本文關(guān)鍵詞：不同孔徑絲素蛋白的體內(nèi)降解與宿主組織反應(yīng)關(guān)系的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的： 本實(shí)驗(yàn)通過大鼠皮下埋植的方法對(duì)不同孔徑絲素蛋白材料的體內(nèi)降解行為進(jìn)行研究,了解不同孔徑絲素蛋白材料在體內(nèi)降解過程中的組織形態(tài)學(xué)變化以及宿主的分子生物學(xué)改變,以期發(fā)現(xiàn)不同孔徑絲素蛋白支架影響降解速率的可能機(jī)制,為多孔絲素蛋白材料應(yīng)用于臨床奠定實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。 材料與方法： 1.制備兩種多孔絲素蛋白支架,小孔徑支架(SF-S)平均孔徑為74.35±10.84μm、平均孔隙率為94.2±0.1%；大孔徑支架(SF-L)平均孔徑為139.23±44.93μm,平均孔隙率為96.6±0.1%。 2.選用140-150g S-D大鼠27只,實(shí)驗(yàn)組(共21只)全麻下在其背部脊柱兩側(cè)約1cm處皮膚各作1個(gè)長約1.5cm的切口,向腹側(cè)潛行分離約3cm,每只大鼠形成2個(gè)皮下囊狀間隙,分別將SF-S、SF-L植入左、右兩個(gè)皮囊,對(duì)照組(共6只)行相同手術(shù)但不植入材料,以4-0可吸收縫線關(guān)閉皮膚切口。 3.術(shù)后選取l、4、12周三個(gè)觀測時(shí)間點(diǎn),隨機(jī)取材,分別進(jìn)行一般情況及大體觀察、HE染色、Masson染色觀察組織學(xué)表現(xiàn),Real-time RT-PCR法檢測致炎性因子(IL-1β、IL-6、TNF-α)、免疫調(diào)節(jié)因子(IL-10)致纖維化因子(TGF-β1)、促血管形成因子(VEGF)的mRNA表達(dá)量。 結(jié)果： 1.高孔隙率(90%時(shí))的不同孔徑多孔絲素蛋白支架材料體內(nèi)降解速度不同。在觀察期內(nèi)早期大孔徑的降解速度較小孔徑快,但之后出現(xiàn)微孔塌陷、孔徑變小,12周之后的降解有待進(jìn)一步研究。 2.絲素支架植入后引起宿主一系列組織形態(tài)學(xué)變化：早期,主要為以淋巴細(xì)胞、巨噬細(xì)胞為主的炎性細(xì)胞浸潤、新生血管增生,成纖維細(xì)國家自然科學(xué)基金項(xiàng)目(No.81271094)第1頁胞增殖形成整齊有序的纖維包囊；晚期,以成纖維細(xì)胞明顯增殖為特征,形成更厚的纖維包囊和成纖維細(xì)胞帶,且大孔徑組成纖維細(xì)胞增殖量更多,周圍組織炎性細(xì)胞減少,僅在材料降解明顯處有局灶性炎性細(xì)胞聚集,血管數(shù)量減少,并趨于成熟。 3.多孔絲素支架植入體內(nèi)1周、4周時(shí),炎性因子、致纖維化因子及促血管形成因子mRNA表達(dá)量均增加,與組織學(xué)觀察到的炎性細(xì)胞浸潤、成纖維細(xì)胞增殖、血管明顯新生及材料無明顯降解的現(xiàn)象相吻合；12周時(shí)兩組各種因子mRNA表達(dá)量均較前有所減少,與材料周圍炎癥細(xì)胞浸潤明顯減輕及血管數(shù)量減少的組織學(xué)表現(xiàn)相吻合。 4.12周時(shí)大孔徑組致纖維化因子、炎性因子mRNA表達(dá)量大于小孔徑組,與此時(shí)大孔徑組成纖維細(xì)胞帶寬于小孔徑組、帶內(nèi)降解明顯處炎性細(xì)胞尤其異物巨細(xì)胞局灶性聚集的組織學(xué)表現(xiàn)相吻合。此時(shí),殘余材料厚度明顯小于小孔徑組,提示成纖維細(xì)胞有可能也參與了材料的降解,并可誘導(dǎo)炎性細(xì)胞的浸潤參與局部材料的降解。 5.無論大孔徑組還是小孔徑組,增生的成纖維細(xì)胞隨著材料的降解逐步長入材料內(nèi)部,而在材料與宿主交界處呈有序排列極性生長。 6.139.23±44.93μ m孔徑的絲素蛋白體內(nèi)降解速度與細(xì)胞因子IL-1β、TNF-α、IL-10、TGF-β1以及VEGF有一定相關(guān)性,其中以TNF-α、TGF-β1相關(guān)性最密切,明顯的材料降解出現(xiàn)在上述因子峰值之后。
【關(guān)鍵詞】：絲素蛋白 孔徑 組織工程 體內(nèi)降解 生物相容性 細(xì)胞因子
【學(xué)位授予單位】：復(fù)旦大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 摘要5-7
• ABSTRACT7-10
• 中英文~.寫10-11
• 引言11-13
• 1 實(shí)驗(yàn)材料13-16
• 1.1 主要儀器及試劑13-16
• 1.1.1 主要儀器13-15
• 1.1.2 主要試劑及耗材15
• 1.1.3 多孔絲素蛋白支架材料15-16
• 1.2 動(dòng)物及分組16
• 2 實(shí)驗(yàn)方法16-23
• 2.1 多孔絲素蛋白材料的制備16-17
• 2.2 多孔絲素蛋白材料基本參數(shù)測定17-18
• 2.2.1 孔徑17-18
• 2.2.2 孔隙率18
• 2.3 麻醉方法18
• 2.4 植入方法18-19
• 2.5 取材方法19-20
• 2.6 術(shù)后觀察及檢測20-23
• 2.6.1 大鼠一般情況及取材情況觀察20
• 2.6.2 蘇木精-伊紅染色(HE)染色20-21
• 2.6.3 Masson三色染色觀察膠原纖維長入材料情況21
• 2.6.4 Real-time RT-PCR法檢測植入材料周圍細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)21-23
• 2.6.5 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理23
• 3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果23-41
• 3.1 大鼠一般情況觀察及取材標(biāo)本情況觀察23-26
• 3.1.1 大鼠一般情況觀察23-24
• 3.1.2 標(biāo)本大體觀察24-26
• 3.2 HE染色結(jié)果26-33
• 3.2.1 組織學(xué)表現(xiàn)26-30
• 3.2.2 數(shù)據(jù)分析30-33
• 3.3 Masson三色染色觀察33-37
• 3.4 Real-time RT-PCR法檢測植入材料周圍細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄水平的表達(dá)37-40
• 3.5 材料降解與細(xì)胞因子轉(zhuǎn)錄水平表達(dá)關(guān)系40-41
• 4 討論41-51
• 4.1 生物材料支架體內(nèi)降解的檢測方法42
• 4.2 孔徑對(duì)多孔絲素蛋白支架體內(nèi)降解的影響42-44
• 4.3 宿主組織反應(yīng)對(duì)多孔絲素蛋白支架降解的影響44-50
• 4.3.1 炎癥細(xì)胞與多孔絲素蛋白支架降解44-45
• 4.3.2 成纖維細(xì)胞在多孔絲素蛋白支架降解過程中的作用45-47
• 4.3.3 細(xì)胞因子與多孔絲素蛋白支架降解47-50
• 4.4 全文總結(jié)50-51
• 5 結(jié)論51-52
• 參考文獻(xiàn)52-57
• 綜述57-66
• 參考文獻(xiàn)62-66
• 致謝66-69
• 發(fā)表論文情況69-70

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1 陳辰;曹傳寶;馬西蘭;唐茵;朱鶴孫;;靜電紡絲絲素蛋白水溶液制備無紡布[J];北京生物醫(yī)學(xué)工程;2007年01期

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3 鄧益斌;季丹;周平;;磁共振技術(shù)在絲素蛋白結(jié)構(gòu)與功能研究中的應(yīng)用[J];波譜學(xué)雜志;2008年04期

4 辛蓮;宋雪慧;董運(yùn)海;李明忠;張煥相;;神經(jīng)元在絲素蛋白材料上的生長發(fā)育[J];蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版);2009年03期

5 王琳婷;朱良均;閔思佳;張海萍;;絲素蛋白在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用研究[J];北方蠶業(yè);2009年03期

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7 秦春英;梁繼文;張鋒;吳佳林;;絲素蛋白在醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用研究[J];輕紡工業(yè)與技術(shù);2010年05期

8 程新;李延報(bào);陸春華;李東旭;許仲梓;;預(yù)處理對(duì)構(gòu)建絲素蛋白纖維/磷灰石仿生骨修復(fù)材料的影響[J];無機(jī)材料學(xué)報(bào);2011年01期

9 黃永利;呂強(qiáng);李明忠;張冰;朱鶴孫;;電場調(diào)控載藥絲素蛋白微球的制備[J];科學(xué)通報(bào);2011年13期

10 李玲玲;周偉;代方銀;梅梟雄;范承啟;楊霞;吳玉章;;不同鈣-醇溶解體系絲素蛋白的制備及表征研究[J];中國生物工程雜志;2012年04期

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1 伊智峰;羅勇悅;陳鷹;彭政;丁麗;李永振;;天然橡膠/桑蠶絲絲素蛋白復(fù)合材料抗菌性能的研究[A];2009年全國高分子學(xué)術(shù)論文報(bào)告會(huì)論文摘要集（下冊）[C];2009年

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3 趙薈菁;李明忠;;小口徑絲素蛋白編織管的制備及性能研究[A];中國生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)成立30周年紀(jì)念大會(huì)暨2010中國生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)會(huì)學(xué)術(shù)大會(huì)壁報(bào)展示論文[C];2010年

4 王琳婷;朱良均;閔思佳;張海萍;;絲素蛋白在生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用研究[A];中國蠶學(xué)會(huì)第六屆青年學(xué)術(shù)研討會(huì)論文集（3）[C];2009年

5 陳芳芳;閔思佳;朱良鈞;;交聯(lián)絲素蛋白凝膠的熱性能分析[A];中國蠶學(xué)會(huì)第四屆青年學(xué)術(shù)研討會(huì)會(huì)議論文集[C];2004年

6 范慰慰;顏若曦;趙東旭;;可溶性絲素蛋白的制備研究[A];第三屆全國化學(xué)工程與生物化工年會(huì)論文摘要集（下）[C];2006年

7 伊智峰;羅勇悅;陳鷹;彭政;丁麗;李永振;;天然橡膠/桑蠶絲絲素蛋白抗菌復(fù)合材料的制備與性能研究[A];2010年全國高分子材料科學(xué)與工程研討會(huì)學(xué)術(shù)論文集（上冊）[C];2010年

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1 浙江理工大學(xué)先進(jìn)紡織材料與制備教育部重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室 陳建勇;銀離子改性絲素蛋白提高織物上染率[N];中國紡織報(bào);2009年

2 本報(bào)記者 郭桂香;脆弱絲織品修復(fù)新添兩種加固方法[N];中國文物報(bào);2009年

3 吳徵宇;編織皮膚經(jīng)緯[N];科技日?qǐng)?bào);2002年

4 本報(bào)記者 陶婷婷 通訊員 段然;高分子無處不在 讓生活更美好[N];上海科技報(bào);2013年

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1 曹正兵;絲素蛋白自組裝行為及其在生物醫(yī)藥方面的應(yīng)用研究[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

2 魏偉;再生絲素蛋白水溶液的干法紡絲及后處理研究[D];東華大學(xué);2011年

3 范純?nèi)?絲素蛋白/納米羥基磷灰石復(fù)合材料的仿生制備及促進(jìn)脊柱融合的實(shí)驗(yàn)研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2010年

4 佘振定;基于絲素蛋白/殼聚糖的肝組織工程支架材料研究[D];清華大學(xué);2009年

5 徐衛(wèi)袁;構(gòu)建骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞/牛骨形態(tài)發(fā)生蛋白/絲素蛋白組織工程骨的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2005年

6 黃福華;絲素蛋白涂層人工血管的研制[D];中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2008年

7 鄭捷;絲素蛋白支架在尿道狹窄重建中的實(shí)驗(yàn)研究[D];復(fù)旦大學(xué);2011年

8 趙勇;仿生合成絲素蛋白/羥基磷灰石復(fù)合支架材料的骨組織工程研究[D];四川大學(xué);2006年

9 關(guān)國平;多孔絲素蛋白材料的血管化及其組織再生性能的研究[D];蘇州大學(xué);2009年

10 徐孝旭;無機(jī)納米粒子/柞蠶絲素復(fù)合膜的制備、結(jié)構(gòu)及性能研究[D];東北大學(xué);2008年

中國碩士學(xué)位論文全文數(shù)據(jù)庫 前10條

1 辛蓮;神經(jīng)元的發(fā)育與絲素蛋白材料結(jié)合的研究[D];蘇州大學(xué);2008年

2 趙亞紅;絲素蛋白導(dǎo)管體內(nèi)外降解行為的研究[D];南通大學(xué);2009年

3 丁云林;兩種絲素蛋白體外構(gòu)建口腔黏膜固有層的初步研究[D];蘇州大學(xué);2012年

4 田娟;絲素蛋白的改性及其在藥物釋放方面的應(yīng)用研究[D];廣西大學(xué);2012年

5 高雅;絲素蛋白電紡膜的制備及其仿生礦化研究[D];昆明醫(yī)科大學(xué);2013年

6 伍冬平;多孔絲素蛋白材料中血管新生模式的研究[D];蘇州大學(xué);2009年

7 朱志軍;雙相磷酸鈣/硫酸鈣/絲素蛋白骨水泥性能研究[D];蘇州大學(xué);2010年

8 張希峰;骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合多孔絲素蛋白體內(nèi)體外的實(shí)驗(yàn)研究[D];蘇州大學(xué);2004年

9 王彪;絲素蛋白/磷酸鈣復(fù)合材料的制備及性能研究[D];蘇州大學(xué);2011年

10 羅敏清;小分子多元醇對(duì)絲素蛋白結(jié)構(gòu)和性能的影響[D];蘇州大學(xué);2011年

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本文編號(hào)：317016