目的：探討以骨基質(zhì)明膠/軟骨細(xì)胞外基質(zhì)復(fù)合山羊椎間盤(pán)細(xì)胞構(gòu)建一體化組織工程椎間盤(pán)的可行性。方法：1.取豬股骨,將豬股骨近端松質(zhì)骨經(jīng)脫鈣、脫細(xì)胞處理后,制備外徑為10mm、內(nèi)徑5mm、高3mm的骨基質(zhì)明膠環(huán)；刮取豬股骨近端軟骨,經(jīng)研磨、脫細(xì)胞處理制成勻漿；Hoechst33258染色檢測(cè)兩種支架材料脫細(xì)胞情況,再將軟骨勻漿注入骨基質(zhì)明膠環(huán)中央,經(jīng)冷凍干燥、交聯(lián)后制備成一體化纖維環(huán)-髓核雙相支架；掃描電鏡、HE、天狼星紅染色觀察支架結(jié)構(gòu)；檢測(cè)支架的孔隙率、吸水率以及敷水狀態(tài)的壓縮力學(xué)性能（力學(xué)性能與正常豬尾椎間盤(pán)對(duì)比）。2.消化分離山羊纖維環(huán)細(xì)胞及髓核細(xì)胞,倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),同時(shí)對(duì)第1代細(xì)胞進(jìn)行甲苯胺藍(lán)、番紅O染色以及Ⅰ、Ⅱ型膠原免疫細(xì)胞化學(xué)染色；將第1代纖維環(huán)細(xì)胞及髓核細(xì)胞分別以密度1×107個(gè)/ml接種至支架的纖維環(huán)相及髓核相上,體外培養(yǎng)2d,倒置顯微鏡、掃描電鏡、組織學(xué)染色觀察細(xì)胞在支架上的粘附情況,LIVE/DEAD染色觀察細(xì)胞在支架上的活性；細(xì)胞支架復(fù)合物分別培養(yǎng)2w和4w,Real-time PCR技術(shù)檢測(cè)支架中椎間盤(pán)細(xì)胞的Ⅰ、Ⅱ型膠原、聚集蛋白多糖的基因表達(dá)水平（正常... 

【文章來(lái)源】：天津醫(yī)科大學(xué)天津市 211工程院校

【文章頁(yè)數(shù)】：67 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
縮略語(yǔ)/符號(hào)說(shuō)明
前言
    研究現(xiàn)狀、成果
    研究目的、方法
一、以骨基質(zhì)明膠及軟骨細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)建一體化纖維環(huán)-髓核雙相支架的實(shí)驗(yàn)研究
    對(duì)象和方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
二、椎間盤(pán)細(xì)胞的分離培養(yǎng)及一體化椎間盤(pán)支架的細(xì)胞生物相容性評(píng)估
    對(duì)象和方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
三、以天然骨基質(zhì)明膠/軟骨細(xì)胞外基質(zhì)復(fù)合山羊椎間盤(pán)細(xì)胞裸鼠體內(nèi)異位構(gòu)建組織工程椎間盤(pán)的實(shí)驗(yàn)研究
    對(duì)象和方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
發(fā)表論文和參加科研情況說(shuō)明
綜述
    綜述參考文獻(xiàn)
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]重組腺相關(guān)病毒介導(dǎo)人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶基因轉(zhuǎn)染對(duì)人髓核細(xì)胞功能的影響[J]. 吳劍宏,阮狄克,王德利,張超,何勍,王超鋒,張燕,辛洪奎,顧韜,徐成,劉玥.  中國(guó)脊柱脊髓雜志. 2012(09)
[2]肺內(nèi)輸入骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞對(duì)肺氣腫大鼠慢性炎癥的調(diào)控[J]. 管小俊,宋琳,郭雪君,徐衛(wèi)國(guó).  中國(guó)呼吸與危重監(jiān)護(hù)雜志. 2011(06)
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[4]PKH26和DAPI聯(lián)合示蹤骨髓干細(xì)胞在腦缺血模型小鼠腦內(nèi)遷移的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 張雪梅,杜芳,楊丹,戶(hù)宏艷,付錦.  中風(fēng)與神經(jīng)疾病雜志. 2011(04)
[5]骨髓基質(zhì)干細(xì)胞與軟骨脫細(xì)胞基質(zhì)多孔支架異位構(gòu)建組織工程化軟骨的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 楊強(qiáng),彭江,盧世璧,郭全義,汪愛(ài)媛,姚軍,趙斌,張莉,許文靜.  中華骨科雜志. 2010 (04)
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[9]天然細(xì)胞外基質(zhì)及其在組織工程中的應(yīng)用[J]. 劉鶴莉,顧漢卿.  透析與人工器官. 2006(03)
[10]人骨髓間質(zhì)干細(xì)胞PKH26熒光標(biāo)記技術(shù)[J]. 王興忠,許文榮,朱偉,楊歡,喬純,錢(qián)暉,胡嘉波.  中華檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志. 2006(09)



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