本文關(guān)鍵詞：間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合明膠微冰膠材料對(duì)皮膚損傷治療的可行性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目標(biāo)：研究人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞(ADSCs)與明膠微冰膠材料體外聯(lián)合培養(yǎng)時(shí),材料是否能維持間充質(zhì)干細(xì)胞的生物學(xué)特性。方法:ADSCs種植于明膠微冰膠材料后進(jìn)行Calcein-AM和PI活細(xì)胞染色檢測(cè)細(xì)胞活力,細(xì)胞滴度藍(lán)法檢測(cè)細(xì)胞增殖能力,定量PCR檢測(cè)干性基因OCT4、Nanog、SOX2表達(dá)情況,以及在成脂成骨誘導(dǎo)過程比較ADSCs在普通環(huán)境和種植于明膠微冰膠材料后分化潛能。結(jié)果:ADSCs在三維明膠微冰膠支架材料中能保持較高活性,增殖能力不受影響,干性基因表達(dá)上調(diào),但成脂成骨分化相關(guān)基因表達(dá)水平比普通誘導(dǎo)環(huán)境低。結(jié)論：明膠微冰膠可以為ADSCs提供一個(gè)較二維培養(yǎng)更好的微環(huán)境,有利于ADSCs體外干性維持,從而在干細(xì)胞移植法治療相關(guān)疾病時(shí)以非侵入性的細(xì)胞傳遞方式發(fā)揮更長(zhǎng)期的應(yīng)用價(jià)值。目標(biāo)：研究間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合三維可降解明膠微冰膠支架材料能否提高ADSCs對(duì)皮膚損傷的治療效果。方法：裸鼠制作成全厚皮膚切割傷模型,按背部皮膚正方形創(chuàng)面上注射細(xì)胞或材料不同隨機(jī)分成四組：未處理陰性對(duì)照組(sham)、細(xì)胞組(ADSCs)、材料組(GMs)、細(xì)胞+明膠微冰膠組(ADSCs+GMs),觀察創(chuàng)傷愈合情況。Real-time PCR、Western blot和ELISA檢測(cè)組織勻漿生長(zhǎng)因子VEGF、HGF、 PDGFbb、bFGF、EGF基因和蛋白表達(dá)情況,活體成像實(shí)驗(yàn)和抗人細(xì)胞核免疫熒光染色追蹤細(xì)胞體內(nèi)存活和停留情況,HE染色觀察皮膚創(chuàng)傷組織表皮和真皮愈合質(zhì)量,免疫組化染色PCNA和CK14檢測(cè)真皮和表皮再生情況,GFP陽性ADSCs和CK5、Hsp47、NG2和CD31共定位檢測(cè)細(xì)胞是否通過轉(zhuǎn)分化成皮膚角質(zhì)細(xì)胞、成纖維細(xì)胞、周細(xì)胞和血管內(nèi)皮細(xì)胞修復(fù)損傷。結(jié)果：ADSCs+GMs組皮膚創(chuàng)傷愈合優(yōu)于ADSCs組、GMs組和sham組。創(chuàng)傷皮膚組織中生長(zhǎng)因子VEGF、HGF、bFGF、EGF、PDGFbb表達(dá)量隨時(shí)間不同程度上調(diào),ADSCs+GMs組高于其他各組,ADSCs+GMs組的細(xì)胞在裸鼠組織中存活和停留時(shí)間較ADSCs組更好,ADSCs+GMs組創(chuàng)傷組織表皮和真皮再生能力較其他各組更好,血管形成數(shù)量更多。結(jié)論：ADSCs和明膠微冰膠支架二者聯(lián)合應(yīng)用時(shí),明膠微冰膠支架為ADSCs功能發(fā)揮提供了一個(gè)更好的環(huán)境因素,主要通過延長(zhǎng)ADSCs原位存活停留時(shí)間和促進(jìn)ADSCs旁分泌能,在干細(xì)胞移植治療皮膚損傷時(shí)發(fā)揮更好的應(yīng)用價(jià)值。
【關(guān)鍵詞】：人脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 明膠微冰膠 脂肪間充質(zhì)干細(xì)胞 明膠微冰膠 裸鼠皮膚損傷模型
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 第一部分 明膠微冰膠支架有利于脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞體外干性維持并提高其體內(nèi)應(yīng)用價(jià)值4-18
• 中文摘要4
• Abstract4-5
• 前言5-6
• 材料和方法6-13
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果13-16
• 討論16-17
• 結(jié)論17
• 參考文獻(xiàn)17-18
• 第二部分 人脂肪來源間充質(zhì)干細(xì)胞和明膠微冰膠支架以輸注方式傳遞到體內(nèi)可提高裸鼠外科皮膚創(chuàng)傷愈合效果18-47
• 中文摘要18-19
• Abstract19-20
• 前言20-22
• 材料和方法22-33
• 實(shí)驗(yàn)結(jié)果33-42
• 討論42-44
• 結(jié)論44
• 參考文獻(xiàn)44-47
• 第三部分 論文綜述 干細(xì)胞分化的表觀遺傳調(diào)控47-58
• 中文摘要47
• 英文摘要47-48
• 一、表觀遺傳學(xué)概念和內(nèi)容48-51
• 二、表觀遺傳學(xué)和干細(xì)胞分化的關(guān)系51-54
• 三、DNA甲基化和組蛋白修飾之間的相互作用54-56
• 參考文獻(xiàn)56-58
• 附錄58-59
• 致謝59-60

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  本文關(guān)鍵詞：間充質(zhì)干細(xì)胞聯(lián)合明膠微冰膠材料對(duì)皮膚損傷治療的可行性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：319985