本文關(guān)鍵詞：Ti表面四種生物分子功能修飾層的對(duì)比研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：冠心病是導(dǎo)致人類死亡的第一殺手,旁路搭橋術(shù)和冠狀動(dòng)脈介入是治療冠心病的主要手段。然而,當(dāng)外物植入體內(nèi)后,材料表面容易吸附多種生物分子,導(dǎo)致其變形甚至變性,引發(fā)血栓和再狹窄等問題,最終植入失敗。目前發(fā)現(xiàn)天然內(nèi)皮細(xì)胞層仍是與血液接觸的最理想界面,特別是對(duì)于長(zhǎng)期植入體內(nèi)的醫(yī)療器械。內(nèi)皮細(xì)胞具有天然抗凝能力,能夠維護(hù)血管內(nèi)微環(huán)境平衡,因此,如何使植入醫(yī)療器械表面在抗凝的基礎(chǔ)上快速覆蓋一層完整連續(xù)內(nèi)皮細(xì)胞層成為研究者關(guān)注的焦點(diǎn)。經(jīng)過不懈的努力,現(xiàn)已有了許多關(guān)于材料表面抗凝/促內(nèi)皮雙功能修飾層構(gòu)建的成果。雖然這些修飾層都在一定程度上實(shí)現(xiàn)了抗凝和再內(nèi)皮化,但也未能完全解決這些難題,那么哪些修飾層值得我們繼續(xù)研究、優(yōu)化和完善下去呢?為了回答這個(gè)問題,本文選擇了四種具有代表性的抗凝/促內(nèi)皮雙功能修飾層(納米顆粒體系、共價(jià)體系、靜電體系以及生物素-親和素體系),通過理化性質(zhì)和生物相容性的對(duì)比研究探索構(gòu)建方式(堿活化共固定、固定納米顆粒)、粘附分子(REDV、 Fn、Ln)以及生物因子(VEGF、SDF-1α)對(duì)修飾層的影響,然后就四種體系在這三個(gè)方面的優(yōu)劣表現(xiàn)篩選出最佳修飾層。理化性質(zhì)和生物相容性的對(duì)比研究發(fā)現(xiàn),納米顆粒構(gòu)建方式能夠提高肝素的裝載量和活性,進(jìn)而發(fā)揮出優(yōu)異的抗凝潛力,但是暴露的多巴胺表面會(huì)促進(jìn)血小板鋪展,APTT檢測(cè)結(jié)果為不凝,同時(shí)細(xì)胞相容性不理想；相較而言,堿活化共固定方式構(gòu)建的樣品表面肝素裝載量和活性較低,但足以減少血小板的鋪展、提高APTT檢測(cè)結(jié)果以及促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的粘附和增殖。因此,本工作認(rèn)為堿活化共固定的構(gòu)建方式更適宜于抗凝/雙功能修飾層的構(gòu)建。生物相容性結(jié)果顯示,多肽REDV可以高效捕獲目的細(xì)胞同時(shí)抑制血小板的粘附,但是缺乏其它功能區(qū)域協(xié)同作用,調(diào)節(jié)細(xì)胞鋪展、存活以及增殖等行為的能力不足；蛋白Ln參與構(gòu)建的功能層表面氨基密度較高,內(nèi)皮細(xì)胞初期粘附數(shù)量和鋪展情況不理想,進(jìn)而影響內(nèi)皮細(xì)胞增殖行為；對(duì)比發(fā)現(xiàn),蛋白Fn能促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的粘附、鋪展和增殖等行為。因此,本工作認(rèn)為蛋白Fn為構(gòu)建抗凝/雙功能修飾層的理想粘附分子。通過細(xì)胞相容性結(jié)果發(fā)現(xiàn),功能因子SDF-1α參與構(gòu)建的修飾層擁有抑制平滑肌細(xì)胞增殖和促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞增殖、遷移的能力,但效果不顯著；相反,VEGF不僅不會(huì)影響修飾層抑制平滑肌的能力,還能顯著促進(jìn)內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和遷移。因此,本工作認(rèn)為VEGF功能因子參與構(gòu)建的抗凝/雙功能修飾層效果更理想。綜上所述,本工作通過對(duì)比研究發(fā)現(xiàn)堿活化共固定構(gòu)建方式、Fn粘附分子以及VEGF功能因子可以在修飾層中發(fā)揮優(yōu)異的抗凝或促內(nèi)皮功能,因此篩選出靜電體系為較優(yōu)異體系,為下一步完善和優(yōu)化工作提供了一定理論依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：Ti 抗凝 內(nèi)皮化 細(xì)胞粘附分子 內(nèi)皮生長(zhǎng)因子 基質(zhì)細(xì)胞衍生因子
【學(xué)位授予單位】：西南交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R318.08
【目錄】：

• 摘要6-8
• Abstract8-14
• 第1章 緒論14-26
• 1.1 冠心病14-15
• 1.1.1 冠心病及治療方法14-15
• 1.1.2 治療引發(fā)的病變問題15
• 1.2 管支架發(fā)展及存在問題15-16
• 1.2.1 金屬裸支架15
• 1.2.2 藥物洗脫支架15-16
• 1.3 原位內(nèi)皮化16-18
• 1.3.1 內(nèi)皮細(xì)胞16-17
• 1.3.2 內(nèi)皮祖細(xì)胞17
• 1.3.3 體外內(nèi)皮化17-18
• 1.3.4 原位內(nèi)皮化18
• 1.4 支架材料表面生物分子抗凝/再內(nèi)皮化功能修飾18-23
• 1.4.1 抗凝血功能修飾19-20
• 1.4.2 促進(jìn)再內(nèi)皮化功能修飾20-22
• 1.4.3 誘導(dǎo)再內(nèi)皮化功能修飾22-23
• 1.5 論文研究目的與意義、主要研究?jī)?nèi)容及技術(shù)路線23-26
• 1.5.1 研究的目的與意義23
• 1.5.2 研究?jī)?nèi)容23-25
• 1.5.3 技術(shù)路線25-26
• 第2章 四種體系功能修飾層的構(gòu)建26-41
• 2.1 引言26
• 2.2 納米顆粒體系的構(gòu)建26-30
• 2.2.1 引言26-27
• 2.2.2 實(shí)驗(yàn)試劑27-28
• 2.2.3 構(gòu)建方法28-29
• 2.2.4 表征結(jié)果29-30
• 2.3 共價(jià)體系的構(gòu)建30-33
• 2.3.1 引言30
• 2.3.2 實(shí)驗(yàn)試劑30-31
• 2.3.3 構(gòu)建方法31-32
• 2.3.4 表征結(jié)果32-33
• 2.4 靜電體系的構(gòu)建33-36
• 2.4.1 引言33
• 2.4.2 實(shí)驗(yàn)試劑33-34
• 2.4.3 構(gòu)建方法34
• 2.4.4 表征結(jié)果34-36
• 2.5 生物素-親和素的構(gòu)建36-38
• 2.5.1 引言36
• 2.5.2 實(shí)驗(yàn)試劑36
• 2.5.3 構(gòu)建方法36-37
• 2.5.4 表征結(jié)果37-38
• 2.6 總述38-41
• 第3章 四個(gè)體系功能修飾層理化性質(zhì)的對(duì)比研究41-51
• 3.1 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器41
• 3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑41
• 3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器41
• 3.2 理化性質(zhì)表征方法及結(jié)果41-50
• 3.2.1 紅外圖譜41-42
• 3.2.2 表面形貌42-44
• 3.2.3 表面親疏水性44-45
• 3.2.4 阿辛藍(lán)染色45-46
• 3.2.5 酸性橙定量氨基46-47
• 3.2.6 肝素釋放47-49
• 3.2.7 TBO定量表面肝素49-50
• 3.3 本章小結(jié)50-51
• 第4章 四個(gè)體系功能修飾層生物相容性的對(duì)比研究51-63
• 4.1 實(shí)驗(yàn)試劑及儀器51
• 4.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑51
• 4.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器51
• 4.2 四個(gè)體系功能修飾層血液相容性的對(duì)比研究51-54
• 4.2.1 血小板粘附行為評(píng)價(jià)51-53
• 4.2.2 外源性凝血時(shí)間評(píng)價(jià)53-54
• 4.3 四個(gè)體系功能修飾層細(xì)胞相容性的對(duì)比研究54-60
• 4.3.1 內(nèi)皮細(xì)胞粘附行為評(píng)價(jià)54-58
• 4.3.2 內(nèi)皮細(xì)胞增殖行為評(píng)價(jià)58-60
• 4.4 本章小結(jié)60
• 4.4.1 血液相容性的對(duì)比研究60
• 4.4.2 細(xì)胞相容性的對(duì)比研究60
• 4.5 綜合分析60-63
• 第5章 VEGF、SDF-1α兩種生物因子引入Hep/Fn微環(huán)境的對(duì)比研究初探63-77
• 5.1 VEGF、SDF-1α引入Hep/Fn功能修飾層63-65
• 5.1.1 引言63
• 5.1.2 實(shí)驗(yàn)試劑63-64
• 5.1.3 構(gòu)建方法64-65
• 5.2 VEGF、SDF-1α引入功能修飾層后表征結(jié)果以及理化性質(zhì)的對(duì)比研究65-68
• 5.2.1 X射線光電子能譜65-66
• 5.2.2 表面親疏水性66-67
• 5.2.3 生物因子釋放67-68
• 5.3 VEGF、SDF-1α引入功能修飾層后細(xì)胞相容性的對(duì)比研究68-75
• 5.3.1 內(nèi)皮細(xì)胞的靜態(tài)培養(yǎng)68-71
• 5.3.2 內(nèi)皮細(xì)胞的遷移71-73
• 5.3.3 平滑肌細(xì)胞的靜態(tài)培養(yǎng)73-75
• 5.4 本章小結(jié)75-77
• 第6章 機(jī)理分析77-87
• 6.1 構(gòu)建方法與抗凝分子裝載密度、活性的關(guān)系77-79
• 6.2 粘附分子促內(nèi)皮功能的對(duì)比研究79-82
• 6.2.1 Ln和Fn蛋白促內(nèi)皮粘附、增殖能力的對(duì)比研究79-81
• 6.2.2 REDV多肽和Fn蛋白抑制血小板粘附、促內(nèi)皮能力的對(duì)比研究81-82
• 6.3 VEGF、SDF促內(nèi)皮化功能的對(duì)比研究82-85
• 6.3.1 VEGF、SDF促內(nèi)皮增殖、遷移能力的對(duì)比研究82-84
• 6.3.2 VEGF、SDF引入HFn修飾層后協(xié)同作用的研究84-85
• 6.4 表面氨基密度與細(xì)胞初期粘附的關(guān)系85-87
• 結(jié)論87-89
• 致謝89-90
• 參考文獻(xiàn)90-101
• 攻讀碩士期間發(fā)表的論文及參與科研項(xiàng)目101

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前3條

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  本文關(guān)鍵詞：Ti表面四種生物分子功能修飾層的對(duì)比研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：297659