【目的】探討軟骨細胞外基質支架制備工藝的改進以及其優(yōu)越性。【方法】（1）應用目前的勻漿-脫細胞方法制作軟骨細胞外基質（extracellular matrix,ECM）粉末,在此基礎上使用高速研磨儀通過反復冷凍研磨,最后經過顆粒篩選獲得更加細膩的粉末,我們稱其為改良ECM粉末（fine extracellular matrix,FECM）。（2）將ECM粉末和FECM粉末分別以10%（w/v）濃度通過冷凍干燥法制成ECM支架和FECM支架。（3）分別對ECM支架和FECM支架進行大體觀察,掃描電鏡（SEM）檢測其微觀結構,并測量其孔徑。（4）對兩種支架進行DAPI染色觀察脫細胞情況,孔隙率及吸水率測定、CCK-8細胞毒性實驗等相關檢測。（5）在兩種支架上分別接種第3代骨髓間充質干細胞（BMSCs）,分別計算細胞接種率和粘附率。（6）將ECM支架和FECM支架分別作為對照組和實驗組。并應用聚乳酸聚羥基乙酸聚合物（PLGA）支架為陽性對照組。取等量第3代骨髓間充質干細胞（BMSCs）種植于ECM支架和FECM支架,同時將等量經過成軟骨誘導的BMSCs種植于PLGA支架,然后將三種細胞-支架... 

【文章來源】：南京醫(yī)科大學江蘇省

【文章頁數(shù)】：67 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

ECM支架和FECM支架的大體觀察和掃描電鏡觀察（×50倍）

圖 2. 未脫細胞軟骨組織和兩種支架的 DAPI 染色（×40 倍）。A 為未脫細胞軟骨組織 DAPI 染色，B 為未脫細胞 ECM 支架 DAPI 染色，C 為 FECM 支架 DAPI染色。表 1. 兩種支架的孔徑大小、吸水率以及孔隙率（n=8）

南京醫(yī)科大學碩士學位論文圖 2. 未脫細胞軟骨組織和兩種支架的 DAPI 染色（×40 倍）。A 為未脫細胞軟骨組織 DAPI 染色，B 為未脫細胞 ECM 支架 DAPI 染色，C 為 FECM 支架 DAPI染色。表 1. 兩種支架的孔徑大小、吸水率以及孔隙率（n=8）

【參考文獻】：
期刊論文
[1]軟骨PLGA-Ⅱ型膠原支架復合體修復兔膝關節(jié)骨軟骨損傷[J]. 黃彰,王雙利,潘政軍,江華,熊高鑫,李劼若,侯輝歌.  臨床骨科雜志. 2016(01)
[2]制備軟骨組織工程支架的材料和方法[J]. 貴浩然,李澎,張衛(wèi)國.  中國組織工程研究. 2013(03)
[3]軟骨組織工程中支架材料的文獻回顧[J]. 吳軍成,霍然,呂仁榮.  中國組織工程研究. 2012(03)
[4]關節(jié)鏡下應用“微骨折”方法修復關節(jié)軟骨缺損[J]. 張遠金,段軍,柯雯曇,張欣.  中國骨傷. 2006(07)
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本文編號：3630740