目的:對兔膝關(guān)節(jié)軟骨細胞進行體外瓊脂糖凝膠滾壓培養(yǎng);探討滾壓載荷對軟骨組織體外構(gòu)建的可行性。方法:1細胞培養(yǎng)及鑒定:無菌條件下取四周齡健康新西蘭白兔雙膝關(guān)節(jié)軟骨,應(yīng)用分階段酶消化法,分離提取軟骨細胞,20%胎牛血清的HG-DMEM作為細胞培養(yǎng)基,在37℃、體積分數(shù)為5%的CO2及飽和濕度條件下培養(yǎng),每3天換液一次。取第3代軟骨細胞,進行甲苯胺藍、番紅O-固綠、Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色,以用作對軟骨細胞的初步鑒定。2以分離提取的兔膝關(guān)節(jié)軟骨細胞為種子細胞,以瓊脂糖凝膠為支架,構(gòu)建細胞/支架復(fù)合體。將細胞/支架共同培養(yǎng)48小時后,電鏡觀察支架內(nèi)軟骨細胞的黏附、生長情況。設(shè)置實驗組A （8例）和對照組B （8例）,實驗組滾壓動態(tài)加載培養(yǎng)（每天定時滾壓加載20min）,對照組正常體外靜態(tài)培養(yǎng)。4周后觀察標本大體形態(tài),并對實驗組和對照組進行HE染色和Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色,應(yīng)用Image-pro plus對Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色切片行Ⅱ型膠原半定量分析。結(jié)果:1細胞形態(tài)學(xué)觀察和鑒定:原代培養(yǎng)的軟骨細胞貼壁較慢,24-36小時才開始貼壁變形。其外形多為多邊形,胞漿豐富,胞核圓形,居中,有2-3... 

【文章來源】：青海大學(xué)青海省 211工程院校

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
前言
資料和方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
參考文獻
致謝
文獻綜述
    參考文獻
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【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3501370