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鈦離子對T細胞內(nèi)鈣離子濃度影響的研究

發(fā)布時間:2017-04-20 07:19

  本文關(guān)鍵詞:鈦離子對T細胞內(nèi)鈣離子濃度影響的研究,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:目的:觀察鈦離子對T細胞內(nèi)鈣離子濃度和分布變化,三磷酸肌醇(IP3)的表達和磷脂酶Cγ1 (PLCγ1)表達及其磷酸化水平的影響,探討鈦離子對T細胞內(nèi)鈣離子濃度及鈣通道上IP3、PLCγ1蛋白的影響。方法:1、培養(yǎng)JukatT細胞,MTT比色法檢測鈦離子使T細胞增殖率為50%、95%的濃度,并選擇最大增殖率的濃度和中間的離子濃度,作為實驗組濃度。2、將Juka T細胞用植物血凝素(PHA)預(yù)先活化或不活化,然后與不同濃度的鈦離子共培養(yǎng),激光共聚焦顯微鏡檢測T細胞在24小時胞內(nèi)鈣離子含量和分布變化表達,酶聯(lián)免疫吸附劑測定CELLSA)檢測24小時IP3蛋白表達量,蛋白免疫印跡法(WB)檢測24小時細胞內(nèi)PLC]1蛋白表達水平及其磷酸化水平。結(jié)果:1、鈦離子濃度低于100μM/L時,可活化增殖T細胞,隨濃度增加,增殖率上升;濃度在100-200μM/L之間時,增殖率下降,濃度大于200pM/L時,細胞呈抑制增殖。細胞的增殖率為50%、95%的濃度分別是5μM/L、10μM/L,最大增殖率時濃度為100gM/L,中間濃度為50μM/L。2、濃度為5μM/L,10μM/L,50μM/L, 100μM/L的鈦離子,在含Ca2+的細胞外液中,可使活化和未活化的細胞內(nèi)的Ca2+濃度上升,且活化后的細胞內(nèi)的Ca2+濃度上升更顯著,與對照組比較,差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)在無Ca2+的細胞外液中,活化和未活化的細胞內(nèi)的Ca2十濃度未見明顯變化,與對照組比較,差異均無統(tǒng)計學(xué)意義(P0.05)。3、濃度為5μM/L,10μM/L,50μM/L,,100μM/L的鈦離子,作用活化的T細胞24小時,細胞內(nèi)IP3表達上調(diào),與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。不同濃度之間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。未活化的細胞,鈦離子作用后,細胞內(nèi)IP3表達下降,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。不同濃度之間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。4、濃度為5μM/L,10μM/L,50μM/L的鈦離子,作用活化的T細胞24小時,細胞內(nèi)PLCγ1的磷酸化水平上升,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05):不同濃度之間比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。未活化的細胞,鈦離子作用后,PLCγ1的磷酸化水平下降,與對照組比較,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。結(jié)論:1、鈦離子濃度低于100μM/L時,可活化增殖T細胞。2、鈦離子可使活化的T細胞內(nèi)的Ca2+濃度、IP3表達增加及PLCγ1磷酸化水平升高。
【關(guān)鍵詞】:鈦離子 T細胞 Ca~(2+) IP_3 PLCγ1
【學(xué)位授予單位】:廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2015
【分類號】:R783.1
【目錄】:
  • 個人簡歷4-6
  • 主要英文縮寫詞索引6-7
  • 摘要7-9
  • ABSTRACT9-12
  • 前言12-14
  • 實驗一 鈦離子對T細胞增殖活性的影響14-22
  • 1.材料和方法14-16
  • 2.結(jié)果16-18
  • 3.討論18-21
  • 4.結(jié)論21-22
  • 實驗二 鈦離子對T細胞胞內(nèi)游離Ca~(2+)的影響22-28
  • 1.材料和方法22-24
  • 2.結(jié)果24-26
  • 3.討論26-27
  • 4.結(jié)論27-28
  • 實驗三 鈦離子對T細胞內(nèi)IP_3和PLC γ1表達的影響28-41
  • 1.材料和方法28-32
  • 2.結(jié)果32-35
  • 3.討論35-40
  • 4.結(jié)論40-41
  • 全文小結(jié)41-42
  • 參考文獻42-47
  • 文獻綜述47-64
  • 參考文獻56-64
  • 致謝64-65
  • 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文65

【參考文獻】

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  本文關(guān)鍵詞:鈦離子對T細胞內(nèi)鈣離子濃度影響的研究,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。



本文編號:318184

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