新型組織工程化神經(jīng)導(dǎo)管對(duì)脊髓損傷的修復(fù)作用研究
本文關(guān)鍵詞:新型組織工程化神經(jīng)導(dǎo)管對(duì)脊髓損傷的修復(fù)作用研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:背景:組織工程支架材料已被應(yīng)用于脊髓損傷的修復(fù),但其具有局限性,效果也不甚理想。目的:構(gòu)建復(fù)合聚乳酸-羥基乙酸共聚物(PLGA)及紅景天苷微球的新型組織工程神經(jīng)導(dǎo)管支架材料,觀察其對(duì)脊髓損傷的修復(fù)作用,為將其應(yīng)用于臨床上脊髓損傷的修復(fù)提供基礎(chǔ)研究資料。方法:乳化-溶劑揮發(fā)法制備地塞米松、紅景天苷、絲裂霉素C微球,以包封率、載藥量以及收率的綜合評(píng)分為指標(biāo),通過正交試驗(yàn)考察投藥量、PLGA用量和聚乙烯醇(PVA)質(zhì)量分?jǐn)?shù)對(duì)微球處方工藝的影響,掃描電鏡觀察微球表征。采用靜電紡絲技術(shù),以膠原蛋白和聚己內(nèi)酯(PCL)為原料制備纖維納米支架殼層。利用特制模具將微球混入膠原蛋白中制成支架材料的芯層,制成無微球組、地塞米松和紅景天苷微球組、絲裂霉素和紅景天苷微球組三組復(fù)合支架材料。三組材料分別與大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞共培養(yǎng)。建立Wistar大鼠脊髓損傷動(dòng)物模型,大鼠隨機(jī)分為無微球組、地塞米松和紅景天苷微球組、絲裂霉素和紅景天苷微球組,每組20只,分別于術(shù)后4周和16周取材,標(biāo)本常規(guī)固定、切片、組織學(xué)(HE)染色。免疫熒光化學(xué)染色觀察S100,神經(jīng)絲蛋白(Neurofilament,NF),神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(Glial fibrillary acidic protein,GFAP),巨噬細(xì)胞表面特異性標(biāo)志抗體(ED-1)的表達(dá),綜合評(píng)價(jià)其對(duì)脊髓損傷的修復(fù)效果。結(jié)果:紅景天苷微球最佳制備工藝為投藥量6 mg,PLGA用量120 mg,PVA質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%。紅景天苷微球的載藥量、包封率和收率分別為(3.86±0.03)%,(83.62±0.31)%,(90.67±2.35)%;地塞米松緩釋微球最佳制備工藝為投藥量10 mg,PLGA用量80 mg,PVA質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5%,地塞米松微球的載藥量、包封率和收率分別為(2.26±0.03)%,(83.62±0.21)%和(90.87±2.45)%;絲裂霉素微球最佳制備工藝為投藥量200μg,PLGA用量60 mg,PVA質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5%,絲裂霉素微球的載藥量、包封率和收率分別為(4.86±0.04)%,(76.62±0.52)%,(90.23±1.75)%;微球外觀圓整,表面光滑。大鼠骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞在復(fù)合微球的材料上生長狀況良好。大鼠術(shù)后4周和16周HE染色結(jié)果顯示,復(fù)合微球材料組可見材料明顯或完全降解及大量細(xì)胞長入,而無微球材料組只有少量細(xì)胞長入。免疫熒光染色結(jié)果顯示,無微球組,地塞米松和紅景天苷微球組,絲裂霉素和紅景天苷微球組S100、NF表達(dá)依次增強(qiáng);GFAP表達(dá)和ED-1表達(dá)依次減弱。復(fù)合PLGA微球組的脊髓損傷修復(fù)效果明顯優(yōu)于無微球組。結(jié)論:本研究構(gòu)建的組織工程化神經(jīng)導(dǎo)管能有效促進(jìn)脊髓損傷后的神經(jīng)修復(fù),具有潛在的臨床應(yīng)用前景。
【關(guān)鍵詞】:地塞米松 紅景天苷 絲裂霉素 膠原蛋白 神經(jīng)導(dǎo)管 脊髓損傷 組織工程
【學(xué)位授予單位】:蘭州大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R651.2;R318.08
【目錄】:
- 中文摘要3-5
- Abstract5-9
- 綜述9-12
- 1.脊髓損傷簡介9
- 2.組織工程支架材料修復(fù)SCI的作用9-10
- 3.藥物治療SCI的作用10-12
- 前言12-13
- 材料與方法13-21
- 2.1 動(dòng)物及主要試劑13
- 2.2 主要儀器設(shè)備13-14
- 2.3 試劑配制14-15
- 2.4 實(shí)驗(yàn)方法15-21
- 2.4.1 微球制備15-17
- 2.4.2 材料的制備17-18
- 2.4.3 動(dòng)物實(shí)驗(yàn)18-19
- 2.4.4 材料生物相容性19
- 2.4.5 組織學(xué)檢查19-20
- 2.4.6 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析20-21
- 實(shí)驗(yàn)結(jié)果21-37
- 3.1 微球評(píng)價(jià)結(jié)果21-28
- 3.1.1 紅景天苷微球21-23
- 3.1.2 地塞米松微球23-25
- 3.1.3 絲裂霉素微球25-27
- 3.1.4 微球的形態(tài)27-28
- 3.2 材料表征的形態(tài)觀察結(jié)果28-29
- 3.3 材料的生物相容性29-32
- 3.3.1 復(fù)合地塞米松微球材料與空白微球材料29-30
- 3.3.2 組織工程化神經(jīng)導(dǎo)管材料觀察結(jié)果30-32
- 3.4 免疫組織化學(xué)觀察結(jié)果32-37
- 3.4.1 S-100表達(dá)觀察結(jié)果32-33
- 3.4.2 NF表達(dá)觀察結(jié)果33-35
- 3.4.3 GFAP表達(dá)觀察結(jié)果35
- 3.4.4 ED-1 表達(dá)觀察結(jié)果35-37
- 討論37-39
- 結(jié)論39-40
- 參考文獻(xiàn)40-45
- 在學(xué)期間發(fā)表的論文45-46
- 附件46-47
- 致謝47
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3 編譯 于娜;早期脊髓損傷有新療法[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2009年
4 通訊員 陳亞偉 記者 徐丹鹿;我國每年脊髓損傷者數(shù)萬人[N];光明日?qǐng)?bào);2003年
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6 上海浦東 陸至順;脊髓損傷患者的心理特征[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2013年
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8 鄭穎t
本文編號(hào):348029
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