目的:運用選擇性激光熔化（Selective laser melting,SLM）技術制備的多孔TC4金屬支架對骨髓間充質干細胞（Bone Marrow Mesenchymal Stem Cells,BMSCs）細胞毒性及成骨分化的影響。方法:1.體外全骨髓貼壁法培養(yǎng)SD大鼠BMSCs原代細胞。2.流式細胞術進行BMSCs表型鑒定:選取處于對數(shù)生長期,分化良好的第3代BMSCs,流式細胞術進行細胞表型鑒定。3.TC4金屬支架制備、分組及預處理:利用SLM制備長×寬×高=5×5×2.5mm的立方形多孔支架,并將支架上孔形和孔數(shù)設計為圓形9孔、圓形16孔、圓形64孔、方形25孔、方形64孔以及無孔對照組。4.第3代BMSCs接種于TC4金屬支架48h后運用掃描電鏡（Scanning electron microscopy,SEM）觀察細胞形態(tài)以及細胞黏附情況。5.第3代BMSCs接種于支架分別于1天、3天、5天及7天運用細胞增殖活性檢測試劑盒（CCK-8）檢測TC4金屬支架的細胞毒性作用。6.第4代BMSCs接種于支架,進行成骨誘導,分別于7天、14天時進行堿性磷酸酶活性（Alkaline... 

【文章來源】：遵義醫(yī)科大學貴州省

【文章頁數(shù)】：55 頁

【學位級別】：碩士

【部分圖文】：

多孔SLM支架

采用 SPSS 18.0 統(tǒng)計軟件進行分析，實驗數(shù)據(jù)用均數(shù)±標準差( )表示，組間比較采用獨立樣本 t 檢驗進行分析，多組間比較采用單因素方差分析one-way ANOVA)，以 P<0.05 和 P<0.01 表示有顯著差異和極顯著差異。 結果.1 BMSCs 原代培養(yǎng)細胞接種初期，由于存在著較多圓形血細胞、骨髓細胞、骨渣及雜質，導致MSCs 形態(tài)難以辨認(圖 2A)；培養(yǎng) 72 h 后多數(shù)細胞已貼壁，呈集落狀生長，此呈三角形、多邊形及不規(guī)則形態(tài)的細胞居多(圖 2B)；7-10 天后首次進行傳代可見第 1 代細胞，呈旋渦狀生長，不規(guī)則形細胞減少(圖 2C)；到第 3 代細胞，態(tài)趨于穩(wěn)定的長梭形，連接緊密(圖 2D) 。x s

圖 4D)；方形 25 孔支架可見片狀細胞層連接緊密，并向孔內延伸(見圖 4E)；方形 64 孔支架細胞扁平，形態(tài)光滑飽滿，相互伸出偽足，連接更加緊密(見圖 4F)。圖4 掃描電鏡檢測早期 BMSCs 形態(tài)觀察(A)無孔實心支架; (B) 圓形9孔支架; (C) 圓形16孔支架; (D) 圓形64孔支架; (E) 方形25孔支架; (F) 方形64孔支架

【參考文獻】：
期刊論文
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碩士論文
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本文編號：3472903