本文關(guān)鍵詞：功能化納米材料的構(gòu)建及其在肝癌早期檢測(cè)中的應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 肝癌在全球常見(jiàn)癌癥中發(fā)病率排在第六位，原發(fā)性肝癌在中國(guó)是最常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，，其死亡率在城市排在第一位，在農(nóng)村排在第二位。通過(guò)手術(shù)可以延長(zhǎng)患者生存時(shí)間，手術(shù)是否有效很大程度上離不開(kāi)及時(shí)準(zhǔn)確的早期診斷。甲胎蛋白（Alpha-fetal protein，AFP）已經(jīng)用于肝癌的臨床診斷，但是它的靈敏性和特異性不高，因此需要一種靈敏性更高的檢測(cè)方法替代傳統(tǒng)方法。 量子點(diǎn)（Quantum dots，QDs）良好的光學(xué)性能和自身優(yōu)點(diǎn)，使其可以作為生物熒光探針，替代傳統(tǒng)有機(jī)熒光染料，近年來(lái)在這方面的研究已經(jīng)取得了一些進(jìn)展。目前，量子點(diǎn)作為極具發(fā)展?jié)摿Φ男滦蜔晒馍锾结�，已受到廣泛關(guān)注。量子點(diǎn)吸收光譜寬，發(fā)射光譜窄而對(duì)稱，通過(guò)調(diào)節(jié)組成和粒徑大小可發(fā)射出不同顏色的熒光，并且具有較高的熒光強(qiáng)度和光穩(wěn)定性等特點(diǎn)，克服了有機(jī)熒光染料的一些不足，有望成為其替代物。人們已經(jīng)在免疫分析、DNA雜交、細(xì)胞成像、生物傳感器、共振能量轉(zhuǎn)移等方面得到了較為成功的探索與嘗試。因此，本研究的目的就是通過(guò)構(gòu)建量子點(diǎn)CdTe-AFP抗體熒光探針來(lái)實(shí)現(xiàn)對(duì)肝癌的早期檢測(cè)。 方法 ⑴合成谷胱甘肽（Glutathione，GSH）包被的量子點(diǎn)CdTe。 ⑵對(duì)量子點(diǎn)CdTe進(jìn)行物化表征，透射電鏡、紅外光譜、熒光光譜、紫外-可見(jiàn)光吸收光譜等。 ⑶采用MTT、RTCA、細(xì)胞周期、AO染色方法檢測(cè)量子點(diǎn)的細(xì)胞毒性。 ⑷對(duì)細(xì)胞進(jìn)行標(biāo)記，檢測(cè)量子點(diǎn)CdTe的熒光標(biāo)記效果。 ⑸將量子點(diǎn)CdTe與AFP抗體及牛血清白蛋白-v（Bovine serum albumin-v，BSA-v）偶聯(lián)，構(gòu)建熒光探針，并通過(guò)測(cè)試熒光光譜、SDS-PAGE電泳等檢測(cè)連接效果。 ⑹用熒光探針對(duì)肝細(xì)胞成像。 ⑺用熒光探針檢測(cè)血清和細(xì)胞培養(yǎng)液中的AFP含量，并與臨床上現(xiàn)在使用的化學(xué)發(fā)光方法的檢測(cè)結(jié)果對(duì)比。 結(jié)果 ⑴得到了多種不同熒光的水溶性量子點(diǎn)CdTe。 ⑵得到了QDs-CdTe-AFP和QDs-CdTe-BSA-v熒光探針。 ⑶濃度在5μmol/L下的量子點(diǎn)CdTe對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)影響不大。 ⑷合成的熒光探針可用于肝細(xì)胞成像。 ⑸采用熒光探針檢測(cè)AFP更為靈敏。 結(jié)論 本研究通過(guò)水相合成法合成了GSH包被的量子點(diǎn)CdTe，構(gòu)建了QDs-CdTe-AFP和QDs-CdTe-BSA-v探針，并用于了肝癌早期檢測(cè)。探針檢測(cè)比化學(xué)發(fā)光分析方法更為靈敏。這些研究表明熒光探針在肝癌早期診斷中具有潛在價(jià)值，值得進(jìn)一步深入探究。
【關(guān)鍵詞】：量子點(diǎn) 谷胱甘肽 肝癌 早期檢測(cè) 甲胎蛋白
【學(xué)位授予單位】：寧波大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R735.7;R318.08
【目錄】：

• 摘要4-6
• Abstract6-10
• 引言10-13
• 1 肝癌及量子點(diǎn)13-20
• 1.1 肝癌概述13-14
• 1.1.1 肝癌現(xiàn)狀13
• 1.1.2 肝癌檢測(cè)13-14
• 1.2 量子點(diǎn)的簡(jiǎn)介及物理特性14-17
• 1.2.1 量子點(diǎn)的簡(jiǎn)介14
• 1.2.2 量子點(diǎn)的量子效應(yīng)14-15
• 1.2.3 量子點(diǎn)的光學(xué)性質(zhì)15-17
• 1.3 量子點(diǎn)在腫瘤診斷中的應(yīng)用17-18
• 1.4 本研究的主要內(nèi)容18
• 1.5 本研究的創(chuàng)新點(diǎn)18-19
• 1.6 本研究技術(shù)路線19-20
• 2 量子點(diǎn)的制備及表征20-24
• 2.1 實(shí)驗(yàn)部分20
• 2.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑20
• 2.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器20
• 2.2 水溶性 CdTe 量子點(diǎn)的制備20
• 2.3 CdTe 量子點(diǎn)的表征20-22
• 2.3.1 量子點(diǎn)的透射電鏡（TEM）圖譜20-21
• 2.3.2 量子點(diǎn)光學(xué)性能表征21-22
• 2.3.3 量子點(diǎn)的紅外測(cè)試22
• 2.4 小結(jié)22-24
• 3 量子點(diǎn)抗體探針的制備與純化24-29
• 3.1 試劑與儀器24
• 3.1.1 試劑24
• 3.1.2 儀器24
• 3.2 量子點(diǎn)抗體熒光探針的制備與純化24-28
• 3.2.1 量子點(diǎn)抗體熒光探針的制備24-25
• 3.2.2 量子點(diǎn)抗體熒光探針的純化與檢測(cè)25-26
• 3.2.3 偶聯(lián)結(jié)果與分析26-28
• 3.3 小結(jié)28-29
• 4 量子點(diǎn)及探針的毒性檢測(cè)29-35
• 4.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器29
• 4.1.1 試劑29
• 4.1.2 儀器29
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法29-31
• 4.2.1 RTCA 技術(shù)檢測(cè)量子點(diǎn)的體外毒性29-30
• 4.2.2 MTT 方法驗(yàn)證量子點(diǎn)對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)的影響30
• 4.2.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞周期的變化30-31
• 4.2.4 AO 染色31
• 4.3 量子點(diǎn)的毒性檢測(cè)實(shí)驗(yàn)結(jié)果31-34
• 4.3.1 RTCA 結(jié)果與分析31-32
• 4.3.2 MTT 進(jìn)一步驗(yàn)證 QDsCdTe 對(duì)細(xì)胞毒性的影響32-33
• 4.3.3 流式細(xì)胞儀檢測(cè)量子點(diǎn) CdTe 對(duì)細(xì)胞周期的影響33
• 4.3.4 AO 染色33-34
• 4.4 小結(jié)34-35
• 5 量子點(diǎn)標(biāo)記35-38
• 5.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器35
• 5.1.1 試劑35
• 5.1.2 儀器35
• 5.2 實(shí)驗(yàn)方法35-36
• 5.2.1 成像35
• 5.2.2 流式檢測(cè)35-36
• 5.3 量子點(diǎn)標(biāo)記結(jié)果36-37
• 5.3.1 熒光顯微鏡成像36
• 5.3.2 激光共聚焦成像36-37
• 5.3.3 流式檢測(cè)37
• 5.4 小結(jié)37-38
• 6 在肝癌診斷中的應(yīng)用38-42
• 6.1 實(shí)驗(yàn)試劑與儀器38
• 6.1.1 試劑38
• 6.1.2 儀器38
• 6.2 肝癌細(xì)胞的模擬實(shí)驗(yàn)38
• 6.3 細(xì)胞培養(yǎng)上清和血清檢測(cè)38-39
• 6.3.1 細(xì)胞培養(yǎng)上清檢測(cè)38-39
• 6.3.2 血清檢測(cè)39
• 6.4 檢測(cè)結(jié)果與分析39-41
• 6.4.1 熒光成像39
• 6.4.2 激光共聚焦成像39-40
• 6.4.3 細(xì)胞培養(yǎng)液上清檢測(cè)結(jié)果40
• 6.4.4 血清檢測(cè)結(jié)果40-41
• 6.5 小結(jié)41-42
• 7 總結(jié)與展望42-43
• 參考文獻(xiàn)43-47
• 附錄 A 縮略詞47-48
• 附錄 B 綜述48-60
• 參考文獻(xiàn)56-60
• 在學(xué)研究成果60-61
• 致謝61

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前4條

1 陳良冬;李雁;袁宏銀;龐代文;;量子點(diǎn)在腫瘤研究中的應(yīng)用[J];癌癥;2006年05期

2 宋國(guó)利,楊幼桐,孫凱霞,陳保久,劉慧英;量子點(diǎn)的電子結(jié)構(gòu)及量子效應(yīng)[J];黑龍江大學(xué)自然科學(xué)學(xué)報(bào);2002年01期

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4 徐海峰;楊華瑜;張宏冰;毛一雷;;改變肝癌早期診斷和治療現(xiàn)狀的新肝癌血清標(biāo)志物[J];基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)與臨床;2008年01期

  本文關(guān)鍵詞：功能化納米材料的構(gòu)建及其在肝癌早期檢測(cè)中的應(yīng)用，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：336930