本文關(guān)鍵詞：雙因子誘導(dǎo)骨組織工程支架快速血管化的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的本實(shí)驗(yàn)研究通過解剖游離新西蘭大耳兔股動(dòng)靜脈血管束,并將其植入內(nèi)、外層分別復(fù)合VEGF/PDGF因子的雙層同心軸型PLGA支架內(nèi),建立組織工程支架快速誘導(dǎo)血管化的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。利用該雙層軸型支架自中心至外周,對(duì)應(yīng)血管生成不同時(shí)相的空間梯度雙因子誘導(dǎo)環(huán)境,觀察研究骨組織工程支架內(nèi)快速血管再生進(jìn)程中新生血管的組織學(xué)及超微結(jié)構(gòu)特征及其隨實(shí)驗(yàn)觀察時(shí)間延長的改建與成熟的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律。研究擬針對(duì)頜骨獨(dú)特的軸型血供解剖特點(diǎn),探索一種高效促進(jìn)骨組織工程支架血管化的新途徑。 方法首先以溶液澆鑄-顆粒瀝取法制備36套孔徑150um-300um,孔隙率70%的疏松多孔雙層支架(長度2.5cm,最大外徑8mm,最小內(nèi)徑2mm),并將內(nèi)外層支架套疊,形成同軸雙層結(jié)構(gòu)。3月齡雄性新西蘭大耳兔18只納入實(shí)驗(yàn),解剖并游離股動(dòng)靜脈血管束,將其包裹于雙層軸型PLGA支架中央,按照細(xì)胞因子在雙層支架上不同的空間復(fù)合方式分三組：(1)實(shí)驗(yàn)組(動(dòng)物8只,標(biāo)本16腿側(cè))：內(nèi)層復(fù)合VEGF,外層復(fù)合PDGF:(2)實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(動(dòng)物8只,標(biāo)本16腿側(cè))：內(nèi)層復(fù)合VEGF,外層空白；(3)空白對(duì)照組(動(dòng)物2只,標(biāo)本4腿側(cè))：內(nèi)外層支架均空白。實(shí)驗(yàn)組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組于術(shù)后第7、10、14、21天分別取材2只動(dòng)物,(空白對(duì)照組術(shù)后7、10滅取材),全麻下進(jìn)行微血管鑄型,并整體切取支架及其周圍軟組織的標(biāo)本,行超微結(jié)構(gòu)及組織學(xué)觀察研究,對(duì)比分析3組PLGA支架孔隙空間內(nèi)新生血管組織的形態(tài)與結(jié)構(gòu)特點(diǎn)。 結(jié)果術(shù)后第7天,實(shí)驗(yàn)組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組血管鑄型電鏡觀察可見,股動(dòng)靜脈血管壁存在大量沿血管束長軸排列的內(nèi)皮細(xì)胞核壓跡,動(dòng)靜脈壁見成簇的血管芽發(fā)生,空白對(duì)照組無明顯變化。第10天,實(shí)驗(yàn)組與實(shí)驗(yàn)對(duì)照組標(biāo)本可見新生血管與纖維組織自動(dòng)靜脈壁沿支架孔隙空間由內(nèi)層支架向外層支架放射狀生長并貫通支架全層,密度由內(nèi)向外逐漸降低。實(shí)驗(yàn)組新生血管靠近外層支架處較厚,而近動(dòng)靜脈束的內(nèi)層支架主要為單層內(nèi)皮細(xì)胞襯平。實(shí)驗(yàn)對(duì)照組主要為單層內(nèi)皮細(xì)胞襯里�？瞻讓�(duì)照組未見新生血管。第14天,實(shí)驗(yàn)組貫通支架內(nèi)外的新生血管進(jìn)一步增粗,管壁呈分層結(jié)構(gòu)。實(shí)驗(yàn)對(duì)照組貫通支架內(nèi)外的新生血管較幼稚,仍以單層內(nèi)皮細(xì)胞襯里為主。兩組均形成以動(dòng)靜脈束為中心的三維立體血管網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu),血管間相互吻合,但缺乏明顯的分級(jí)結(jié)構(gòu)。第21天,實(shí)驗(yàn)組支架內(nèi)新生血管以成熟血管為主,管壁圓潤,分層清晰。形成以動(dòng)靜脈血管束為中心,分級(jí)明確,層次清晰的微循環(huán)血管網(wǎng)絡(luò)。而實(shí)驗(yàn)對(duì)照組新生血管退化吸收,新生血管密度明顯低于實(shí)驗(yàn)組支架內(nèi)可見散在的血細(xì)胞。 結(jié)論疏松多孔的PLGA支架植入早期無明顯誘導(dǎo)血管新生的能力；單純復(fù)合VEGF因子的PLGA支架對(duì)血管的新生有明顯的促進(jìn)作用,但這些血管大多為幼稚的無功能血管,并且逐步退化吸收；而VEGF和PDGF因子聯(lián)合應(yīng)用的PLGA支架,可有效促進(jìn)早期血管新生與成熟,并隨時(shí)間間期延長逐步改建形成結(jié)構(gòu)成熟、功能穩(wěn)定的血循環(huán)系統(tǒng)。該空間梯度雙因子誘導(dǎo)模式可以有力促進(jìn)PLGA支架的快速血管化,為骨組織工程種子細(xì)胞構(gòu)建良好的存活與增殖環(huán)境,并為其提供必需的氧和養(yǎng)份支持,從而促進(jìn)早期成骨,有望進(jìn)一步提高骨組織再生重建效能。
【關(guān)鍵詞】：骨組織工程 血管化 動(dòng)靜脈束 PLGA 血管新生 動(dòng)物實(shí)驗(yàn) 支架
【學(xué)位授予單位】：天津醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 中文摘要4-6
• Abstract6-10
• 縮略語10-11
• 前言11-14
• 研究現(xiàn)狀、成果11-12
• 研究目的、方法12-14
• 1 對(duì)象和方法14-17
• 1.1 同軸雙層PLGA支架制備、消毒與儲(chǔ)存14
• 1.2 股動(dòng)靜脈束解剖游離、支架植入及護(hù)理14-16
• 1.3 標(biāo)本處理、取材及檢測(cè)16-17
• 2 結(jié)果17-23
• 2.1 HE切片18-21
• 2.2 掃描電鏡21-23
• 3 討論23-31
• 3.1 因子的應(yīng)用24-25
• 3.2 顯微外科血管重構(gòu)促進(jìn)組織工程血管進(jìn)程25-26
• 3.3 同軸雙層支架設(shè)計(jì)26
• 3.4 新生血管檢測(cè)手段26-27
• 3.5 血管新生機(jī)制27-28
• 3.6 血管新生多因素共同影響28-31
• 結(jié)論31-32
• 參考文獻(xiàn)32-37
• 發(fā)表論文和參加科研情況說明37-38
• 附錄38-42
• 綜述42-58
• 參考文獻(xiàn)50-58
• 致謝58

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：298118