研究背景:骨作為一種器官具有顯著的再生特性,然而,骨的再生是細(xì)胞、血管基質(zhì)和生長因子共同作用的復(fù)雜結(jié)果。骨組織工程包括合適的種子細(xì)胞、可降解的支架材料以及生長因子三個要素。其最新研究表明,由外泌體（exosomes,EXOs）、脂肪干細(xì)胞（adipose-derived stem cells,ADSCs）及絲素-殼聚糖三維支架（Silk fibroin-chitosan 3D scaffold,SF-CS）構(gòu)成的復(fù)合物有望為解決臨床骨缺損的修復(fù)提供新的思路。目的:驗證絲素-殼聚糖三維多孔支架與脂肪干細(xì)胞體外構(gòu)建細(xì)胞-支架復(fù)合物的可行性,探究成骨分化脂肪干細(xì)胞來源的外泌體對脂肪干細(xì)胞-絲素/殼聚糖三維支架（ADSCs-SF/CS）復(fù)合物成骨效應(yīng)的影響。方法:1、提取人脂肪干細(xì)胞,進(jìn)行體外分離培養(yǎng)及鑒定。2、制備絲素-殼聚糖三維多孔支架。3、對脂肪干細(xì)胞進(jìn)行成骨誘導(dǎo)培養(yǎng),超速離心法提取細(xì)胞上清液中的外泌體。4、制備ADSCs-SF/CS復(fù)合物,掃描電鏡下觀察細(xì)胞-支架復(fù)合物的外觀和內(nèi)部結(jié)構(gòu)。5、將ADSCs-SF/CS復(fù)合物分為普通培養(yǎng)液組、成骨誘導(dǎo)液組、普通培養(yǎng)液加外泌體組、成骨誘導(dǎo)液加... 

【文章來源】：中國醫(yī)科大學(xué)遼寧省

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

提取的脂肪干細(xì)胞倒置顯微觀察照片（x100）

中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文3 實驗結(jié)果3.1ADSCs 的形態(tài)學(xué)觀察倒置顯微鏡下可見剛提取的脂肪干細(xì)胞呈圓形或橢圓形懸浮于培養(yǎng)液1a）；24h 左右即可全部貼壁，初期細(xì)胞體積較小，成紡錘形或梭形，排列雜（圖 1b）；72h 細(xì)胞體積逐漸增大呈梭形（圖 1c）；120h 梭形細(xì)胞大量增殖融合呈漩渦狀或平行緊密排列（圖 1d）。a b

3.1ADSCs 的形態(tài)學(xué)觀察倒置顯微鏡下可見剛提取的脂肪干細(xì)胞呈圓形或橢圓形懸浮于培養(yǎng)液1a）；24h 左右即可全部貼壁，初期細(xì)胞體積較小，成紡錘形或梭形，排列雜（圖 1b）；72h 細(xì)胞體積逐漸增大呈梭形（圖 1c）；120h 梭形細(xì)胞大量增殖融合呈漩渦狀或平行緊密排列（圖 1d）。圖 1a 提取的脂肪干細(xì)胞倒置顯微觀察照片（x100）圖 1b 脂肪干細(xì)胞培養(yǎng) 1 天倒置顯微鏡觀察照片（x100）a bc d

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]間充質(zhì)干細(xì)胞的來源及臨床應(yīng)用[J]. 吳清法,王立生,吳祖澤.  軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院院刊. 2002(03)



本文編號：3626366