發(fā)布時(shí)間：2017-04-27 13:14

  本文關(guān)鍵詞：一種具有原位血管再生潛能的小口徑肝素化血管移植物的制備，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：心血管疾�。–ardiovascular disease，CVD）是世界上發(fā)病率和死亡率最高的疾病之一，嚴(yán)重影響人類的健康。近年來隨著我國人口的老齡化和居民飲食結(jié)構(gòu)的改變，心血管疾病的發(fā)病率更是呈逐年上升趨勢(shì)。血管移植術(shù)是目前有效治療心血管疾病的手段，臨床上應(yīng)用的血管移植物主要有二個(gè)來源：自體血管和人工組織工程血管。雖然自體血管是最理想的血管移植物，但是常由于患者自身病變以及來源有限等不能滿足臨床需求，商品化的人工血管口徑較大（＞6mm），且易形成血栓，不能滿足冠狀動(dòng)脈以及周圍動(dòng)脈小口徑血管的要求。因此尋求一種機(jī)械性能和生物性能俱佳的血管支架材料日益成為研究者關(guān)注的熱點(diǎn)。為此本研究利用人新生兒臍動(dòng)脈為原材料，通過酶-去污劑去細(xì)胞技術(shù)進(jìn)行去細(xì)胞處理，制備去細(xì)胞血管支架。然后通過交聯(lián)劑EDC和NHS，將肝素共價(jià)結(jié)合在去細(xì)胞血管支架上，制備出生物力學(xué)和血液相容性俱佳的肝素化血管支架。 方法：1.以新生兒臍動(dòng)脈為血管材料，通過酶-去污劑去細(xì)胞技術(shù)，制備去細(xì)胞血管支架。通過HE染色、Hoechst染色觀察去細(xì)胞血管支架細(xì)胞的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)。2.通過交聯(lián)劑EDC和NHS，將肝素以共價(jià)鍵的形式結(jié)合在去細(xì)胞血管支架上，制備肝素化血管支架。并通過甲苯胺藍(lán)染色和傅里葉變換衰減全反射紅外光譜分析（ATR-FTIR）來評(píng)價(jià)肝素化血管支架的肝素負(fù)載情況。3.通過HE染色、Masson三色染色和VG染色觀察天然臍動(dòng)脈、去細(xì)胞血管支架和肝素化血管支架的形態(tài)學(xué)結(jié)構(gòu)變化；通過掃描電鏡檢測(cè)三種血管支架的內(nèi)腔表面的超微結(jié)構(gòu)形態(tài)；通過對(duì)膠原蛋白和蛋白多糖含量的測(cè)定來評(píng)價(jià)肝素化血管支架對(duì)血管基質(zhì)的保留情況；通過對(duì)生物力學(xué)的測(cè)定來評(píng)價(jià)三種血管支架機(jī)械強(qiáng)度和順應(yīng)性的變化。4.分別通過血小板黏附試驗(yàn)和動(dòng)靜脈分流試驗(yàn)（AV-shunt），觀察肝素化血管支架分別在體外和體內(nèi)情況下的血液相容性。結(jié)果：1. HE染色、Hoechst染色發(fā)現(xiàn)，去細(xì)胞血管支架，不僅完全將血管中的細(xì)胞成分去除，而且血管基質(zhì)結(jié)構(gòu)保留完整，形態(tài)保持良好。2.甲苯胺藍(lán)染色結(jié)果發(fā)現(xiàn)肝素沿著ECM中的纖維走向分布，，表明肝素結(jié)合在血管支架基質(zhì)纖維的表面；肝素化血管支架ATR-FTIR圖譜中出現(xiàn)了肝素分子的特征性吸收峰，并且酰胺鍵的吸收峰值變強(qiáng)，表明肝素已成功以共價(jià)鍵的形式固定在了血管支架上。3. HE染色、Masson三色染色和VG染色結(jié)果表明肝素化血管支架膠原纖維和彈力纖維均得到很好的保留；掃描電鏡檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，去細(xì)胞血管支架經(jīng)肝素化處理以后，內(nèi)腔表面由多孔樣結(jié)構(gòu)重新變得光滑；在對(duì)膠原蛋白和蛋白多糖含量的測(cè)定結(jié)果發(fā)現(xiàn)肝素化血管支架較好地保留了天然血管ECM的主要成分膠原蛋白和蛋白多糖；通過對(duì)三種血管支架爆破強(qiáng)度和拉伸曲線的檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)肝素化血管支架生物力學(xué)性能相比去細(xì)胞血管支架得到很大程度的優(yōu)化。4.在血小板黏附試驗(yàn)中，肝素化血管支架相比去細(xì)胞血管支架能顯著地降低表面血小板的黏附和活化；在動(dòng)靜脈分流活體實(shí)驗(yàn)中得到與血小板黏附試驗(yàn)相一致的結(jié)果，并且對(duì)動(dòng)靜脈分流后血管支架血栓面積的統(tǒng)計(jì)表明，肝素化血管支架的血栓面積百分比遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于去細(xì)胞血管支架，更能直觀地說明肝素化血管支架在活體實(shí)驗(yàn)情況下能有效地抑制血栓形成。 結(jié)論：1.通過酶-去污劑去細(xì)胞方法，成功制備去細(xì)胞血管支架，血管基質(zhì)形態(tài)和結(jié)構(gòu)保留完整。2.成功制備出以共價(jià)鍵結(jié)合的肝素化血管支架。3.肝素化血管支架，保留了天然血管基質(zhì)的復(fù)雜的三維結(jié)構(gòu)和胞外基質(zhì)成分，并且其生物力學(xué)性能相比去細(xì)胞血管支架得到很大程度的優(yōu)化，滿足血管移植物的要求。4.肝素化血管支架在體外實(shí)驗(yàn)和活體實(shí)驗(yàn)均能抑制血栓的形成，具有良好的血液相容性，為臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：血管移植 小口徑組織工程血管 去細(xì)胞血管支架 肝素化血管支架 抗血栓形成
【學(xué)位授予單位】：吉林大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 前言4-7
• 摘要7-9
• Abstract9-11
• 英文縮略詞表11-15
• 第1章 文獻(xiàn)綜述15-23
• 1.1 引言15
• 1.2 支架材料與制備方法15-21
• 1.2.1 可降解人工聚合物支架15-16
• 1.2.2 天然生物材料支架16-17
• 1.2.3 細(xì)胞膜片17-18
• 1.2.4 去細(xì)胞血管支架18-19
• 1.2.5 新型的仿生材料19
• 1.2.6 支架材料的表面修飾19-21
• 1.3 總結(jié)和展望21-23
• 第2章 實(shí)驗(yàn)研究23-51
• 第1節(jié) 去細(xì)胞血管支架的制備以及組織形態(tài)學(xué)鑒定23-27
• 1.1 實(shí)驗(yàn)材料23-24
• 1.2 實(shí)驗(yàn)方法24-25
• 1.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果25-27
• 第2節(jié) 肝素化臍動(dòng)脈血管支架的制備以及理化性質(zhì)鑒定27-32
• 2.1 實(shí)驗(yàn)材料27
• 2.2 實(shí)驗(yàn)方法27-30
• 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果30-32
• 第3節(jié) 肝素化血管支架理化性質(zhì)及機(jī)械性能的實(shí)驗(yàn)研究32-42
• 3.1 實(shí)驗(yàn)材料32-33
• 3.2 實(shí)驗(yàn)方法33-37
• 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果37-42
• 第4節(jié) 肝素化血管支架抗血栓形成功能的實(shí)驗(yàn)研究42-51
• 4.1 實(shí)驗(yàn)材料42-43
• 4.2 實(shí)驗(yàn)方法43-46
• 4.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果46-51
• 第3章 討論51-59
• 3.1 去細(xì)胞臍動(dòng)脈血管支架的制備以及組織形態(tài)學(xué)鑒定51-52
• 3.2 肝素化血管支架的制備以及理化性質(zhì)鑒定52-54
• 3.3 肝素化血管支架的理化性質(zhì)及機(jī)械性能的測(cè)定54-56
• 3.4 肝素化血管支架具有抗血栓形成作用56-59
• 第4章 結(jié)論59-60
• 參考文獻(xiàn)60-69
• 作者簡(jiǎn)介及在校期間所獲科研成果69-70
• 致謝70

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 吳春根;方寧濤;潘鑾鳳;;人臍動(dòng)脈脫細(xì)胞支架的制備及其生物相容性[J];中國組織工程研究與臨床康復(fù);2007年26期

  本文關(guān)鍵詞：一種具有原位血管再生潛能的小口徑肝素化血管移植物的制備，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：330688