本文關鍵詞：間充質干細胞聯(lián)合明膠微冰膠材料對皮膚損傷治療的可行性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目標：研究人脂肪來源間充質干細胞(ADSCs)與明膠微冰膠材料體外聯(lián)合培養(yǎng)時,材料是否能維持間充質干細胞的生物學特性。方法:ADSCs種植于明膠微冰膠材料后進行Calcein-AM和PI活細胞染色檢測細胞活力,細胞滴度藍法檢測細胞增殖能力,定量PCR檢測干性基因OCT4、Nanog、SOX2表達情況,以及在成脂成骨誘導過程比較ADSCs在普通環(huán)境和種植于明膠微冰膠材料后分化潛能。結果:ADSCs在三維明膠微冰膠支架材料中能保持較高活性,增殖能力不受影響,干性基因表達上調(diào),但成脂成骨分化相關基因表達水平比普通誘導環(huán)境低。結論：明膠微冰膠可以為ADSCs提供一個較二維培養(yǎng)更好的微環(huán)境,有利于ADSCs體外干性維持,從而在干細胞移植法治療相關疾病時以非侵入性的細胞傳遞方式發(fā)揮更長期的應用價值。目標：研究間充質干細胞聯(lián)合三維可降解明膠微冰膠支架材料能否提高ADSCs對皮膚損傷的治療效果。方法：裸鼠制作成全厚皮膚切割傷模型,按背部皮膚正方形創(chuàng)面上注射細胞或材料不同隨機分成四組：未處理陰性對照組(sham)、細胞組(ADSCs)、材料組(GMs)、細胞+明膠微冰膠組(ADSCs+GMs),觀察創(chuàng)傷愈合情況。Real-time PCR、Western blot和ELISA檢測組織勻漿生長因子VEGF、HGF、 PDGFbb、bFGF、EGF基因和蛋白表達情況,活體成像實驗和抗人細胞核免疫熒光染色追蹤細胞體內(nèi)存活和停留情況,HE染色觀察皮膚創(chuàng)傷組織表皮和真皮愈合質量,免疫組化染色PCNA和CK14檢測真皮和表皮再生情況,GFP陽性ADSCs和CK5、Hsp47、NG2和CD31共定位檢測細胞是否通過轉分化成皮膚角質細胞、成纖維細胞、周細胞和血管內(nèi)皮細胞修復損傷。結果：ADSCs+GMs組皮膚創(chuàng)傷愈合優(yōu)于ADSCs組、GMs組和sham組。創(chuàng)傷皮膚組織中生長因子VEGF、HGF、bFGF、EGF、PDGFbb表達量隨時間不同程度上調(diào),ADSCs+GMs組高于其他各組,ADSCs+GMs組的細胞在裸鼠組織中存活和停留時間較ADSCs組更好,ADSCs+GMs組創(chuàng)傷組織表皮和真皮再生能力較其他各組更好,血管形成數(shù)量更多。結論：ADSCs和明膠微冰膠支架二者聯(lián)合應用時,明膠微冰膠支架為ADSCs功能發(fā)揮提供了一個更好的環(huán)境因素,主要通過延長ADSCs原位存活停留時間和促進ADSCs旁分泌能,在干細胞移植治療皮膚損傷時發(fā)揮更好的應用價值。
【關鍵詞】：人脂肪間充質干細胞 明膠微冰膠 脂肪間充質干細胞 明膠微冰膠 裸鼠皮膚損傷模型
【學位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學院
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 第一部分 明膠微冰膠支架有利于脂肪來源間充質干細胞體外干性維持并提高其體內(nèi)應用價值4-18
• 中文摘要4
• Abstract4-5
• 前言5-6
• 材料和方法6-13
• 實驗結果13-16
• 討論16-17
• 結論17
• 參考文獻17-18
• 第二部分 人脂肪來源間充質干細胞和明膠微冰膠支架以輸注方式傳遞到體內(nèi)可提高裸鼠外科皮膚創(chuàng)傷愈合效果18-47
• 中文摘要18-19
• Abstract19-20
• 前言20-22
• 材料和方法22-33
• 實驗結果33-42
• 討論42-44
• 結論44
• 參考文獻44-47
• 第三部分 論文綜述 干細胞分化的表觀遺傳調(diào)控47-58
• 中文摘要47
• 英文摘要47-48
• 一、表觀遺傳學概念和內(nèi)容48-51
• 二、表觀遺傳學和干細胞分化的關系51-54
• 三、DNA甲基化和組蛋白修飾之間的相互作用54-56
• 參考文獻56-58
• 附錄58-59
• 致謝59-60

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