現(xiàn)代社會(huì)心血管疾病的發(fā)病率日益提高,迫切需要開(kāi)發(fā)血管替代物,特別是內(nèi)徑小于6毫米的血管替代物來(lái)替代患病的冠狀動(dòng)脈和膝下血管。目前涉及這種疾病的臨床治療方法是用自體血管或合成材料進(jìn)行手術(shù)置換。然而,小口徑人工血管還未獲得臨床應(yīng)用,主要原因是血栓形成和新生內(nèi)膜增厚使人工血管閉塞。因此原位誘導(dǎo)血管再生的可降解多孔人工血管的研究具有應(yīng)用前景,可實(shí)現(xiàn)自體細(xì)胞長(zhǎng)入及由這些自體細(xì)胞合成并沉積細(xì)胞外基質(zhì)形成生物血管。為了深入解析絲素蛋白在人工血管應(yīng)用上的可行性,我們開(kāi)展了再生絲素蛋白多孔支架體外培養(yǎng)平滑肌細(xì)胞及其細(xì)胞外基質(zhì)（彈性蛋白、膠原蛋白）合成研究。本文中我們利用冷凍干燥法在4%的絲素蛋白溶液質(zhì)量分?jǐn)?shù)以及-20℃的冷凍溫度條件下制備再生絲素蛋白多孔支架,支架內(nèi)部成型良好,孔徑大小在60-200μm。接著研究其在接種平滑肌細(xì)胞后,材料上平滑肌細(xì)胞的增殖、合成細(xì)胞外基質(zhì)（彈性蛋白、膠原蛋白）、細(xì)胞表型的情況以及轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子-β1（TGF-β1）對(duì)細(xì)胞細(xì)胞外基質(zhì)合成和平滑肌細(xì)胞表型的影響。首先,我們采用DNA含量分析法研究了細(xì)胞在多孔支架上的增殖,結(jié)果表明:絲素蛋白多孔膜上血管平滑肌細(xì)胞數(shù)量在1-3周持... 

【文章來(lái)源】：蘇州大學(xué)江蘇省 211工程院校

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【學(xué)位級(jí)別】：碩士

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絲素白多支架截面圖（左邊為200倍放大，右邊為400倍放大）

第二章 血管平滑肌細(xì)胞在絲素蛋白多孔支架內(nèi)的生長(zhǎng)及細(xì)胞特性研究DNA 含量分別從第一周的 0.078μg 和 0.109μg 增加到了第三周的 0.136μg 和 0.142μg，到了第四周，這兩組材料的細(xì)胞 DNA 含量出現(xiàn)了下降，其中未添加 TGF-β1 的材料下降較多；持續(xù)添加 TGF-β1 的材料上細(xì)胞 DNA 含量從第一周到第四周保持增長(zhǎng)的趨勢(shì)，從第一周的 0.102μg 增長(zhǎng)到第四周的 0.147μg，第三周后，細(xì)胞數(shù)量相對(duì)穩(wěn)定。在培養(yǎng)過(guò)程中，持續(xù)添加 TGF-β1 的材料在第一周時(shí) DNA 含量分別為未添加 TGF-β1材料和初始添加 TGF-β1 材料的 1.31 和 0.94 倍，到第四周，這兩個(gè)值分別是 2.63 和1.26 倍，說(shuō)明血管平滑肌細(xì)胞在絲素蛋白多孔支架上可正常生長(zhǎng)與增殖，持續(xù)的TGF-β1 添加對(duì)血管平滑肌細(xì)胞在絲素蛋白多孔支架上的增殖起著促進(jìn)作用，沒(méi)有添加 TGF-β1 材料上的平滑肌細(xì)胞，由于體外的長(zhǎng)時(shí)間培養(yǎng)，活力降低，細(xì)胞無(wú)法繼續(xù)在支架內(nèi)生長(zhǎng)，出現(xiàn)脫落，所以在四周后 DNA 含量出現(xiàn)明顯的額下降，持續(xù)添加TGF-β1 材料上的平滑肌細(xì)胞由于轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子的加入，細(xì)胞活力保持較好，但材料內(nèi)多孔結(jié)構(gòu)復(fù)雜，細(xì)胞增殖后空間減少，在三周后生長(zhǎng)就趨于穩(wěn)定。

圖 2-3 血管平滑肌細(xì)胞 絲素 白多 膜上 成的 性 白免疫 標(biāo)染色 片A: 未添加 TGF-β1 多 支架 B: 始添加 TGF-β1 多 支架 C: 持續(xù)添加 TGF-β1 多 支架（標(biāo)尺：50μm）圖 2-4 性 白免疫 標(biāo)半定量A: 未添加 TGF-β1 材 B: 始添加 TGF-β1 材 C: 持續(xù)添加 TGF-β1 材 （*表 品 間0.05 水平上有顯 性差異、**表 品 間 0.01 水平上有顯 性差異）

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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博士論文
[1]皮/芯結(jié)構(gòu)的絲素/聚己內(nèi)酯纖維及其雙層血管再生支架[D]. 劉桂陽(yáng).蘇州大學(xué) 2015

碩士論文
[1]再生絲素蛋白材料血管細(xì)胞共培養(yǎng)的研究[D]. 郝云霞.蘇州大學(xué) 2016
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