本文以新型阿侖膦酸鈉-羥基磷灰石-殼聚糖（Alendronate-hydroxyapatite-chitosan, ALN/HA/CS）軟骨支架材料為支撐,與兔骨髓間充質(zhì)干細胞（Bone marrow-derived mesenchymal stem cells、BMSCs）共培養(yǎng),檢測培養(yǎng)后不同時間成軟骨分化的基因表達,從而評估ALN/HA/CS對BMSCs分化的影響。本研究進行了幼兔BMSCs的原代培養(yǎng)和傳代培養(yǎng),經(jīng)傳代后接種于含有ALN/HA/CS雙層復(fù)合支架材料的細胞培養(yǎng)板中進行體外培養(yǎng),對照組為HA/CS雙層復(fù)合支架材料。在培養(yǎng)后不同時間收集細胞進行實時定量PCR檢測ALP、二型膠原與一型膠原等與軟骨形成相關(guān)基因表達和糖胺聚糖分泌。得到如下結(jié)果：1.成骨誘導(dǎo)3、5、7天,實驗組ALP基因表達水平均明顯高于對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。成骨誘導(dǎo)7、14、21天,實驗組BGP基因表達均明顯高于對照組,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。2.成軟骨誘導(dǎo)培養(yǎng)3、6、12天時,實驗組與對照組二型膠原基因表達量與糖氨基聚糖（GAG）分泌量均無明顯區(qū)別。成軟骨誘導(dǎo)... 

【文章來源】：內(nèi)蒙古大學(xué)內(nèi)蒙古自治區(qū) 211工程院校

【文章頁數(shù)】：48 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
英文摘要
1. 前言
    1.1 骨軟骨組織工程的研究進展
        1.1.1 關(guān)節(jié)軟骨的結(jié)構(gòu)特點
        1.1.2 骨軟骨修復(fù)的細胞來源
    1.2 骨軟骨支架與功能設(shè)計
        1.2.1 支架材料的選擇與設(shè)計
        1.2.2 支架生物相容性、降解性及機械力學(xué)性能
        1.2.3 支架孔結(jié)構(gòu)的設(shè)計
        1.2.4 支架相關(guān)生物因子
    1.3 總結(jié)
    參考文獻
2. 材料和方法
    2.1 實驗材料及試劑
        2.1.1 實驗材料
        2.1.2 主要儀器
        2.1.3 主要試劑
    2.2 方法
        2.2.1 兔骨髓間充質(zhì)干細胞的分離與培養(yǎng)
        2.2.2 ALN/HA/CS復(fù)合支架材料對骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨分化影響檢測
        2.2.3 實時熒光定量PCR
    2.3 統(tǒng)計學(xué)分析
3. 結(jié)果
    3.1 兔BMSCs體外培養(yǎng)
    3.2 ALN/HA/CS支架對骨髓間充質(zhì)干細胞成骨分化ALP與骨鈣素(OSTEOCALCIN BGP)基因表達的影響
    3.3 ALN/HA/CS支架對骨髓間充質(zhì)干細胞成軟骨分化的影響
4 討論
    4.1 關(guān)節(jié)軟骨結(jié)構(gòu)特點與傳統(tǒng)修復(fù)
    4.2 軟骨組織工程
    4.3 新型阿侖膦酸-羥基磷灰石-殼聚糖軟骨支架
    4.4 阿侖膦酸-羥基磷灰石-殼聚糖對骨髓間充質(zhì)干細胞成骨、成軟骨分化的影響
5 結(jié)論
參考文獻
致謝


【參考文獻】：
期刊論文
[1]殼聚糖/羥基磷灰石骨修復(fù)材料的研究進展[J]. 徐小燕,劉濤濤,鄭軍,李巖.  材料導(dǎo)報. 2012(15)
[2]殼聚糖抗菌生物醫(yī)用膜在燒傷創(chuàng)面中的臨床應(yīng)用[J]. 袁丹波.  微生物學(xué)免疫學(xué)進展. 2012(01)
[3]成骨細胞胞內(nèi)胞外堿性磷酸酶含量比較[J]. 張英,袁月,孫富麗.  中國醫(yī)科大學(xué)學(xué)報. 2011(10)
[4]納米羥基磷灰石/殼聚糖支架材料復(fù)合大鼠成骨細胞培養(yǎng)的實驗研究[J]. 徐培,陸鈺,吳海珍,趙玫,汪學(xué)華,王鑫,儲嵐嵐.  安徽醫(yī)藥. 2011(07)
[5]阿侖膦酸鈉對大鼠成骨細胞增殖的影響[J]. 蔣四清,李鋒,李光輝,陳安民.  中國矯形外科雜志. 2005(12)
[6]阿侖磷酸鈉對成骨細胞增殖、分泌和成骨功能的影響[J]. 金群華,田豐年,朱建華,陸志東,陳志榮.  中華實驗外科雜志. 2004(01)
[7]多孔羥基磷灰石生物陶瓷的進展[J]. 鄭岳華,侯小妹,楊兆雄.  硅酸鹽通報. 1995(03)
[8]自體骨髓間充質(zhì)干細胞復(fù)合殼聚糖/羥基磷灰石支架修復(fù)兔膝骨軟骨缺損[J]. 王文良,張華亮,初殿偉,王彥鵬,周洲,王景貴.  中華骨科雜志. 2009 (01)



本文編號：3522762