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殼寡糖/膠原復(fù)合凝膠對前成骨細(xì)胞MC3T3-E1的影響及作用機(jī)制初探

發(fā)布時(shí)間:2021-01-08 11:28
  殼寡糖是一類由β-1,4糖苷鍵連接的2-氨基葡萄糖組成的聚合度小于10的低聚糖,與殼聚糖相比具有相對分子質(zhì)量小、水溶性好、生物活性高、易于人體吸收等。殼寡糖與細(xì)胞相互作用的生物活性與其聚合度有關(guān)。本文首先利用殼寡糖的生物活性以及膠原的良好生物學(xué)性能,構(gòu)建了膠原/殼寡糖復(fù)合凝膠,以前成骨細(xì)胞MC3T3-E1s為靶細(xì)胞,從細(xì)胞的增殖以及相關(guān)成骨基因表達(dá)水平角度評價(jià)該復(fù)合凝膠對細(xì)胞的增殖以及分化效果的影響。在此基礎(chǔ)上構(gòu)建了膠原/殼單糖復(fù)合凝膠,考察不同的單糖復(fù)合凝膠體系對于細(xì)胞增殖分化的影響。最后對不同聚合度的糖類對細(xì)胞增殖分化影響的差異及寡糖對細(xì)胞影響機(jī)制進(jìn)行了初步探討。研究結(jié)果表明:(1)相對于純膠原凝膠,膠原/殼寡糖復(fù)合凝膠對前成骨細(xì)胞MC3T3-E1s的生長,黏附,增殖以及成骨相關(guān)基因的表達(dá)都有一定程度的促進(jìn)效果,且這種促進(jìn)效果與復(fù)合凝膠中殼寡糖的含量有關(guān)。(2)相對于純膠原凝膠,膠原/殼單糖復(fù)合凝膠對前成骨細(xì)胞MC3T3-E1s的生長,增殖以及成骨相關(guān)基因的表達(dá)都有一定程度的促進(jìn)效果,而在不同的殼單糖復(fù)合的膠原/殼單糖復(fù)合凝膠中,又以膠原/殼五糖復(fù)合凝膠的生物活性更高,對細(xì)胞的促進(jìn)... 

【文章來源】:暨南大學(xué)廣東省 211工程院校

【文章頁數(shù)】:71 頁

【學(xué)位級別】:碩士

【部分圖文】:

殼寡糖/膠原復(fù)合凝膠對前成骨細(xì)胞MC3T3-E1的影響及作用機(jī)制初探


本文研究方案

示意圖,殼寡糖,復(fù)合凝膠,膠原


圖 2.1:膠原/混合殼寡糖復(fù)合凝膠的制備以及種植細(xì)胞的示意igure 2.1: Schematic diagram of preparation of Col/nCOS hydrogels MC3T3-E1s seeding.表 2.1:膠原/混合殼寡糖復(fù)合凝膠的組分比例以及 pH 值Table 2. 1: Formation of Col/nCOS gel. ofmationCol(10mg/ml)(μL)nCOS(1.0wt%)(μL)β-GP(58wt%)(wt%)ol 1000 0 5.1 COS1 1000 100 5.1 COS2 1000 200 5.1 COS3 1000 300 5.1

復(fù)合凝膠,殼寡糖,膠原,顏色


當(dāng)P<0.01時(shí)表示差異極顯著。2.4 結(jié)果與討論2.4.1 膠原/混合殼寡糖復(fù)合凝膠的表征10mg/mL 的膠原溶液,1.0wt%的混合殼寡糖溶液和 58wt%的 β-GP 的初始 pH值分別為 3.54,5.28 和 9.12。按照表 1 的比例混合后,溶液 pH 值均處于 7.15-7.25之間,適合細(xì)胞生長且能凝膠。膠原/復(fù)合殼寡糖混合溶液在 0-4℃時(shí)處于液體狀,當(dāng)溫度升至 37℃時(shí),則轉(zhuǎn)變?yōu)槟z,并且再次降溫也不會(huì)轉(zhuǎn)化為液態(tài)。復(fù)合凝膠的形態(tài)如圖 2.2 所示,隨著復(fù)合殼寡糖在混合溶液中比例的增大,復(fù)合凝膠顏色加深,越來越黃。

【參考文獻(xiàn)】:
期刊論文
[1]低分子量可溶性殼寡糖對MC3T3-E1成骨細(xì)胞增殖和分化的影響[J]. 閻春玲,王春波,劉萬順.  中國海洋藥物. 2010(03)
[2]羧甲基殼聚糖的制備及其在抗菌紙中的應(yīng)用[J]. 馬瀅,劉鵬濤,劉忠.  功能材料. 2010(04)
[3]殼寡糖促進(jìn)小鼠坐骨神經(jīng)再生的實(shí)驗(yàn)研究[J]. 蔣茂榮,諸葛曉旻,丁斐.  蘇州大學(xué)學(xué)報(bào)(醫(yī)學(xué)版). 2010(01)
[4]殼寡糖及其衍生物對體外培養(yǎng)成骨細(xì)胞增殖的作用特點(diǎn)[J]. 金黎明,魏長征,田文杰,趙小菁,王雅玲,范圣第.  中國組織工程研究與臨床康復(fù). 2008(19)
[5]殼寡糖對小鼠免疫系統(tǒng)的調(diào)節(jié)作用[J]. 竇江麗,譚成玉,白雪芳,杜昱光.  中國海洋藥物. 2005(05)
[6]殼寡糖對骨折成骨細(xì)胞內(nèi)骨形態(tài)發(fā)生蛋白的影響[J]. 張偉,沈若武,王守彪.  齊魯醫(yī)學(xué)雜志. 2005(03)
[7]膠原凝膠復(fù)合物治療褥瘡的臨床研究[J]. 楊小紅,李斯明,戴麗冰,鄒海燕,彭燕豪.  創(chuàng)傷外科雜志. 2000(04)

博士論文
[1]殼寡糖細(xì)胞內(nèi)的亞定位及其在NF-κB通路、抗腫瘤、成骨分化中的作用[D]. 李賢.暨南大學(xué) 2011



本文編號(hào):2964516

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