隨著科學(xué)發(fā)展,藥物的更新迭代中多種材料各顯優(yōu)勢,異彩紛呈。生物材料作為生物制品中重要的組成部分,依托天然生物材料的獨(dú)有優(yōu)勢,在發(fā)展過程中受到極大重視。其中蛋白和多糖在自然環(huán)境中廣泛存在而且種類豐富,是醫(yī)藥領(lǐng)域中常用的生物大分子。本研究旨在利用蛋白和多糖這類天然生物材料為基質(zhì)材料,通過適當(dāng)?shù)男揎椄男砸约靶滦徒宦?lián)劑來制備生物相容性好、具有合適力學(xué)性能的可降解的組織工程水凝膠支架,通過各種理化表征來評價該材料的性質(zhì),并選取最優(yōu)方案通過生物學(xué)表征進(jìn)一步探究所構(gòu)建的水凝膠在組織工程中的應(yīng)用情況。（1）對天然多糖糖原的結(jié)構(gòu)進(jìn)行多次修飾以構(gòu)建立體的多官能團(tuán)的糖原衍生物,并將其用作交聯(lián)劑,分別交聯(lián)膠原蛋白與羥基磷灰石,通過調(diào)節(jié)各組分的含量制備出一系列復(fù)合水凝膠。糖原被胍基修飾,然后氧化成醛,隨后通過席夫堿鍵和靜電相互作用分別與膠原蛋白和羥基磷灰石結(jié)合,并以此形成水凝膠。該水凝膠在生理環(huán)境下一定時間內(nèi)能夠保持原狀不降解,而在具有特異性酶的環(huán)境中快速降解。它們的楊氏模量（10至70 kPa）和壓縮模量（30至432 kPa）均在干細(xì)胞分化為成骨細(xì)胞或軟骨所需的性能范圍內(nèi)。此外,在復(fù)合水凝膠上培養(yǎng)的骨髓來源... 

【文章來源】：江南大學(xué)江蘇省 211工程院校 教育部直屬院校

【文章頁數(shù)】：70 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

C/G/H水凝膠的制備示意圖

第二章由糖原衍生物構(gòu)建的復(fù)合水凝膠的制備及其對干細(xì)胞的誘導(dǎo)分化21均在3.00-6.00ppm處呈現(xiàn)糖原典型序列的峰。特別是在Gly-EA中乙二胺分子上的亞甲基帶來的2.90-3.20ppm之間的峰，然后在接枝胍基形成Gly-guanido后，這些峰移動到3.1-3.4ppm。而在8.5和8.8ppm處觀察到CHO-Gly-guanido的醛基質(zhì)子信號，確認(rèn)最終產(chǎn)物。同時通過電導(dǎo)滴定法測定出Gly-EA中的氨基含量為1.558μmol/mg。根據(jù)坂口反應(yīng)的標(biāo)準(zhǔn)曲線計算出Gly-guanido中的胍基含量為8.584μg/mg（見圖2-3）。CHO-Gly-guanido中的醛基含量由鹽酸羥胺滴定法測定并計算出，為2.398μmol/mg。此外，在透射電鏡下觀察到它仍然保持著直徑為60到120nm的球體形態(tài)，并且DLS顯示，CHO-Gly-guanido顆粒的流體動力學(xué)直徑主要分布在100nm左右，證明這些修飾對其形態(tài)沒有影響，如圖2-3(e)(f)所示。圖2-3糖原衍生物的表征（a）Gly，Gly-EA，Gly-guanido，CHO-Gly-guanido和nano-HAP的Zeta電位；（b）

y-guanido;(c)Thetitrationcurvecorrespondingof-NH2inGly-EAbytheconductivitymethod;(d)ThestandardcurveintheSakaguchireaction;(e)TheTEMofCHO-Gly-guanido;(f)TheparticlesizedistributionofCHO-Gly-guanido.隨后，將不同濃度的CHO-Gly-guanido和nano-HAP混合在一起，通過TEM和DLS研究了它們之間的相互作用情況。正如我們預(yù)期的那樣，由于CHO-Gly-guanido帶有正電荷，而nano-HAP帶負(fù)電荷，因此兩者之間存在靜電相互作用，nano-HAP聚集在CHO-Gly-guanido周圍，并以較大的團(tuán)聚顆粒出現(xiàn)在混合溶液中，如圖2-4所示。圖2-4CHO-Gly-guanido和nano-HAP的相互作用（a）不同比例CHO-Gly-guanido和nano-HAP混合溶液的粒徑分布；（b）TEM拍攝的CHO-Gly-guanido和nano-HAP混合溶液的微觀形貌。Figure2-4InteractionbetweenCHO-Gly-guanidoandnano-HAP(a)TheparticlesizedistributionofthemixedsolutionofCHO-Gly-guanidoandnano-HAPindifferentproportions;(b)TheTEMofthemixedsolutionofCHO-Gly-guanidoandnano-HAP2.4.2C/G/H水凝膠的制備依次將修飾后的CHO-Gly-guanido與COL和nano-HAP混合，然后用碳酸鹽緩沖液覆蓋12小時，以在37℃下形成C/G/H復(fù)合水凝膠。這些成分之間的結(jié)合主要取決于CHO-Gly-guanido與COL之間的動態(tài)席夫堿鍵以及CHO-Gly-guanido與nano-HAP之間的靜電作用，如示意圖2-5(a)[60,73,74]。為了分析C/G/H水凝膠的性質(zhì)，我們制備了多組不同組成的水凝膠。首先，考慮到組分濃度對物


本文編號：3506325