多孔性羥基磷灰石微球的制備及其性能研究
發(fā)布時(shí)間:2021-10-25 17:06
羥基磷灰石作為一種應(yīng)用于骨填充材料領(lǐng)域的材料一直都被廣泛的研究和應(yīng)用。羥基磷灰石是骨基質(zhì)的重要的無機(jī)組成部分,具有良好的生物相容性,骨傳導(dǎo)性等優(yōu)點(diǎn),但是羥基磷灰石自身不具備誘導(dǎo)骨組織形成的能力,因此單一的羥基磷灰石材料不能誘導(dǎo)受體骨的形成,也就無法滿足受體對(duì)植入材料的生理需求。針對(duì)羥基磷灰石不能誘導(dǎo)骨組織形成的缺點(diǎn),本文將具有骨誘導(dǎo)能力的一種生長因子——重組的Ⅱ型骨形態(tài)發(fā)生蛋白,與羥基磷灰石進(jìn)行復(fù)合,制備了一種內(nèi)部吸附有重組的Ⅱ型骨形態(tài)發(fā)生蛋白的多孔中空的羥基磷灰石微球復(fù)合材料。主要完成了以下幾個(gè)方面開展工作:1.以自制的納米羥基磷灰石顆粒為原料,在明膠/水/植物油微乳液體系中制得明膠/羥基磷灰石微球,經(jīng)過高溫處理將明膠去除后,得到了多孔的羥基磷灰石微球。采用TEM、XRD、TG、SEM、壓汞儀對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行了表征。結(jié)果表明:利用此方法制得的羥基磷灰石微球尺寸較均勻,約為800±200μm;該微球呈現(xiàn)多孔結(jié)構(gòu),且孔隙率隨微乳體系中明膠含量的增加而增加。當(dāng)羥基磷灰石/明膠的質(zhì)量比為4:6時(shí),微球出現(xiàn)空心現(xiàn)象。2.以布洛芬作為模式藥物,在真空條件下以溶液形式將布洛芬吸附到所制備的多孔的羥基磷灰...
【文章來源】:浙江理工大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 骨組織與骨組織工程
1.1.1 骨組織的組成與結(jié)構(gòu)
1.1.2 骨組織工程
1.1.3 骨填充材料
1.2 羥基磷灰石的研究現(xiàn)狀
1.2.1 羥基磷灰石的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)
1.2.2 羥基磷灰石的制備方法
1.2.3 羥基磷灰石的應(yīng)用
1.3 重組Ⅱ型骨形態(tài)發(fā)生蛋白的研究現(xiàn)狀
1.4 本研究立題依據(jù)與研究目的
第二章 羥基磷灰石微球的制備及其表征
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器
2.2.2 羥基磷灰石微球的制備
2.2.2.1 羥基磷灰石粉末的制備
2.2.2.2 明膠/羥基磷灰石復(fù)合微球的制備
2.2.2.3 多孔羥基磷灰石微球的制備
2.3 材料的表征測(cè)試
2.3.1 透射電鏡
2.3.2 X-衍射光譜測(cè)定
2.3.3 熱重分析
2.3.4 掃描電鏡
2.3.5 壓汞儀測(cè)試
2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
2.4.1 羥基磷灰石粉末的表征
2.4.2 明膠/羥基磷灰石復(fù)合微球的數(shù)碼照片
2.4.3 明膠/羥基磷灰石復(fù)合微球的燒結(jié)工藝制定
2.4.4 多孔羥基磷灰石微球的掃描電鏡分析
2.4.5 多孔羥基磷灰石微球的孔徑分布和孔隙率分析
2.4.6 多孔羥基磷灰石微球的物相分析
2.5 小結(jié)
第三章 載藥微球的體外釋放研究
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
3.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器
3.2.2 布洛芬/羥基磷灰石復(fù)合微球的制備
3.2.3 布洛芬/羥基磷灰石復(fù)合微球的體外模擬釋放
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
3.3.1 布洛芬的標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
3.3.2 多孔羥基磷灰石微球的載藥量
3.3.3 布洛芬/羥基磷灰石復(fù)合微球的體外模擬釋放曲線
3.4 小結(jié)
第四章 BMP-2/羥基磷灰石微球復(fù)合材料的生物學(xué)評(píng)價(jià)
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
4.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器
4.2.2 BMP-2 的表達(dá)、純化
4.2.2.1 感受態(tài)細(xì)胞的制備
4.2.2.2 轉(zhuǎn)化
4.2.2.3 誘導(dǎo)目的基因表達(dá)
4.2.2.4 目的蛋白的分離純化
4.2.2.5 目的蛋白檢測(cè)
4.2.3 MG-63 細(xì)胞準(zhǔn)備
4.2.3.1 MG-63 細(xì)胞復(fù)蘇
4.2.3.2 消化MG-63 細(xì)胞
4.2.3.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)
4.2.3.4 細(xì)胞傳代
4.2.3.5 細(xì)胞凍存
4.2.4 BMP-2/HA 復(fù)合微球的生物學(xué)評(píng)價(jià)
4.2.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)復(fù)合材料的準(zhǔn)備
4.2.4.2 成骨樣細(xì)胞MG-63 的接種
4.2.4.3 堿性磷酸酶(ALP)活性測(cè)定
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
4.3.1 重組BMP-2 的SDS-PAGE 檢測(cè)
4.3.2 微球吸附蛋白量
4.3.3 MG-63 細(xì)胞株的培養(yǎng)
4.3.4 ALP 活性檢測(cè)
4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)果與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]多孔羥基磷灰石陶瓷貫通性的控制與改善[J]. 梁列峰,翁杰. 中國生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào). 2006(03)
[2]反相微乳液法制備納米羥基磷灰石及其表征[J]. 朱敏鷹,李紅,李立華,周長忍. 材料導(dǎo)報(bào). 2006(03)
[3]骨組織工程多孔支架材料性質(zhì)及制備技術(shù)[J]. 吳景梅,吳若峰. 化工新型材料. 2004(09)
[4]組織工程三維多孔支架的制備方法和技術(shù)進(jìn)展[J]. 吳林波,丁建東. 功能高分子學(xué)報(bào). 2003(01)
[5]骨形成蛋白載體材料研究進(jìn)展[J]. 王敏,韓金祥. 中國臨床康復(fù). 2003(04)
[6]重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2在大腸桿菌中的表達(dá)及純化[J]. 熊紹虎,余 磊,譚海燕,黃 濤,王朝陽,劉大庸,鐘世鎮(zhèn). 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2002(05)
[7]生物材料有效性和安全性評(píng)價(jià)的現(xiàn)狀與趨勢(shì)[J]. 張真,盧曉風(fēng). 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2002(01)
[8]骨折愈合的分子生物學(xué)進(jìn)展[J]. 胡蘊(yùn)玉. 當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2002(01)
[9]人骨形成蛋白-2的結(jié)構(gòu)與生物學(xué)活性[J]. 張斌. 國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 2001(06)
[10]孔徑可控的多孔羥基磷灰石的制備工藝研究[J]. 姚秀敏,譚壽洪,江東亮. 功能材料與器件學(xué)報(bào). 2001(02)
本文編號(hào):3457831
【文章來源】:浙江理工大學(xué)浙江省
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
Abstract
第一章 緒論
1.1 骨組織與骨組織工程
1.1.1 骨組織的組成與結(jié)構(gòu)
1.1.2 骨組織工程
1.1.3 骨填充材料
1.2 羥基磷灰石的研究現(xiàn)狀
1.2.1 羥基磷灰石的結(jié)構(gòu)與性質(zhì)
1.2.2 羥基磷灰石的制備方法
1.2.3 羥基磷灰石的應(yīng)用
1.3 重組Ⅱ型骨形態(tài)發(fā)生蛋白的研究現(xiàn)狀
1.4 本研究立題依據(jù)與研究目的
第二章 羥基磷灰石微球的制備及其表征
2.1 引言
2.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
2.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器
2.2.2 羥基磷灰石微球的制備
2.2.2.1 羥基磷灰石粉末的制備
2.2.2.2 明膠/羥基磷灰石復(fù)合微球的制備
2.2.2.3 多孔羥基磷灰石微球的制備
2.3 材料的表征測(cè)試
2.3.1 透射電鏡
2.3.2 X-衍射光譜測(cè)定
2.3.3 熱重分析
2.3.4 掃描電鏡
2.3.5 壓汞儀測(cè)試
2.4 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
2.4.1 羥基磷灰石粉末的表征
2.4.2 明膠/羥基磷灰石復(fù)合微球的數(shù)碼照片
2.4.3 明膠/羥基磷灰石復(fù)合微球的燒結(jié)工藝制定
2.4.4 多孔羥基磷灰石微球的掃描電鏡分析
2.4.5 多孔羥基磷灰石微球的孔徑分布和孔隙率分析
2.4.6 多孔羥基磷灰石微球的物相分析
2.5 小結(jié)
第三章 載藥微球的體外釋放研究
3.1 引言
3.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
3.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器
3.2.2 布洛芬/羥基磷灰石復(fù)合微球的制備
3.2.3 布洛芬/羥基磷灰石復(fù)合微球的體外模擬釋放
3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
3.3.1 布洛芬的標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制
3.3.2 多孔羥基磷灰石微球的載藥量
3.3.3 布洛芬/羥基磷灰石復(fù)合微球的體外模擬釋放曲線
3.4 小結(jié)
第四章 BMP-2/羥基磷灰石微球復(fù)合材料的生物學(xué)評(píng)價(jià)
4.1 引言
4.2 實(shí)驗(yàn)材料與方法
4.2.1 實(shí)驗(yàn)藥品與儀器
4.2.2 BMP-2 的表達(dá)、純化
4.2.2.1 感受態(tài)細(xì)胞的制備
4.2.2.2 轉(zhuǎn)化
4.2.2.3 誘導(dǎo)目的基因表達(dá)
4.2.2.4 目的蛋白的分離純化
4.2.2.5 目的蛋白檢測(cè)
4.2.3 MG-63 細(xì)胞準(zhǔn)備
4.2.3.1 MG-63 細(xì)胞復(fù)蘇
4.2.3.2 消化MG-63 細(xì)胞
4.2.3.3 細(xì)胞計(jì)數(shù)
4.2.3.4 細(xì)胞傳代
4.2.3.5 細(xì)胞凍存
4.2.4 BMP-2/HA 復(fù)合微球的生物學(xué)評(píng)價(jià)
4.2.4.1 細(xì)胞培養(yǎng)復(fù)合材料的準(zhǔn)備
4.2.4.2 成骨樣細(xì)胞MG-63 的接種
4.2.4.3 堿性磷酸酶(ALP)活性測(cè)定
4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析
4.3.1 重組BMP-2 的SDS-PAGE 檢測(cè)
4.3.2 微球吸附蛋白量
4.3.3 MG-63 細(xì)胞株的培養(yǎng)
4.3.4 ALP 活性檢測(cè)
4.4 小結(jié)
第五章 結(jié)果與展望
參考文獻(xiàn)
附錄
致謝
【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]多孔羥基磷灰石陶瓷貫通性的控制與改善[J]. 梁列峰,翁杰. 中國生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào). 2006(03)
[2]反相微乳液法制備納米羥基磷灰石及其表征[J]. 朱敏鷹,李紅,李立華,周長忍. 材料導(dǎo)報(bào). 2006(03)
[3]骨組織工程多孔支架材料性質(zhì)及制備技術(shù)[J]. 吳景梅,吳若峰. 化工新型材料. 2004(09)
[4]組織工程三維多孔支架的制備方法和技術(shù)進(jìn)展[J]. 吳林波,丁建東. 功能高分子學(xué)報(bào). 2003(01)
[5]骨形成蛋白載體材料研究進(jìn)展[J]. 王敏,韓金祥. 中國臨床康復(fù). 2003(04)
[6]重組人骨形態(tài)發(fā)生蛋白-2在大腸桿菌中的表達(dá)及純化[J]. 熊紹虎,余 磊,譚海燕,黃 濤,王朝陽,劉大庸,鐘世鎮(zhèn). 第一軍醫(yī)大學(xué)學(xué)報(bào). 2002(05)
[7]生物材料有效性和安全性評(píng)價(jià)的現(xiàn)狀與趨勢(shì)[J]. 張真,盧曉風(fēng). 生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)雜志. 2002(01)
[8]骨折愈合的分子生物學(xué)進(jìn)展[J]. 胡蘊(yùn)玉. 當(dāng)代醫(yī)學(xué). 2002(01)
[9]人骨形成蛋白-2的結(jié)構(gòu)與生物學(xué)活性[J]. 張斌. 國外醫(yī)學(xué)(分子生物學(xué)分冊(cè)). 2001(06)
[10]孔徑可控的多孔羥基磷灰石的制備工藝研究[J]. 姚秀敏,譚壽洪,江東亮. 功能材料與器件學(xué)報(bào). 2001(02)
本文編號(hào):3457831
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