本文關(guān)鍵詞：巰基化殼聚糖衍生物雜化材料及納米藥物載體的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：殼聚糖是自然界已確定的唯一堿性多糖,具有良好的生物相容性、低毒性、可降解性、抗菌性、低免疫原性、性質(zhì)穩(wěn)定等優(yōu)點(diǎn)。對殼聚糖進(jìn)行親水改性可獲得具有兩親性的殼聚糖衍生物,其在水介質(zhì)中能夠自聚集形成納米粒,應(yīng)用于構(gòu)建雜化納米粒子和抗腫瘤藥物載體引起了研究者的極大興趣。 本論文選擇聚乙二醇和聚乙烯亞胺為親水基團(tuán),合成了兩親性殼聚糖衍生物(CS-PEG-PEI),制備了其自聚集納米粒,進(jìn)一步體外評價(jià)了其作為疏水藥物載體的可能性；同時(shí),構(gòu)建了一種低毒性、生物相容性好的殼聚糖基納米金雜化材料,并研究了其生物相容性。主要研究工作如下： 1.合成了不同PEG取代度、不同PEI取代度的殼聚糖衍生物。首先,合成了雙羧基聚乙二醇及部分巰基化聚乙烯亞胺,并進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征。以殼聚糖、雙羧基聚乙二醇和部分巰基化聚乙烯亞胺為原料,通過NHS/EDC催化法分別合成了殼聚糖.PEG衍生物和殼聚糖-PEG-PEI衍生物,通過1H NMR和FT-IR進(jìn)行結(jié)構(gòu)表征,分別探討了殼聚糖-PEG衍生物和殼聚糖-PEG-PEI衍生物合成過程中投料比對各步產(chǎn)物取代度的影響,發(fā)現(xiàn)隨著雙羧基聚乙二醇和部分巰基化聚乙烯亞胺投料比例的增加取代度均增大,得到了一系列殼聚糖衍生物。 2.通過透析法制備了CS-PEG-PEI自聚集納米粒,并利用透射電子顯微鏡(TEM)、掃描電子顯微鏡(SEM)和動態(tài)激光粒度分析儀(DLLS)對納米粒的形態(tài)、粒徑和粒徑分布進(jìn)行了表征。研究結(jié)果表明,制備的CS-PEG-PEI納米粒在水介質(zhì)中能自聚集成納米粒,且該納米粒成球形,粒徑為157.9-233.1nm。通過納米粒理化性質(zhì)的比較分析,優(yōu)選出制備納米粒的最佳殼聚糖衍生物PEG取代度為24%,PEI取代度為3.4%。 3.通過晶種生長法合成金納米棒(GNRs),并通過UV-vis光譜及TEM進(jìn)行了表征。采用兩種方法將CS-PEG-PEI納米粒與GNRs通過Au-S鍵偶聯(lián)：(1)兩者的混合液在探頭超聲作用下進(jìn)行偶聯(lián)得到GNRs鑲嵌于納米粒表面的分散性好、粒徑均一的球形CS-GNRs雜化材料(CS-GNRs),且GNRs與納米粒的結(jié)合率較高；(2)兩者的混合液在攪拌條件下進(jìn)行偶聯(lián),也可得到球形CS-GNRs雜化材料,但是所得到的雜化材料中GNRs結(jié)合率相比于上一種方法低。綜合考慮產(chǎn)物穩(wěn)定性、GNRs結(jié)合率、粒徑等方面,選擇第一種方法制備的雜化材料用于下一步研究。細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)表明未修飾的GNRs在很低濃度便對細(xì)胞表現(xiàn)出了很強(qiáng)的毒性作用,與CS-PEG-PEI納米粒偶聯(lián)后可以有效改善納米金棒的生物相容性。 4.選擇疏水性藥物阿霉素(DOX)作為模型藥物,采用透析法制備了載藥納米粒(CS-DOX),并考察了載藥納米粒的理化性質(zhì)及體外釋放行為。研究結(jié)果表明,CS-DOX納米粒呈球形,隨著藥物與載體投料比的增加,載藥量增加,包封率減小；CS-DOX納米粒在酸性介質(zhì)中對阿霉素的釋放速率大于中性介質(zhì),且具有一定的緩釋作用。CS-PEG-PEI自聚集納米粒及載藥納米粒的體外細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,空白納米粒在濃度為200μg/mL時(shí)仍無明顯細(xì)胞毒性,而載藥納米粒對人宮頸癌細(xì)胞(HeLa細(xì)胞)的生長具有明顯的抑制作用。流式細(xì)胞儀和激光共聚焦顯微鏡研究結(jié)果表明,孵育2h HeLa細(xì)胞對載藥納米粒的攝取強(qiáng)于游離阿霉素,游離阿霉素主要分布于細(xì)胞核,而載藥納米粒則分布在細(xì)胞漿中。
【關(guān)鍵詞】：殼聚糖 金納米棒 自組裝納米粒 雜化材料 藥物載體
【學(xué)位授予單位】：北京協(xié)和醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號】：R318.08
【目錄】：

• 目錄4-6
• 摘要6-8
• Abstract8-10
• 第一章 緒論10-28
• 1.1 殼聚糖在藥物傳遞系統(tǒng)中的應(yīng)用10-15
• 1.1.1 殼聚糖作為化學(xué)藥物載體10-12
• 1.1.2 殼聚糖作為蛋白質(zhì)類藥物載體12-13
• 1.1.3 殼聚糖作為基因載體13-15
• 1.2 納米金雜化材料與生物醫(yī)學(xué)15-20
• 1.2.1 納米金-多糖雜化材料16-17
• 1.2.2 納米金-核酸雜化材料17-18
• 1.2.3 納米金-蛋白雜化材料18-19
• 1.2.4 納米金其他雜化材料19-20
• 1.3 課題的提出及研究思路20-21
• 1.3.1 課題的提出20
• 1.3.2 研究思路20-21
• 參考文獻(xiàn)21-28
• 第二章 巰基化殼聚糖衍生物自組裝納米球的制備與表征28-39
• 2.1 前言28-29
• 2.2 實(shí)驗(yàn)部分29-32
• 2.2.1 試劑29
• 2.2.2 儀器和設(shè)備29-30
• 2.2.3 聚乙二醇基殼聚糖(CS-PEG)的合成30-31
• 2.2.4 殼聚糖-PEG-PEI衍生物(CS-PEG-PEI)的合成31
• 2.2.5 自組裝納米球的制備31
• 2.2.6 產(chǎn)物的表征31-32
• 2.3 結(jié)果與討論32-36
• 2.3.1 殼聚糖衍生物的~1H核磁共振表征32-33
• 2.3.2 殼聚糖衍生物的FT-IR表征33-34
• 2.3.3 殼聚糖衍生物中PEI取代度的計(jì)算34-35
• 2.3.4 殼聚糖衍生物納米球的制備與表征35-36
• 2.4 小結(jié)36-37
• 參考文獻(xiàn)37-39
• 第三章 殼聚糖基納米金雜化材料制備與表征39-51
• 3.1 前言39
• 3.2 實(shí)驗(yàn)部分39-42
• 3.2.1 試劑39-40
• 3.2.2 儀器和設(shè)備40
• 3.2.3 金納米棒的合成40-41
• 3.2.4 殼聚糖基納米金雜化材料制備41
• 3.2.5 HeLa細(xì)胞復(fù)蘇與培養(yǎng)41-42
• 3.2.6 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)42
• 3.2.7 產(chǎn)物的表征42
• 3.3 結(jié)果與討論42-47
• 3.3.1 金納米棒的合成與表征43-44
• 3.3.2 殼聚糖基金納米棒雜化材料的制備與表征44-47
• 3.3.3 金納米棒及殼聚糖基納米金雜化材料的細(xì)胞毒性作用47
• 3.4 小結(jié)47-48
• 參考文獻(xiàn)48-51
• 第四章 載阿霉素的巰基化殼聚糖納米粒的制備及表征51-69
• 4.1 前言51-52
• 4.2 實(shí)驗(yàn)部分52-56
• 4.2.1 試劑52
• 4.2.2 儀器和設(shè)備52-53
• 4.2.3 載阿霉素的巰基化殼聚糖自組裝納米粒的制備53
• 4.2.4 載阿霉素的巰基化殼聚糖自組裝納米粒的形態(tài)及粒徑分析53-54
• 4.2.5 載藥量和包封率的測定54
• 4.2.6 體外藥物釋放54
• 4.2.7 HeLa細(xì)胞與L929細(xì)胞的復(fù)蘇與培養(yǎng)54-55
• 4.2.8 細(xì)胞毒性實(shí)驗(yàn)55
• 4.2.9 HeLa細(xì)胞對游離DOX與載藥納米粒的攝取實(shí)驗(yàn)55-56
• 4.3 結(jié)果與討論56-65
• 4.3.1 載阿霉素的巰基化殼聚糖自組裝納米粒的制備及表征56-58
• 4.3.2 載藥量和包封率的測定58-60
• 4.3.3 體外藥物釋放60-62
• 4.3.4 空白納米粒、載藥納米粒及游離DOX的細(xì)胞毒性作用62-64
• 4.3.5 載阿霉素自組裝納米粒的體外HeLa細(xì)胞攝取的流式分析64-65
• 4.4 小結(jié)65-66
• 參考文獻(xiàn)66-69
• 全文總結(jié)69-70
• 發(fā)表論文情況70-71
• 致謝71

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前5條

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  本文關(guān)鍵詞：巰基化殼聚糖衍生物雜化材料及納米藥物載體的研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

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本文編號：315483