去細(xì)胞/再細(xì)胞策略優(yōu)化與衰竭器官(肝)功能替代應(yīng)用研究
發(fā)布時間:2022-01-10 01:53
終末期肝。‥nd-stage liver disease,ESLD)是一種臨床常見重大疾病,主要包括急性肝衰竭和慢性肝硬化。肝移植是唯一治療手段。然而,肝源短缺是面臨的最大難題。生物組織工程為解決這一難題提供了新方向。介于去細(xì)胞化(Decellularization)/再細(xì)胞化(Recellularization)策略可以完整保留器官(肝)骨架,故亦成為當(dāng)今重要生命器官如肝、胰、心、膽、肺、腎等再造首選技術(shù)。來源于正常肝臟去細(xì)胞支架(Na?ve decellularized liver scaffold,nDLS)缺乏相關(guān)活性物質(zhì),故優(yōu)化支架材料包括nDLS是目前學(xué)術(shù)界尚待解決的問題。本研究采用再生去細(xì)胞肝臟活性支架材料解決這一問題。我們研究顯示,采用再生肝臟去細(xì)胞支架(Regenerative decellularized liver scaffold,rDLS),使其擁有肝再生微環(huán)境,與nDLS相比,提高種子細(xì)胞存活、促進(jìn)血流通暢和成(肝)器官潛能。1 rDLS“天然肝再生微環(huán)境”特性將正常動物肝切除30-55%體積右葉后,體內(nèi)保留3-5天后,取出在體外用洗滌劑脫去細(xì)胞。與nDL...
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:129 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
制備正常支架和再生支架
第 3 章 再生支架(rDLS)制備和生物學(xué)特性評估量為 7.175±0.0848 ng/mg dry weigh(P=0.019),見圖 3.2 Bc,獲得的 DNA 的糖凝膠電泳結(jié)果顯示正常肝臟中的 DNA 可以檢測 DNA 條帶,而 rDLS 支架檢測到 DNA 條帶(圖 3.2 Bd)。利用掃描電鏡對 rDLS 和正常肝臟的超微結(jié)構(gòu)觀察,相比于正常組織(圖 3.3A),可見 rDLS 呈現(xiàn)蜂窩狀結(jié)構(gòu)(圖 3.3 B)數(shù)據(jù)表明,制備的 rDLS 細(xì)胞去除徹底,ECM 結(jié)構(gòu)完整。rDLS 的 ECM 中有的空間進(jìn)行再細(xì)胞化。
制備的 rDLS 細(xì)胞去除徹底,ECM 結(jié)構(gòu)完整。rDLS 的 行再細(xì)胞化。支架完整性和細(xì)胞成分評估 A 血管樹;B(a-d)H&E 染色(a) DAPI 染色和正常肝臟 DNA 含量(c)及分析(d) grity and cellular constituent assessment of rDLS.AThe vascular tree of rDL DAPI staining (b); DNAcontent of the rDLS (rD1–rD3) and nDLS (N1–N3) as deteranalysis (d).
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]間充質(zhì)干細(xì)胞治療肝纖維化的現(xiàn)況和前景(英文)[J]. Yang GUO,Bo CHEN,Li-jun CHEN,Chun-feng ZHANG,Charlie XIANG. Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2016(11)
[2]Mesenchymal stem cell therapy for cirrhosis: Present and future perspectives[J]. Young Woo Eom,Gaeun Kim,Soon Koo Baik. World Journal of Gastroenterology. 2015(36)
[3]人肝組織脫細(xì)胞支架的制備[J]. 鄭幸龍,向俊西,吳萬權(quán),劉學(xué)民,劉雯雁,呂毅. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2015(07)
[4]口服二乙基亞硝胺誘導(dǎo)建立同系小鼠肝硬化模型[J]. 譚嘉鑫,游逾,曾林立,賴潔娟,張玉君,別平,白蓮花. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2015(06)
[5]Pathogenesis of liver cirrhosis[J]. Wen-Ce Zhou,Quan-Bao Zhang,Liang Qiao. World Journal of Gastroenterology. 2014(23)
[6]Hepatic inflammation and progressive liver fibrosis in chronic liver disease[J]. Albert J Czaja. World Journal of Gastroenterology. 2014(10)
[7]巨噬細(xì)胞在肝纖維化中的調(diào)控作用[J]. 劉新,婁金麗,孫桂珍. 北京醫(yī)學(xué). 2014(03)
[8]干細(xì)胞移植治療肝硬化的研究進(jìn)展[J]. 劉囡,馮義朝,胡丹瓊. 延安大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2012(04)
[9]MSCs分化為功能性肝細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 張國尊,李春生,張曉嵐. 世界華人消化雜志. 2012(14)
[10]自體骨髓干細(xì)胞移植治療肝硬化研究進(jìn)展[J]. 劉衛(wèi),朱斌. 實(shí)用肝臟病雜志. 2011(05)
本文編號:3579836
【文章來源】:西南大學(xué)重慶市 211工程院校 教育部直屬院校
【文章頁數(shù)】:129 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【部分圖文】:
制備正常支架和再生支架
第 3 章 再生支架(rDLS)制備和生物學(xué)特性評估量為 7.175±0.0848 ng/mg dry weigh(P=0.019),見圖 3.2 Bc,獲得的 DNA 的糖凝膠電泳結(jié)果顯示正常肝臟中的 DNA 可以檢測 DNA 條帶,而 rDLS 支架檢測到 DNA 條帶(圖 3.2 Bd)。利用掃描電鏡對 rDLS 和正常肝臟的超微結(jié)構(gòu)觀察,相比于正常組織(圖 3.3A),可見 rDLS 呈現(xiàn)蜂窩狀結(jié)構(gòu)(圖 3.3 B)數(shù)據(jù)表明,制備的 rDLS 細(xì)胞去除徹底,ECM 結(jié)構(gòu)完整。rDLS 的 ECM 中有的空間進(jìn)行再細(xì)胞化。
制備的 rDLS 細(xì)胞去除徹底,ECM 結(jié)構(gòu)完整。rDLS 的 行再細(xì)胞化。支架完整性和細(xì)胞成分評估 A 血管樹;B(a-d)H&E 染色(a) DAPI 染色和正常肝臟 DNA 含量(c)及分析(d) grity and cellular constituent assessment of rDLS.AThe vascular tree of rDL DAPI staining (b); DNAcontent of the rDLS (rD1–rD3) and nDLS (N1–N3) as deteranalysis (d).
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]間充質(zhì)干細(xì)胞治療肝纖維化的現(xiàn)況和前景(英文)[J]. Yang GUO,Bo CHEN,Li-jun CHEN,Chun-feng ZHANG,Charlie XIANG. Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology). 2016(11)
[2]Mesenchymal stem cell therapy for cirrhosis: Present and future perspectives[J]. Young Woo Eom,Gaeun Kim,Soon Koo Baik. World Journal of Gastroenterology. 2015(36)
[3]人肝組織脫細(xì)胞支架的制備[J]. 鄭幸龍,向俊西,吳萬權(quán),劉學(xué)民,劉雯雁,呂毅. 南方醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2015(07)
[4]口服二乙基亞硝胺誘導(dǎo)建立同系小鼠肝硬化模型[J]. 譚嘉鑫,游逾,曾林立,賴潔娟,張玉君,別平,白蓮花. 現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生. 2015(06)
[5]Pathogenesis of liver cirrhosis[J]. Wen-Ce Zhou,Quan-Bao Zhang,Liang Qiao. World Journal of Gastroenterology. 2014(23)
[6]Hepatic inflammation and progressive liver fibrosis in chronic liver disease[J]. Albert J Czaja. World Journal of Gastroenterology. 2014(10)
[7]巨噬細(xì)胞在肝纖維化中的調(diào)控作用[J]. 劉新,婁金麗,孫桂珍. 北京醫(yī)學(xué). 2014(03)
[8]干細(xì)胞移植治療肝硬化的研究進(jìn)展[J]. 劉囡,馮義朝,胡丹瓊. 延安大學(xué)學(xué)報(醫(yī)學(xué)科學(xué)版). 2012(04)
[9]MSCs分化為功能性肝細(xì)胞的研究進(jìn)展[J]. 張國尊,李春生,張曉嵐. 世界華人消化雜志. 2012(14)
[10]自體骨髓干細(xì)胞移植治療肝硬化研究進(jìn)展[J]. 劉衛(wèi),朱斌. 實(shí)用肝臟病雜志. 2011(05)
本文編號:3579836
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