新型磷酸鈣復合骨水泥對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞生物相容性及成骨分化的研究
發(fā)布時間：2022-01-13 19:54
目的:研究新型磷酸鈣復合骨水泥（磷酸鈣骨水泥/骨基質(zhì)明膠、磷酸鈣骨水泥/骨基質(zhì)明膠+聚乳酸-羥基乙酸共聚物空白微球）對大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞（Bone mesenchymal stem cell,BMSCs）的體外骨誘導活性及細胞毒性。以期獲得一種適合骨缺損修復的新型人工復合骨水泥,尤其能夠作為骨質(zhì)疏松壓縮性骨折的骨修復材料。方法:1.通過W/O/W微球制備法自制聚乳酸-羥基乙酸共聚物空白微球（PLGA空白微球）,稱重分裝并紫外線滅菌備用,按特定比例加入復合骨水泥;采用Urist等方法利用兔四肢長骨干經(jīng)粉碎、脫脂脫鈣等處理后制得骨基質(zhì)明膠骨粉（BMG）,將骨基質(zhì)明膠骨粉稱重分裝并環(huán)氧乙烷滅菌備用。2.依據(jù)前期實驗結(jié)果,在磷酸鈣骨水泥（CPC）與骨基質(zhì)明膠骨粉按5:1混合的基礎(chǔ)上再按總重量的5%加入PLGA空白微球,再與固化液均勻攪拌,注射進預制的塑料模具制成圓柱狀的新型磷酸鈣復合骨水泥,同理制得單純的CPC組、及不含微球的復合骨水泥組,并通過完全培養(yǎng)基的浸泡后制成三組材料的浸提液。3.選用3周齡左右體重在80-100g的SD大鼠,在分離大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞時采用全骨髓貼壁培養(yǎng)法,通過三次...
【文章來源】：西南醫(yī)科大學四川省
【文章頁數(shù)】：62 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
瑞邦骨肽及塑料模具ABC
圖 2 制備的實驗原材料及復合骨水泥Figure 2 The raw material and different kinds of artificial composite calcium phosphate bonecement.A 為經(jīng)過環(huán)氧乙烷滅菌處理的骨基質(zhì)明膠，呈現(xiàn)淡黃色；B 是經(jīng) W/O/W 微球制備法自制的 PLGA 空白微球，呈白色粉末狀；C 脫模后的圓柱狀各型骨水泥。4 主要試劑盒堿性磷酸酶測定試劑盒（南京建成生物制品公司）、CCK8 細胞毒性增殖試劑盒（500T，東仁化學生物制品公司）、茜素紅染液（sigma 公司）5 實驗方法5.1 實驗組各型骨水泥浸提液的制備由于骨水泥不能溶于水，對后期相關(guān)指標的測量帶來障礙，故浸提液
結(jié) 果. 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞生長情況原代骨髓間充質(zhì)干細胞一般在接種后數(shù)小時后便開始貼壁，形態(tài)尚不均一，可呈紡錘形、梭形甚至多角形。接種后 2-3 天換液一次，換液過程使用1%的PBS液沖洗3次，此過程也可不斷純化骨髓間充質(zhì)干細胞將一些無貼壁性質(zhì)的骨髓細胞除去，通常原代細胞生長緩慢。經(jīng)傳代后的骨髓間充質(zhì)干細胞生長活躍，5-7 天即可鋪滿瓶底，多為長梭形，形態(tài)均一，細胞團可呈旋渦狀生長，實驗所用即是 P3 代細胞（見圖 3）
【參考文獻】：
期刊論文
[1]我國近5年來骨質(zhì)疏松癥流行病學研究現(xiàn)狀[J]. 白璧輝,謝興文,李鼎鵬,許偉,李寧,潘鑫戊. 中國骨質(zhì)疏松雜志. 2018(02)
[2]骨質(zhì)疏松性椎體壓縮性骨折研究進展[J]. 居正燁,陳圣寶,張長青. 國際骨科學雜志. 2018(01)
[3]載萬古霉素磷酸鈣骨水泥一期植入治療慢性骨髓炎的療效觀察[J]. 郎志剛,袁峰,梁玉祥,喻杉. 華西醫(yī)學. 2017(12)
[4]γ-聚谷氨酸/殼聚糖復合磷酸鈣骨水泥制備、表征及性能[J]. 疏秀林,施慶珊,陳銘杰,馮勁. 中國組織工程研究. 2017(26)
[5]載藥抗結(jié)核人工骨的研究現(xiàn)狀[J]. 桂錢歡,李波. 廣東醫(yī)學. 2016(24)
[6]miR-195對人骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的影響[J]. 宋鵬,荊凱,薛建華,魏鵬飛. 中國組織工程研究. 2016(45)
[7]“溫腎通絡(luò)止痛方”治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的療效觀察及處方優(yōu)化[J]. 鄭蘇陽,馬勇,郭楊,董維,范競,黃桂成. 遼寧中醫(yī)雜志. 2016(10)
[8]氯化鋰復合磷酸鈣骨水泥可促進大鼠脛骨骨缺損修復[J]. 李理,覃永保,馬剛,李兵. 南方醫(yī)科大學學報. 2016(06)
[9]N-乙酰半胱氨酸絲素微球復合磷酸鈣骨水泥的制備及表征[J]. 姜磊,皮斌,馮燾,李斌,陸英杰,楊惠林,朱雪松. 中國組織工程研究. 2016(16)
[10]新型氯化鋰復合磷酸鈣骨水泥的理化性能及成骨特性[J]. 李理,李百川,王仁崇,李兵. 中國組織工程研究. 2016(03)
博士論文
[1]骨髓基質(zhì)干細胞體內(nèi)成骨分化研究[D]. 吳江群.中國協(xié)和醫(yī)科大學 2008
碩士論文
[1]新型磷酸鈣復合骨水泥的制備及性能研究[D]. 丁裕明.西南醫(yī)科大學 2016
[2]α-半水硫酸鈣的制備及其作為載藥骨水泥體系的體外釋放研究[D]. 張丹.四川大學 2007
本文編號：3587048
【文章來源】：西南醫(yī)科大學四川省
【文章頁數(shù)】：62 頁
【學位級別】：碩士
【部分圖文】：
瑞邦骨肽及塑料模具ABC
圖 2 制備的實驗原材料及復合骨水泥Figure 2 The raw material and different kinds of artificial composite calcium phosphate bonecement.A 為經(jīng)過環(huán)氧乙烷滅菌處理的骨基質(zhì)明膠，呈現(xiàn)淡黃色；B 是經(jīng) W/O/W 微球制備法自制的 PLGA 空白微球，呈白色粉末狀；C 脫模后的圓柱狀各型骨水泥。4 主要試劑盒堿性磷酸酶測定試劑盒（南京建成生物制品公司）、CCK8 細胞毒性增殖試劑盒（500T，東仁化學生物制品公司）、茜素紅染液（sigma 公司）5 實驗方法5.1 實驗組各型骨水泥浸提液的制備由于骨水泥不能溶于水，對后期相關(guān)指標的測量帶來障礙，故浸提液
結(jié) 果. 大鼠骨髓間充質(zhì)干細胞生長情況原代骨髓間充質(zhì)干細胞一般在接種后數(shù)小時后便開始貼壁，形態(tài)尚不均一，可呈紡錘形、梭形甚至多角形。接種后 2-3 天換液一次，換液過程使用1%的PBS液沖洗3次，此過程也可不斷純化骨髓間充質(zhì)干細胞將一些無貼壁性質(zhì)的骨髓細胞除去，通常原代細胞生長緩慢。經(jīng)傳代后的骨髓間充質(zhì)干細胞生長活躍，5-7 天即可鋪滿瓶底，多為長梭形，形態(tài)均一，細胞團可呈旋渦狀生長，實驗所用即是 P3 代細胞（見圖 3）
【參考文獻】：
期刊論文
[1]我國近5年來骨質(zhì)疏松癥流行病學研究現(xiàn)狀[J]. 白璧輝,謝興文,李鼎鵬,許偉,李寧,潘鑫戊. 中國骨質(zhì)疏松雜志. 2018(02)
[2]骨質(zhì)疏松性椎體壓縮性骨折研究進展[J]. 居正燁,陳圣寶,張長青. 國際骨科學雜志. 2018(01)
[3]載萬古霉素磷酸鈣骨水泥一期植入治療慢性骨髓炎的療效觀察[J]. 郎志剛,袁峰,梁玉祥,喻杉. 華西醫(yī)學. 2017(12)
[4]γ-聚谷氨酸/殼聚糖復合磷酸鈣骨水泥制備、表征及性能[J]. 疏秀林,施慶珊,陳銘杰,馮勁. 中國組織工程研究. 2017(26)
[5]載藥抗結(jié)核人工骨的研究現(xiàn)狀[J]. 桂錢歡,李波. 廣東醫(yī)學. 2016(24)
[6]miR-195對人骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化的影響[J]. 宋鵬,荊凱,薛建華,魏鵬飛. 中國組織工程研究. 2016(45)
[7]“溫腎通絡(luò)止痛方”治療原發(fā)性骨質(zhì)疏松癥的療效觀察及處方優(yōu)化[J]. 鄭蘇陽,馬勇,郭楊,董維,范競,黃桂成. 遼寧中醫(yī)雜志. 2016(10)
[8]氯化鋰復合磷酸鈣骨水泥可促進大鼠脛骨骨缺損修復[J]. 李理,覃永保,馬剛,李兵. 南方醫(yī)科大學學報. 2016(06)
[9]N-乙酰半胱氨酸絲素微球復合磷酸鈣骨水泥的制備及表征[J]. 姜磊,皮斌,馮燾,李斌,陸英杰,楊惠林,朱雪松. 中國組織工程研究. 2016(16)
[10]新型氯化鋰復合磷酸鈣骨水泥的理化性能及成骨特性[J]. 李理,李百川,王仁崇,李兵. 中國組織工程研究. 2016(03)
博士論文
[1]骨髓基質(zhì)干細胞體內(nèi)成骨分化研究[D]. 吳江群.中國協(xié)和醫(yī)科大學 2008
碩士論文
[1]新型磷酸鈣復合骨水泥的制備及性能研究[D]. 丁裕明.西南醫(yī)科大學 2016
[2]α-半水硫酸鈣的制備及其作為載藥骨水泥體系的體外釋放研究[D]. 張丹.四川大學 2007
本文編號：3587048
本文鏈接：http://sikaile.net/yixuelunwen/swyx/3587048.html
最近更新
教材專著
