)果顯示三種HTCC樣品的細(xì)胞毒性均遠(yuǎn)小于聚乙烯亞胺。在以Hela細(xì)胞為對象的體外轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中，HTCC樣品表現(xiàn)出比殼聚糖更高的轉(zhuǎn)基因效率。HTCC的這些特點(diǎn)顯示其發(fā)展成為一種新型安全高效的非病毒轉(zhuǎn)基因載體的潛質(zhì)。 以殼聚糖、乳糖酸、GTMAC為原料，先后將乳糖酸和GTMAC通過共價(jià)鍵結(jié)合到殼聚糖的自由氨基上，得到半乳糖基化度13.7%，季銨根取代度30.8%的雙功能修飾的肝靶向殼聚糖衍生物（gal-HTCC），繼而對其進(jìn)行了1H NMR、FT-IR、元素分析、X射線衍射的測試。與殼聚糖相比，gal-HTCC的水溶性大為增加。gal-HTCC樣品亦能在溶液中自發(fā)地包覆熒光素酶質(zhì)粒（pGL3）形成微球。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示gal-HTCC樣品的毒性亦遠(yuǎn)低于聚乙烯亞胺。在以HepG2細(xì)胞為對象的體外轉(zhuǎn)基因?qū)嶒?yàn)中，gal-HTCC樣品表現(xiàn)出比殼聚糖與gal-chitosan更高的轉(zhuǎn)基因效率。gal-HTCC的這些特點(diǎn)顯示其發(fā)展成為安全高效，且具有靶向性的非病毒轉(zhuǎn)基因載體的潛力。
【關(guān)鍵詞】：殼聚糖 轉(zhuǎn)基因 季銨化 半乳糖基化 肝靶向性
【學(xué)位授予單位】：華中科技大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 摘要4-5
• Abstract5-8
• 第一章 緒論8-19
• 1.1 基因治療的概述8-12
• 1.2 殼聚糖的概述12-14
• 1.3 殼聚糖及其衍生物用于轉(zhuǎn)基因14-17
• 1.4 課題的意義17-19
• 第二章 季銨根修飾殼聚糖衍生物的轉(zhuǎn)基因效率研究19-35
• 2.1 前言19-20
• 2.2 材料與儀器20-21
• 2.3 實(shí)驗(yàn)方法21-26
• 2.4 結(jié)果與分析26-33
• 2.5 本章小結(jié)33-35
• 第三章 肝靶向性雙功能修飾殼聚糖衍生物的轉(zhuǎn)基因效率研究35-48
• 3.1 前言35-36
• 3.2 材料與儀器36-37
• 3.3 實(shí)驗(yàn)方法37-40
• 3.4 結(jié)果與分析40-46
• 3.5 本章小結(jié)46-48
• 第四章 全文總結(jié)48-50
• 4.1 結(jié)論48-49
• 4.2 創(chuàng)新點(diǎn)49
• 4.3 問題與展望49-50
• 致謝50-51
• 參考文獻(xiàn)51-56
• 附錄 1 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文56-57
• 附錄 2 主要符號和縮略詞表57

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

1 朱敦皖;張海玲;柏金根;劉文廣;冷希崗;宋存先;楊健;李曉衛(wèi);金旭;宋麗萍;劉蘭霞;李秀蘭;張楊;姚康德;;精氨酸修飾殼聚糖提高基因轉(zhuǎn)染效率的研究[J];科學(xué)通報(bào);2007年18期

2 田華;田有勇;孫圣剛;;帕金森病基因治療研究現(xiàn)狀[J];臨床內(nèi)科雜志;2007年06期

3 趙穎;楊琰;盧實(shí);張紅菱;;殼聚糖脫乙酰度兩種測定方法的比較[J];武漢工業(yè)學(xué)院學(xué)報(bào);2009年02期

4 吳清凌;饒劍輝;周雪平;;甲殼素纖維發(fā)展歷史及研究現(xiàn)狀[J];中國纖檢;2010年21期

5 張陽德 ,孫穎;一種新型的非病毒基因轉(zhuǎn)運(yùn)載體——納米粒基因轉(zhuǎn)運(yùn)體[J];中國現(xiàn)代醫(yī)學(xué)雜志;2003年21期

  本文關(guān)鍵詞：兩種殼聚糖衍生物在轉(zhuǎn)基因領(lǐng)域的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：363815