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RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)在感染松動(dòng)假體周?chē)侨芙庵械淖饔?/H1>
發(fā)布時(shí)間:2021-01-17 09:36
  RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)的失衡已被大量文獻(xiàn)證實(shí)與THA術(shù)后無(wú)菌性松動(dòng)引起的假體周?chē)侨芙饷芮邢嚓P(guān),但感染松動(dòng)引起的假體周?chē)侨芙馄浒l(fā)病機(jī)制則鮮見(jiàn)報(bào)道。本研究擬通過(guò)檢測(cè)RANKL/RANK/OPG信號(hào)通路在體外細(xì)胞和界膜組織中的表達(dá)情況,探討RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)是否與感染松動(dòng)引起假體周?chē)侨芙獾陌l(fā)病相關(guān)。第一章RANK在巨噬細(xì)胞中的表達(dá)目的:探討凝血酶和UHMWPE顆粒處理后巨噬細(xì)胞中RANK mRNA的表達(dá)差異。方法:用佛波酯將U937單核細(xì)胞誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞,通過(guò)細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察、免疫學(xué)標(biāo)志檢查及體外吞噬功能檢測(cè)等方法鑒定是否成功。將UHMWPE顆粒用球磨機(jī)研磨后進(jìn)行其直徑、性質(zhì)和內(nèi)毒素含量檢測(cè)。將誘導(dǎo)成功的巨噬細(xì)胞分別與凝血酶和制備好的UHMWPE顆粒共同培養(yǎng),MTT法檢測(cè)凝血酶和UHMWPE顆粒對(duì)巨噬細(xì)胞的最佳濃度。將巨噬細(xì)胞分為細(xì)胞+凝血酶組、細(xì)胞+UHMWPE顆粒組和單純細(xì)胞組(對(duì)照組),實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù)檢測(cè)RANK mRNA在三種巨噬細(xì)胞中的表達(dá)差異。結(jié)果:U937單核細(xì)胞經(jīng)佛波酯處理后能成功被誘導(dǎo)為巨噬細(xì)胞,具備巨噬細(xì)胞的形態(tài)特征、表達(dá)特異的分化抗原... 

【文章來(lái)源】:中南大學(xué)湖南省 211工程院校 985工程院校 教育部直屬院校

【文章頁(yè)數(shù)】:104 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:博士

【部分圖文】:

RANKL/RANK/OPG系統(tǒng)在感染松動(dòng)假體周?chē)侨芙庵械淖饔? src='http://www.bigengculture.com/uploads/allimg/20210117/1610847391.92216.jpeg'  style='max-width:500px'></p><br> 不同濃度的UHMWPE顆粒對(duì)巨嘆細(xì)<br><p align='center'><img src='http://www.bigengculture.com/uploads/allimg/20210117/1610847392.34120.jpeg' alt='凝血酶,細(xì)胞活性,細(xì)胞,細(xì)胞存活率' style='max-width:500px'></p><br> MTT法測(cè)得各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組的細(xì)胞存活率(%)見(jiàn)表1-1、表1-2及圖1-7、圖1-8。統(tǒng)計(jì)學(xué)分析發(fā)現(xiàn),Img/ml UHMWPE顆粒組巨唾細(xì)胞存活率最低(PcO.Ol),其他兩個(gè)實(shí)驗(yàn)組間比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P〉0.05) ; 50U/ml凝血酶細(xì)胞存活率最高(P<0.05)。因此,本研究在隨后的實(shí)驗(yàn)中選擇0.1 mg/mlUHMWPE顆粒和50 U/ml凝血酶與巨睡細(xì)胞共培養(yǎng)。表1-1不同濃度的UHMWPE顆粒對(duì)巨唆細(xì)胞細(xì)胞活性的影響(i±s)組別	細(xì)胞存活率(%)對(duì)照組	100O.Olmg/ml UHMWPE	85.60±7.920.1 mg/ml UHMWPE	89.22±7.281 mg/ml UHMWPE	62.04士4.20表1-1不同農(nóng)度的凝血酶對(duì)巨銀細(xì)胞細(xì)胞活性的影響(x± S)組別	細(xì)胞存活率(%)對(duì)照組	10010 U/ml 凝血酶	121.12±3.7150 U/ml 凝血酶	127.52±4.02100 u/ml 凝血酶	84.68±3.4015 <br><br><p align='center'><img src='http://www.bigengculture.com/uploads/allimg/20210117/1610847392.55725.jpeg' alt='表達(dá)差異,凝血酶,處理組,表達(dá)水平' style='max-width:500px'></p><br> 基因的Ct值,用法進(jìn)行換算后進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析,得到目的基因的相對(duì)表達(dá)量(RQ值),結(jié)果如圖1-9及表1-3。經(jīng)UHMWPE顆粒處理后的巨噬細(xì)胞,其RANK mRNA表達(dá)水平RQ值(5.46±1.28 )明顯高于凝血酶處理組(1.69±0.40)和對(duì)照組(單純細(xì)胞組)(0.11±0.03),P<0.01o同時(shí)凝血酶處理組RANK mRNA表達(dá)水平也明顯高于對(duì)照組(PO.Ol),表明經(jīng)凝血酶、顆粒處理后巨唾細(xì)胞中RANK mRNA特異性高表達(dá),特別是經(jīng)UHMWPE顆粒處理后的巨隨細(xì)胞。表1-3經(jīng)不同處理后巨嗟細(xì)胞中RANK mRNA的表達(dá)水平組別	RANK mRNA的RQ值凝血酶處理組	1.69±0.40顆粒處理組	5.46±1.28對(duì)照組	0.11±0.0316 <br><br>【參考文獻(xiàn)】:<br>期刊論文<br>[1]一種高效的巨噬細(xì)胞體外誘導(dǎo)培養(yǎng)方法[J]. 張春蕾,華正宇,袁小林,楊真,張青,李小歡.  大連醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2011(05)<br>
[2]顯微拉曼光譜用于研究大氣單顆粒表面非均相反應(yīng)[J]. 趙德峰,朱彤,陳琦,劉穎君,張澤鋒.  中國(guó)科學(xué):化學(xué). 2010(12)<br>
[3]細(xì)胞因子信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)抑制蛋白在JAK/STAT信號(hào)通路中的負(fù)反饋調(diào)節(jié)作用[J]. 李敏利,朱人敏.  醫(yī)學(xué)研究生學(xué)報(bào). 2009(03)<br>
[4]松動(dòng)的人工髖關(guān)節(jié)界膜的研究[J]. 馬建兵,劉淼,姚建鋒,張育民.  中國(guó)矯形外科雜志. 2009(06)<br>
[5]人工關(guān)節(jié)置換術(shù)后人工關(guān)節(jié)松動(dòng)的原因[J]. 杜開(kāi)利,馬若凡,丁悅.  中華關(guān)節(jié)外科雜志(電子版). 2007(03)<br>
[6]超高分子量聚乙烯顆粒對(duì)巨噬細(xì)胞影響的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 毛遠(yuǎn)青,朱振安,湯亭亭,李宏斌.  中華外科雜志. 2006(12)<br>
[7]巨噬細(xì)胞對(duì)聚乙烯和鈦合金顆粒吞噬反應(yīng)的差異性[J]. 毛遠(yuǎn)青,朱振安,湯亭亭,王曉慶,袁振,劉銘.  上海交通大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2006(05)<br>
[8]金黃色葡萄球菌不同培養(yǎng)與反應(yīng)條件對(duì)其血漿凝固酶的影響[J]. 劉真真,林濤,李光偉,楊雪嬌,黃偉.  檢驗(yàn)檢疫科學(xué). 2005(05)<br>
[9]不同材料人工關(guān)節(jié)磨損顆粒對(duì)假體——骨界面骨形成影響的比較研究[J]. 蔡谞,王繼芳,盧世璧,趙斌,張笑明,侯寧.  中國(guó)生物醫(yī)學(xué)工程學(xué)報(bào). 2003(06)<br>
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					<br/><br/>本文編號(hào):<b>2982621</b><div style='float:right'>
					

			
				
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