發(fā)布時(shí)間：2017-05-13 19:09

  本文關(guān)鍵詞：腫瘤靶向和環(huán)境響應(yīng)性多臂聚合物膠束的研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：化療是目前治療腫瘤的重要方法之一,可以在一定程度抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng),但治療時(shí)給患者帶來(lái)了很大的毒副作用。眾多研究者為提高藥物的生物利用度和降低藥物的毒副作用進(jìn)行了廣泛的研究,其中聚合物膠束是一種有效方法。在納米尺寸的膠束上接枝的靶向基團(tuán)使抗癌藥物能被運(yùn)輸?shù)讲∽儾课?從而提高病變部位的有效藥物濃度,減少用藥量,降低藥物對(duì)正常組織的毒性。納米膠束在體內(nèi)有長(zhǎng)循環(huán)、隱形等特點(diǎn),有利于增加藥物的靶向性。本文旨在合成接枝葉酸基團(tuán)、氧化還原敏感鍵等的多臂聚合物,構(gòu)建載抗腫瘤藥物與基因藥物的聚合物膠束,并對(duì)其特性及生物學(xué)性能進(jìn)行評(píng)價(jià)。 首先,本論文成功地合成了含葉酸(FA)靶向基團(tuán)、氧化還原敏感鍵的載藥多臂聚合物。FA共價(jià)接枝于兩親性聚合物親水端,可改變多臂聚合物上的接枝數(shù)量；抗腫瘤藥物羥基喜樹堿(CPT)通過(guò)二硫鍵接枝于聚合物的疏水端,可在谷胱甘肽(GSH)的作用下敏感地釋放藥物。采用溶劑揮發(fā)法制備制備四種載藥聚合物膠束,平均粒徑在100nm左右,臨界膠束濃度(CMC)在0.8-2.5μg/ml之間。在GSH作用下膠束的粒徑迅速增加達(dá)到數(shù)百納米,同時(shí)二硫鍵斷裂引起CPT的快速釋放。相比直鏈聚合物膠束,多臂聚合物膠束具有更低的CMC和更高的氧化還原敏感性。不同數(shù)量的親水鏈段接枝靶向基團(tuán)FA,導(dǎo)致膠束表面FA密度不同,影響到膠束的細(xì)胞吞噬量。結(jié)果表明,在多臂兩親嵌段聚合物中有兩臂接枝FA、另外兩臂接枝CPT時(shí),聚合物膠束的IC50(1.49μg/ml)最低,細(xì)胞凋亡比例最高達(dá)到84.8%。以上結(jié)果表明多臂聚合物的組成和臂的結(jié)構(gòu)的改變能顯著影響膠束的性能,通過(guò)改變多臂兩親嵌段聚合物中靶向基團(tuán)和抗腫瘤藥物的接枝數(shù)量,可達(dá)到最佳的抗腫瘤效果。 其次,本論文成功地合成了含靶向基團(tuán)FA、酸度敏感烏頭酸鍵和氧化還原敏感二硫鍵的多臂聚乙二醇-聚天冬氨酸-2-乙基三氨-喜樹堿載藥聚合物,CPT的含量達(dá)到9.3%。采用超聲法成功制備了聚合物膠束,臨界結(jié)束濃度分別是0.89μg/ml,平均粒徑為126nm, Zeta電位為+11.7mV。該膠束在N/P低于10時(shí)能完全結(jié)合腫瘤壞死因子(TNF)質(zhì)粒,獲得同時(shí)攜載抗腫瘤藥物和質(zhì)粒DNA的聚合物膠束,在N/P為15時(shí),粒徑最小(115nm)。肝素置換和脫氧核糖核苷酸酶降解實(shí)驗(yàn)表明,聚合物膠束對(duì)TNF質(zhì)粒有較強(qiáng)的結(jié)合能力和保護(hù)作用。載藥膠束在10mM的GSH和pH5.0的環(huán)境下,粒徑增大且穩(wěn)定性降低,并且快速釋放出CPT及TNF質(zhì)粒,實(shí)現(xiàn)了抗腫瘤藥物和基因在細(xì)胞吞噬過(guò)程中控制釋放的目的。流式細(xì)胞儀結(jié)果表明,該膠束成功地介導(dǎo)CPT和TNF質(zhì)粒進(jìn)入細(xì)胞中。體外轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)表明,膠束表面的葉酸介導(dǎo)了細(xì)胞的內(nèi)吞作用,提高了質(zhì)粒的轉(zhuǎn)染效率,CPT和TNF的協(xié)同作用可以在低的N/P條件下實(shí)現(xiàn)TNF質(zhì)粒的高表達(dá)。細(xì)胞的毒性和凋亡結(jié)果表明該膠束具有良好的抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)效果,并且CPT和TNF聯(lián)合使用進(jìn)一步增強(qiáng)了對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用。
【關(guān)鍵詞】：聚合物膠束 多臂聚合物、葉酸靶向 氧化還原敏感 pH敏感 基因載體 協(xié)同作用
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R730.53;R318.08
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-13
• 第1章 緒論13-28
• 1.1 聚合物膠束13-16
• 1.1.1 高分子藥物載體系統(tǒng)概述13
• 1.1.2 聚合物納米膠束性質(zhì)13-15
• 1.1.3 聚合物膠束的應(yīng)用15-16
• 1.2 環(huán)境響應(yīng)型高分子藥物載體16-22
• 1.2.1 溫敏型高分子藥物載體17-18
• 1.2.2 分子響應(yīng)型高分子藥物載體18
• 1.2.3 光敏型高分子藥物載體18-19
• 1.2.4 pH敏型高分子藥物載體19-20
• 1.2.5 氧化還原敏感型藥物載體20-22
• 1.3 藥物聯(lián)用22-25
• 1.3.1 化療藥物的聯(lián)用22-23
• 1.3.2 抗癌藥物和基因聯(lián)合治療23-25
• 1.4 本課題的研究?jī)?nèi)容及創(chuàng)新點(diǎn)25-28
• 1.4.1 課題的研究意義及內(nèi)容25-26
• 1.4.2 課題的創(chuàng)新點(diǎn)26-28
• 第2章 葉酸靶向和氧化還原敏感多臂聚合物膠束的研究28-48
• 2.1 實(shí)驗(yàn)部分28-34
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)材料28
• 2.1.2 葉酸靶向和還原敏性感性兩親嵌段共聚物的合成28-31
• 2.1.3 聚合物膠束的制備31
• 2.1.4 臨界膠束濃度的測(cè)定31-32
• 2.1.5 膠束的粒徑和zeta電位的表征32
• 2.1.6 膠束形貌的觀察32
• 2.1.7 膠束氧化還原銘感性能的表征32
• 2.1.8 膠束體外藥物釋放行為的表征32-33
• 2.1.9 載藥膠束的細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)33
• 2.1.10 載藥膠束的細(xì)胞吞噬實(shí)驗(yàn)33-34
• 2.1.11 載藥膠束的細(xì)胞凋亡實(shí)驗(yàn)34
• 2.2 結(jié)果與討論34-46
• 2.2.1 兩親嵌段共聚物的合成路線圖34-35
• 2.2.2 聚合物的核磁表征35-38
• 2.2.3 聚合物膠束的表征38-41
• 2.2.4 膠束的還原敏感性41-42
• 2.2.5 膠束體外藥物的釋放42-43
• 2.2.6 膠束的細(xì)胞吞噬43-44
• 2.2.7 膠束的細(xì)胞毒性44-45
• 2.2.8 膠束的細(xì)胞凋亡45-46
• 2.3 本章小結(jié)46-48
• 第3章 葉酸靶向雙敏感型攜載抗腫瘤藥物和質(zhì)粒膠束的制備及表征48-66
• 3.1 實(shí)驗(yàn)部分49-55
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)材料49-50
• 3.1.2 葉酸靶向雙敏感型載藥聚合物的合成50-52
• 3.1.3 聚合物膠束的制備52
• 3.1.4 聚合物/質(zhì)粒PNF-α復(fù)合物的結(jié)合滯留分析52-53
• 3.1.5 臨界膠束濃度的測(cè)定53
• 3.1.6 膠束的粒徑和Zeta電位的表征53
• 3.1.7 膠束形貌的觀察53
• 3.1.8 酶保護(hù)實(shí)驗(yàn)53
• 3.1.9 肝素鈉置換實(shí)驗(yàn)53-54
• 3.1.10 膠束體外敏感性裂解能力的測(cè)定54
• 3.1.11 膠束體外藥物的敏感性釋放54-55
• 3.2 結(jié)果與討論55-64
• 3.2.1 兩親嵌段共聚物的合成路線圖55
• 3.2.2 聚合物的核磁表征55-58
• 3.2.3 FP-CPT/TNF復(fù)合物的結(jié)合滯留58-59
• 3.2.4 FP-CPT聚合物膠束的臨界膠束濃度59-60
• 3.2.5 膠束的粒徑分布、Zeta電位及形貌60-61
• 3.2.6 肝素鈉置換和酶保護(hù)61-62
• 3.2.7 膠束體外敏感性裂解的能力62-63
• 3.2.8 膠束體外藥物的釋放63-64
• 3.3 本章小結(jié)64-66
• 第4章 葉酸靶向雙敏感型攜載抗腫瘤藥物和質(zhì)粒膠束的細(xì)胞研究66-75
• 4.1 實(shí)驗(yàn)部分66-68
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)材料66-67
• 4.1.2 細(xì)胞對(duì)膠束的吞噬和傳遞67
• 4.1.3 體外轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)67
• 4.1.4 細(xì)胞毒性的檢測(cè)67-68
• 4.1.5 細(xì)胞凋亡的檢測(cè)68
• 4.2 結(jié)果與討論68-73
• 4.2.1 膠束的細(xì)胞內(nèi)吞的實(shí)驗(yàn)68-69
• 4.2.2 體外轉(zhuǎn)染實(shí)驗(yàn)69-71
• 4.2.3 膠束的細(xì)胞的毒性71-72
• 4.2.4 流式細(xì)胞儀對(duì)膠束細(xì)胞凋亡的檢測(cè)72-73
• 4.3 本章小結(jié)73-75
• 全文總結(jié)75-77
• 致謝77-78
• 攻讀碩士學(xué)位期間發(fā)表的論文78-80
• 參考文獻(xiàn)80-85

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

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  本文關(guān)鍵詞：腫瘤靶向和環(huán)境響應(yīng)性多臂聚合物膠束的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：363372