研究目的:1.采用不同濃度的牛血清白蛋白（BSA）對牛脫鈣骨基質（DBM）進行表面修飾,制備具有BSA涂層的DBM支架材料,觀察各組支架表征并對其性能進行分析;2.無菌環(huán)境下,小鼠成纖維細胞（L929）與BSA改性前后的DBM支架共培養(yǎng),觀察細胞在支架表面的生長情況,測定支架材料對細胞增殖活性的影響;3.L929細胞與支架材料在無菌環(huán)境下共培養(yǎng)一定時間后,測定BSA改性前后的DBM支架對細胞的黏附能力,探尋適宜的BSA濃度。研究方法:1.取牛松質骨體外脫脂脫鈣后制得DBM支架材料作為對照組,使用濃度為10 mg/ml、20 mg/ml、30 mg/ml、40 mg/ml 的BSA溶液處理DBM,冷凍干燥法制備的具有BSA涂層的支架作為實驗組。掃描電子顯微鏡下觀察支架的表面形貌,傅里葉變換紅外光譜分析BSA的結合情況,并對支架的孔隙率、降解速率、接觸角進行測定。2.復蘇L929細胞,將生長情況良好的細胞接種到無菌DBM支架及具有BSA涂層的支架內(nèi),共培養(yǎng)3d,掃描電鏡下觀察細胞在支架內(nèi)生長情況,MTT法檢測BSA改性前后的支架對細胞增殖活性的影響。3.將L929細胞接種到改性前后的DBM... 

【文章來源】：吉林大學吉林省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

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【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２．１掃描電鏡下支架表面形態(tài)??Ｆｉｇ?２．１?ＳＥＭ?ｉｍａｇｅｓ?ｏｆ?ｓｃａｆｆｏｌｄｓ??

２．４．３支架的孔隙率??？?各組支架的孔隙率測定結果如圖２．３。ＤＢＭ支架內(nèi)部三維多孔結構相互交??聯(lián)，膠原網(wǎng)架有效空間大，孔隙率達（６９．２８±２．４６）?％。使用ＢＳＡ對ＤＢＭ支架??修飾后，隨著ＢＳＡ濃度的增加，支架的孔隙率逐漸降低，各組支架的孔隙率分??別為（５１．０８±１．５３）?％，（４６．２０±０．９９）?％，?（４０．８３±１．２３）?％，?（３４＿２８士２．７３）?％。??在骨組織工程中，支架孔隙率大小可以控制氧氣及營養(yǎng)成分輸送的速度和效率，??材料孔隙率適當降低不影響細胞的定植，但孔隙率過低影響支架整體負載細胞??的能力，提示利用ＢＳＡ對支架改性時，蛋白濃度不宜過高，應低于４０ｍｇ／ｍｌ。??１４??

Ｆｉｇ?２．３?Ｐｏｒｏｓｉｔｙ?ｒａｔｉｏ?ｏｆ?ｓｃａｆｆｏｌｄｓ??２．４．４支架的親水性??ＤＢＭ支架及具有ＢＳＡ涂層的各組ＤＢＭ支架的靜態(tài)接觸角見圖２．４?（Ａ）。??ＤＢＭ支架改性前，表面接觸角大于９０°；不同濃度的ＢＳＡ處理后ＤＢＭ支架表??面接觸角均小于９０°。每組隨機�。硞�平行樣進行測定，結果見圖２．４?（Ｂ）。??對照組ＤＢＭ支架材料的接觸角為１２４．５２°±９．３５°，各實驗組接觸角分別為??６８．９４。±２．０３。，６５．８１。±２．６９。，７０．５。±０．４７。，６９．２６。±６．９１。。與對照組?ＤＢＭ?支架??相比，ＢＳＡ處理的實驗組接觸角差異具有統(tǒng)計學意義（Ｐ＜０．０５），各個實驗組??兩兩比較，接觸角大小無統(tǒng)計學意義（Ｐ＞０．０５）。結果表明，ＢＳＡ涂層可以改??進ＤＢＭ支架的親水性，與ＢＳＡ的濃度大小無關。??（ａ）?（ｂ）?（Ｃ）??（ｄ）?（ｅ）??圖２．４?（Ａ）支架材料的表面接觸角??１５??

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
[1]鋅摻雜的羥基磷灰石復合物（聚乳酸或石墨烯）制備與模擬研究[D]. 巫劍波.深圳大學 2017



本文編號：3503289